◆作者:趙興飛 付新亮 黃運(yùn)茂
◆單位:仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院
非洲豬瘟是由非洲豬瘟病毒引起豬高熱、呼吸急促、全身廣泛性出血等臨床癥狀的高度接觸性、致死性的烈性傳染病。ASFV主要感染各品種的家豬、非洲和歐亞野豬、鈍緣蜱等,其中疣豬和灌木豬均可被感染,但不表現(xiàn)出臨床癥狀,疣豬等非洲野豬和鈍緣蜱為ASFV的宿主。最急性和急性型感染死亡率為100%。因此,世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為必須報(bào)告動(dòng)物疫病,我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病。
世界上首個(gè)ASF疫情報(bào)道,可追溯于1921年,肯尼亞發(fā)生ASF疫情;此后,1957年,西班牙機(jī)場(chǎng)附近豬場(chǎng)首次發(fā)現(xiàn)ASF疫情,經(jīng)調(diào)查是豬場(chǎng)飼喂機(jī)場(chǎng)的泔水引起疫情爆發(fā)。雖然此次疫情被迅速撲滅并控制,但是2007年,ASF疫情再次席卷歐洲大陸,起初被誤診為豬圓環(huán)病,加劇了疫情,疫情很快擴(kuò)散到了俄羅斯等國(guó)家,非洲豬瘟也隨著野豬活動(dòng)被帶到了高加索地區(qū)。由于東歐地區(qū)的野豬數(shù)量大,加之大多養(yǎng)殖戶采用放養(yǎng)模式,致使東歐成為第二大疫原地。2017年3月27日,俄羅斯遠(yuǎn)東地區(qū)的伊爾庫(kù)茨克州爆發(fā)ASF疫情。2018年8月,我國(guó)遼寧首次檢測(cè)出非洲豬瘟病毒;隨后,ASF疫情迅速在我國(guó)蔓延開(kāi)來(lái)。2019年2月25日,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告,全國(guó)共27個(gè)省份發(fā)生108起,累計(jì)撲殺生豬95萬(wàn)頭,已經(jīng)嚴(yán)重威脅到了我國(guó)的生豬存欄量,同時(shí),也給我國(guó)養(yǎng)殖業(yè)造成了極大的損失。
ASFV是非洲豬瘟病毒科(Asfarviridae)非洲豬瘟病毒屬(Asfivirus)的唯一成員,是目前已知的唯一具有DNA基因組的蟲(chóng)媒病毒。過(guò)去因與彩虹病毒科形態(tài)相似,被劃分到彩虹病毒科,但是其DNA結(jié)構(gòu)與復(fù)制方式與痘病毒相似,1995年,國(guó)際病毒分類委員會(huì)(The International Committee on Taxonomy of Viruses,ICTV)將其列為非洲豬瘟病毒科,該科僅ASFV一屬一種。
ASFV病毒粒子由中心類核、核殼、內(nèi)包膜和二十面體衣殼組成,病毒通過(guò)細(xì)胞質(zhì)膜出芽獲得外包膜。ASFV屬單分子線狀雙鏈DNA病毒,此病毒基因組較大,在170~192kb之間,其基因組包括一個(gè)保守中心和兩端可變區(qū),這些可變區(qū)可編碼5種多基因家族,這與病毒基因組的可變性相關(guān)。依據(jù)ASFV的P72基因,可將ASFV分為24個(gè)基因型,其中有22個(gè)基因型系主要分布在東非、南非等國(guó)家,第23個(gè)基因型系分布在埃塞俄比亞等東非地區(qū),而且分析發(fā)現(xiàn)B602L基因中央可變區(qū)氨基酸序列不同,含有新的四聚體重復(fù)。目前我國(guó)發(fā)生的ASFV毒株是基因II型,有研究發(fā)現(xiàn),我國(guó)的ASFV基因II型毒株與其他國(guó)家基因II型毒株的基因組存在54~107個(gè)變異位點(diǎn),并引起10~38基因中氨基酸殘基的變化,與POL/2015/Podl aski e株的同源性最高。
