周青 劉帥妹 張瑞金 石慧 林寧 吳玉璘 許豪勤

[摘要] 目的 探討亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性（MTHFR A1298C）與宮頸癌之間的關(guān)系，為臨床提供可靠數(shù)據(jù)以便更好地預(yù)防和治療宮頸癌。 方法 在萬(wàn)方、中國(guó)知網(wǎng)和PubMed等數(shù)據(jù)庫(kù)檢索研究MTHFR（A1298C）基因多態(tài)性與宮頸癌關(guān)系的中英文文獻(xiàn)，檢索時(shí)間為建庫(kù)至2018年11月12日。通讀全文最終納入Meta分析文獻(xiàn)共7篇，包含病例組823例和對(duì)照組1607例。應(yīng)用Stata軟件在5種遺傳模型中分析，計(jì)算比值比（OR）和95%可信度區(qū)間（CI）評(píng)估關(guān)聯(lián)度，同時(shí)進(jìn)行敏感性分析以及發(fā)表偏倚的評(píng)估。 結(jié)果 MTHFR基因的3種模型C vs. A（OR = 1.11，95%CI：1.02～1.22，P = 0.015），AC vs. AA（OR = 1.24，95%CI：1.02～1.52，P = 0.030）和（CC+AC）vs. AA（OR = 1.15，95%CI：1.03～1.29，P = 0.013）均有明顯相關(guān)性，提示患癌風(fēng)險(xiǎn)增加。 結(jié)論 MTHFR（A1298C）基因多態(tài)性可能會(huì)增加女性患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)。

[關(guān)鍵詞] 亞甲基四氫葉酸還原酶;宮頸癌;基因多態(tài)性;Meta分析

[中圖分類(lèi)號(hào)] R737.3? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-7210（2019）08（c）-0099-04

[Abstract] Objective To analyze the relationship between 5，10-Methyleneterahydrofolate reductase gene polymorphisms （MTHFR A1298C） and cervical cancer in order to provide reliable data for better prevention and treatment of cervical cancer. Methods Database of Wanfang， CNKI and PubMed were searched from the time of building database? to November 12， 2018， and a total of 7 articles about the relationship between MTHFR gene （A1298C） polymorphisms and cervical cancer were included in this Meta-analysis， including 823 cases and 1607 controls. The odds ratio （OR） and 95% confidence interval （CI） were calculated and to assess the associations， meanwhile， the sensitivity and publication bias were analyzed. Results There were significance associations in the comparison C vs. A （OR = 1.11， 95%CI： 1.02-1.22， P = 0.015）， AC vs. AA （OR = 1.24， 95%CI： 1.02-1.52， P = 0.030） and （CC+AC） vs. AA （OR = 1.15， 95%CI： 1.03-1.29， P = 0.013）. Conclusion MTHFR （A1298C） gene polymorphisms may increase the risk for cervical cancer.

[Key words] 5，10-Methyleneterahydrofolate reductase; Cervical cancer; Gene polymorphisms; Meta-analysis

宮頸癌是中國(guó)女性發(fā)病率較高的婦科腫瘤，僅次于乳腺癌位居第二，每年大約有13.5萬(wàn)的新發(fā)病例，病死率占到全球的1/3，嚴(yán)重威脅女性的身體健康[1]。宮頸癌的形成經(jīng)歷多步驟、多因素以及長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)外因素相互作用。高危人乳頭瘤病毒（human papilloma viruses，HPV）持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件，但是單一的HPV感染僅能導(dǎo)致細(xì)胞轉(zhuǎn)化“永生化”，并不能引起上皮細(xì)胞的惡變，而基因某些位點(diǎn)多態(tài)性影響宮頸癌的易感性，環(huán)境與宿主內(nèi)外因相互作用，使得細(xì)胞損傷程度不斷地積累，最終發(fā)生癌變。亞甲基四氫葉酸還原酶（5，10-Methyleneterahydrofolate reductase，MTHFR）功能異常導(dǎo)致人體內(nèi)缺乏葉酸，甲基化和DNA修復(fù)異常，最終造成DNA單鏈甚至雙鏈斷裂，染色體不穩(wěn)定，細(xì)胞癌變[2]。MTHFR基因多態(tài)性使得酶活性發(fā)生變化，與宮頸癌形成以及預(yù)后狀況存在一定的關(guān)系，但因不同地區(qū)、人種以及生活環(huán)境等，導(dǎo)致各研究結(jié)果不一致?；诖耍狙芯坎捎肕eta分析評(píng)估MTHFR基因多態(tài)性與宮頸癌的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)檢索