豬是ASFV唯一的自然宿主。目前研究表明,除家豬與野豬感染外,其他動(dòng)物均不感染或感染呈隱性經(jīng)過(guò),且發(fā)病豬和帶毒野豬體內(nèi)含有大量高滴度的病毒,并持續(xù)向環(huán)境中排毒,因此,發(fā)病豬與帶毒野豬是ASFV的主要傳播宿主。引起家豬感染ASFV的主要傳染源是發(fā)病豬、感染的豬肉制品、污染的泔水、飼料、設(shè)備、使用器具以及媒介生物傳播等。
有研究顯示,ASFV耐低溫(4℃1年以上)、耐pH范圍廣(pH 3.9~11.5),在血液、糞便和組織中可長(zhǎng)期存活,凍肉中存活數(shù)年至數(shù)十年,未熟肉品、腌肉、泔水中可長(zhǎng)時(shí)間存活。也有研究者認(rèn)為,鈍緣軟蜱、廄螫蠅、虻等是一些較長(zhǎng)距離的ASFV傳播的媒介,且已有證據(jù)表明吸血蠅能機(jī)械傳播ASFV導(dǎo)致豬只感染、患病。也有研究發(fā)現(xiàn),某些種類硬蜱(蓖子硬蜱和網(wǎng)狀革蜱)試驗(yàn)性吸食含ASFV的血液后,雖未發(fā)現(xiàn)病毒復(fù)制,但ASFV-DNA可以在喂食后長(zhǎng)達(dá)6周和8周仍被檢測(cè)出來(lái),并收集感染豬身上的豬血虱也檢出ASFV-DNA陽(yáng)性。
非洲豬瘟的自然感染潛伏期,家豬為4-19d,野豬為15d左右。但根據(jù)臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,非洲豬瘟的感染期一般僅在2~5d,病豬發(fā)病之后,體溫迅速升高至40℃以上,并且該體溫能持續(xù)4d左右,至病豬死亡的前48h,體溫下降,并且病豬的臨床癥狀直至體溫下降才會(huì)得到顯著體現(xiàn),可見(jiàn)這與普通豬瘟的“發(fā)熱與臨床癥狀同時(shí)出現(xiàn)”的特點(diǎn)并不相同。在病豬開(kāi)始發(fā)熱的第3-4天,病豬的食欲顯著下降,同時(shí)疲于移動(dòng),病情嚴(yán)重的病豬會(huì)出現(xiàn)脈搏加快、呼吸困難等情況。在病豬發(fā)病以后,其耳、鼻、腹部、尾部等位置會(huì)出現(xiàn)具有顯著界線的發(fā)紺。
病理變化方面,病豬耳部的發(fā)紺時(shí)常會(huì)出現(xiàn)腫脹,發(fā)紺中心部位顏色更深,并且能出現(xiàn)彌散性出血,邊緣部分則可能出現(xiàn)褪色情況,其血管內(nèi)出現(xiàn)纖維性血栓,耳部發(fā)紺部位上皮基層組織內(nèi)出現(xiàn)血管血栓壞死情況,同時(shí)在病豬胸腔、腹腔、胸膜、心包等位置都存在大量澄清、黃色或血色的液體,特別是在病豬的腸系膜及腹部?jī)?nèi)臟的上表部位,小血管受到的影響更加嚴(yán)重。在病豬淋巴結(jié)處出現(xiàn)一定程度的出血和血腫,腺臟出現(xiàn)腫大情況,同時(shí)在循環(huán)系統(tǒng)方面,心包液顯著增加。在呼吸系統(tǒng)方面,喉部出現(xiàn)比普通豬瘟更加嚴(yán)重的瘀斑充血及擴(kuò)散性出血。在肝臟方面,肉眼檢查基本正常,但近膽部分組織出現(xiàn)充血及水腫。
非洲豬瘟雖然難以根據(jù)其流行病學(xué)、臨床癥狀以及病理變化進(jìn)行初步診斷,但是借助分子生物學(xué)等一些實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù),就可以很快確診非洲豬瘟。目前常用的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)有以下幾種。