檢索中英文數(shù)據(jù)庫(kù)中國(guó)知網(wǎng)、萬(wàn)方和PubMed等，搜集MTHFR（A1298C）基因多態(tài)性與宮頸癌相關(guān)研究的文獻(xiàn)。中文檢索關(guān)鍵詞：MTHFR（A1298C）、亞甲基四氫葉酸還原酶（A1298C）、多態(tài)性、宮頸癌。英文檢索關(guān)鍵詞：MTHFR（A1298C）、polymorphisms、cervical cancer。檢索時(shí)間為建庫(kù)至2018年11月12日，同時(shí)采用文獻(xiàn)追溯的方法，使得文獻(xiàn)檢索盡可能詳盡，且語(yǔ)種限定為中文和英文。閱讀文獻(xiàn)題目和摘要部分進(jìn)行初步篩選，再通讀全文，最終納入7篇文獻(xiàn)。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①關(guān)于MTHFR（A1298C）基因多態(tài)性與宮頸癌之間關(guān)系研究;②實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括對(duì)照組和病例組;③研究對(duì)象為人類(lèi);④實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)齊全，包含各基因型在病例組和對(duì)照組的分布情況;⑤對(duì)照組基因型分布符合哈德溫伯格平衡定律（Hardy-Weinberg equilibrium，HWE），P > 0.05。排除標(biāo)準(zhǔn)：①綜述類(lèi)和Meta分析類(lèi)文獻(xiàn);②未提供具體基因型分布數(shù)據(jù);③病例報(bào)告和病例研究;④數(shù)據(jù)質(zhì)量不可靠以及重復(fù)發(fā)表。

1.3 資料提取

兩名研究者獨(dú)立進(jìn)行文獻(xiàn)的篩選以及資料提取，意見(jiàn)不統(tǒng)一可通過(guò)第三位研究者協(xié)助解決，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。提取數(shù)據(jù)包括：第一作者、發(fā)表時(shí)間、國(guó)家、種族、實(shí)驗(yàn)方法、對(duì)照組來(lái)源以及各基因型在病例組和對(duì)照組中的頻數(shù)。

1.4 文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

納入文獻(xiàn)通過(guò)Newcastle-Ottawa-Scale（NOS）進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，NOS滿分為10分，得分>5分為高質(zhì)量文獻(xiàn)。NOS共3個(gè)項(xiàng)目8個(gè)條目，包括病例組和對(duì)照組的選擇4分（病例定義和診斷是否恰當(dāng)、病例的代表性、對(duì)照的選擇、對(duì)照的定義）;病例與對(duì)照的可比性2分，暴露4分（暴露的調(diào)查與評(píng)估方法、病例與對(duì)照調(diào)查方法是否相同、無(wú)應(yīng)答率）[3]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用Stata軟件計(jì)算95%可信度區(qū)間（CI）和比值比（OR）分析MTHFR基因多態(tài)性與宮頸癌之間的關(guān)系。MTHFR（A1298C）的AA、AC和CC三種基因型，分析純合比較模型（CC vs. AA）、等位基因比較模型（C vs. A）、顯性比較模型[（CC+AC）vs. AA]、雜合比較模型（AC vs. AA）和隱性比較模型[CC vs.（CA+AA）]五種不同遺傳模型，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用I2和Q檢驗(yàn)評(píng)估納入文獻(xiàn)的異質(zhì)性，P > 0.05采用固定效應(yīng)模型Mantel-Haenszel;P < 0.05則采用隨機(jī)效應(yīng)模型DerSimonian和Laird合并OR值，并采用亞組分析異質(zhì)性來(lái)源[4]。I2值<25%表示無(wú)異質(zhì)性，25%≤I2值≤50%表示存在輕度異質(zhì)性，I2值>50%表示高度異質(zhì)性[5]。敏感性分析通過(guò)一一剔除文獻(xiàn)重新進(jìn)行Meta分析。通過(guò)Egger線性回歸法以及Begg秩相關(guān)法進(jìn)行發(fā)表偏倚的檢測(cè)，P > 0.05表示不存在發(fā)表偏倚[6]。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果

利用關(guān)鍵詞在中英文數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索相關(guān)文獻(xiàn)22篇，初步排除3篇Meta分析文獻(xiàn)，通讀全文根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)，剔除15篇：①8篇涉及MTHFR基因其他位點(diǎn);②2篇綜述;③1篇研究對(duì)象不是宮頸癌;④1篇未提供原始數(shù)據(jù)。最終納入7篇文獻(xiàn)[7-13]?；蚍中头椒ň捎孟拗菩云伍L(zhǎng)度多態(tài)性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction- restriction fragment length polymorphic，PCR-RFLP），對(duì)照組來(lái)源于醫(yī)院，研究人種包含亞洲和高加索。本研究納入的7篇文獻(xiàn)，經(jīng)NOS質(zhì)量評(píng)價(jià)，得分在6～8之間。見(jiàn)表1。