由于目前普遍沒(méi)有接種ASF的疫苗,血清檢測(cè)出ASFV的抗體,則體內(nèi)一定存在ASFV。p72蛋白在細(xì)胞內(nèi)傳代后能夠保持良好的穩(wěn)定性,是ASFV主要的結(jié)構(gòu)蛋白之一,也是血清檢測(cè)的主要抗原,但其在體內(nèi)產(chǎn)生抗體的時(shí)間較晚,大約一周時(shí)間產(chǎn)生,并能持續(xù)較長(zhǎng)一段時(shí)間,因此通過(guò)檢測(cè)是否有抗體的存在而判定是否感染ASF。在早期檢測(cè)中,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)?zāi)軌蚩焖俅_診。如以ASFV保守的結(jié)構(gòu)基因及其編碼的p30、p54蛋白包被抗原建立的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在病毒感染早期的實(shí)驗(yàn)室診斷學(xué)具有意義。但是,對(duì)ASFV可疑病例進(jìn)行檢測(cè)時(shí),常常采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)合間接免疫熒光試驗(yàn)、免疫印跡等多種血清學(xué)試驗(yàn)相結(jié)合進(jìn)一步確診。
qPCR檢測(cè)方法是最靈敏、最有效的病原檢測(cè)方法。雖然PCR是OIE官方推薦的檢測(cè)方法,但qPCR方法的檢測(cè)極限比其提高了10倍。中國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公布的第一批ASF現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)試劑評(píng)價(jià)結(jié)果,11種試劑盒全是針對(duì)ASFV病原學(xué)檢查,大多數(shù)都是運(yùn)用qPCR檢測(cè)方法,且部分公司的產(chǎn)品診斷的特異性和敏感性都高達(dá)100%。
目前,還沒(méi)有針對(duì)ASF有效的疫苗,預(yù)防和控制該病要依靠及早發(fā)現(xiàn)、及早撲滅和實(shí)施嚴(yán)格的運(yùn)輸管理及衛(wèi)生措施。只有嚴(yán)格的衛(wèi)生措施,才能阻止家豬與ASFV的潛在接觸,降低養(yǎng)殖場(chǎng)再次爆發(fā)疫情的可能性。
制定嚴(yán)密的消毒防疫制度。對(duì)車輛及廠區(qū)定期用2%的苛性鈉或2%次氯酸鈉進(jìn)行消毒;空豬舍內(nèi),可用40%甲醛10m L/m3、高錳酸鉀5g/m3計(jì)算用量進(jìn)行熏蒸,消毒時(shí)間一般為20~30min,消毒后要打開(kāi)門窗通風(fēng)換氣一星期以上。
盡量不在ASF疫情發(fā)生過(guò)的地區(qū)引種,如果有必要,盡可能通過(guò)其他方式引種,如引進(jìn)已檢疫的凍精或胚胎。如果是大型養(yǎng)殖場(chǎng),盡量實(shí)施配套化品系自繁自養(yǎng)。
保證提供適宜家豬生長(zhǎng)發(fā)育的溫度、濕度、飼養(yǎng)密度和良好的通風(fēng);飼喂調(diào)質(zhì)的全價(jià)顆粒飼料,提供清潔的飲水;嚴(yán)禁用泔水飼喂豬。定期用詩(shī)滿凈(辛硫磷)、體蟲(chóng)凈(氰戊菊酯)等廣譜殺蟲(chóng)劑,殺滅蠅、蚊、蜱等多種蟲(chóng)害;此外還有誘殺劑營(yíng)章克(甲基吡啶磷)、除蚊蠅等,對(duì)蟑螂等害蟲(chóng)也有很好的殺滅效果。對(duì)于蠅幼蟲(chóng)的殺滅,在流行季節(jié)可在飼料里添加蟲(chóng)蠅凈(環(huán)丙氨嗪)進(jìn)行有效殺滅和防控。
當(dāng)有疑似ASF發(fā)生時(shí),除及時(shí)診斷處置外,應(yīng)盡快向上級(jí)獸醫(yī)管理部門上報(bào)疫情,同時(shí)在疫區(qū)嚴(yán)格實(shí)施封鎖、隔離、消毒、捕殺等綜合措施;對(duì)于捕殺的肉尸、污物要按國(guó)家有關(guān)規(guī)程進(jìn)行無(wú)害化處理。
參考文獻(xiàn):(略)