2.2 分析結(jié)果

5種模型分析的結(jié)果顯示：C vs. A（OR = 1.11，95%CI：1.02～1.22，P = 0.015），AC vs. AA（OR = 1.24，95%CI：1.02～1.52，P = 0.030）和（CC+AC）vs. AA（OR = 1.15，95%CI：1.03～1.29，P = 0.013），提示MTHFR基因多態(tài)性與宮頸癌發(fā)生存在明顯相關(guān)性[7-13]。亞組分析結(jié)果顯示：亞洲人種C vs. A（OR = 1.12，95%CI：1.01～1.24，P = 0.029）;AC vs. AA（OR = 1.35，95%CI：1.09～1.67，P = 0.006）和（CC+AC）vs. AA（OR = 1.20，95%CI：1.05～1.37，P = 0.007），結(jié)果提示MTHFR基因多態(tài)性與亞洲人宮頸癌發(fā)生存在明顯相關(guān)性[8-10，12]。高加索人CC vs.（CA+AA）（OR = 1.47，95%CI：1.02～2.13，P = 0.039），結(jié)果提示MTHFR基因多態(tài)性與高加索人宮頸癌發(fā)生存在明顯相關(guān)性[7，11，13]。見(jiàn)表2。

2.3 異質(zhì)性與敏感性分析

MTHFR（A1298C）顯性比較模型（CC+AC）vs. AA（OR = 1.15，95%CI：1.03～1.29，I2 = 50.9%），I2值>50%，表示存在高度異質(zhì)性，亞組分析發(fā)現(xiàn)異質(zhì)性來(lái)源組別高加索，通過(guò)敏感性分析一一剔除高加索組中的文獻(xiàn)并重新合并計(jì)算結(jié)果發(fā)現(xiàn)，Hajiesmaeil等[13]報(bào)道的文獻(xiàn)是主要異質(zhì)性來(lái)源，剔除后異質(zhì)性降低，I2值為41.6%。

2.4 發(fā)表偏倚

通過(guò)Egger線性回歸法和Begg漏斗圖檢驗(yàn)，結(jié)果提示：5種比較模型漏斗圖均對(duì)稱(chēng)，且5種模型Egger檢驗(yàn)結(jié)果P > 0.05，因此不存在發(fā)表偏倚。見(jiàn)表3、圖1（C vs. A）。

3討論

人體自身不能合成葉酸，需通過(guò)從飲食中獲取，葉酸主要功能轉(zhuǎn)移體內(nèi)一碳單位[14]。MTHFR是葉酸功能發(fā)揮的關(guān)鍵酶，催化5，10-亞甲基四氫葉酸還原成5-甲基四氫葉酸，為蛋白質(zhì)的甲基化以及RNA、DNA的合成提供甲基，且維持體內(nèi)同型半胱氨酸處于正常水平[15]。5-甲基四氫葉酸是血漿中主要的存在形式，并且是葉酸發(fā)揮作用有效成分。MTHFR基因多態(tài)性改變酶活性導(dǎo)致葉酸代謝異常，增加個(gè)體某些疾病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，如肺癌[16]、缺血性腦卒中[17]、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)[18]、產(chǎn)后抑郁[19]、不良孕產(chǎn)史[20]、消化系統(tǒng)腫瘤[21]等。研究顯示[7-13]，MTHFR基因多態(tài)性與宮頸癌的發(fā)生關(guān)系密切，然而不同民族、種族、地區(qū)，以及不同生活環(huán)境導(dǎo)致易感性發(fā)生差異。

本研究共納入7篇病例-對(duì)照研究，包括實(shí)驗(yàn)組823例，對(duì)照組1607例，Meta分析結(jié)果提示C等位基因可能會(huì)增加患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)。亞組分析C等位基因并未增加高加索人患病風(fēng)險(xiǎn)，引起這種現(xiàn)象可能是由不同人種在不同的生活環(huán)境、不同的飲食方式以及工作環(huán)境等造成。隱性比較模型CC vs.（AC+AA）亞組分析發(fā)現(xiàn)純合突變基因型CC加劇高加索人患病風(fēng)險(xiǎn)，但未增加亞洲女性患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)，可能原因亞洲人純合突變基因型相對(duì)較少。采用Egger線性回歸檢驗(yàn)方法和Begg漏斗圖評(píng)估是否存在發(fā)表偏倚，結(jié)果顯示5個(gè)遺傳模型均不存在發(fā)表偏倚，說(shuō)明該Meta分析結(jié)果可靠。

本次研究尚有不足：樣本量相對(duì)較少，還需大樣本數(shù)據(jù)來(lái)進(jìn)行驗(yàn)證;各種族生活方式、環(huán)境和年齡等個(gè)人信息無(wú)法獲取，還需進(jìn)一步評(píng)估。

綜上所述，MTHFR（A1298C）基因多態(tài)性可能會(huì)增加女性患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)。MTHFR基因多態(tài)性與宮頸癌的關(guān)系還需進(jìn)行大樣本，多地區(qū)不同種族、生活環(huán)境、工作方式等分層進(jìn)一步研究證實(shí)，為臨床提供可靠數(shù)據(jù)更好地預(yù)防和治療宮頸癌。

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（收稿日期：2019-01-21? 本文編輯：任? ?念）