王佳星 徐方旭 柳葉飛 王升厚

摘 ? 要 ? 觀察富硒蛹蟲草對雌鼠、雄鼠生殖功能及胚胎發(fā)育的影響。通過不同劑量的富硒蛹蟲草溶液給藥小鼠，觀察富硒蛹蟲草對小鼠行為狀態(tài)、體量，雌鼠、雄鼠生殖功能，以及自然分娩的仔鼠形態(tài)、體重等生理指標(biāo)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，富硒蛹蟲草對小鼠行為狀態(tài)、體重?zé)o明顯影響;雄鼠、雌鼠及仔鼠各項(xiàng)生理指標(biāo)與對照組比較差別均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;雄鼠隨富硒蛹蟲草劑量增大精子數(shù)量增加，行為更興奮。由此可見，富硒蛹蟲草對雌鼠、雄鼠生殖功能及受孕無毒性影響，對胚胎及自然分娩的仔鼠無致畸作用。

關(guān)鍵詞 ? 富硒蛹蟲草;小鼠;生殖發(fā)育

中圖分類號：S567.3 ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A ? ?DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.25.020

蛹蟲草（Cordyceps militaris）又名北冬蟲夏草，為子囊菌門[1]。硒元素是人體必需微量營養(yǎng)元素，它與人體內(nèi)一些酶結(jié)合形成具有較強(qiáng)氧化能力物質(zhì)，可增強(qiáng)人體免疫力[2]。富硒蛹蟲草則是通過將硒元素富集于蛹蟲草中進(jìn)行培養(yǎng)的產(chǎn)物。目前對富硒蛹蟲草對小鼠受孕及致畸方面的研究少見報道。本試驗(yàn)通過富硒蛹蟲草對雌鼠、雄小鼠生殖功能影響的試驗(yàn)，旨在檢測富硒蛹蟲草是否影響小鼠受孕以及對胚胎及分娩后的仔鼠是否有致畸作用，為其安全性評價提供一定的科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

主要材料有富硒蛹蟲草粉（馬云鴻+后丁香22號），來自于沈陽師范大學(xué)微生物試驗(yàn)室。

1.2 試驗(yàn)方法

6～7周清潔級昆明小鼠，性成熟，未孕，無生孕史[3]。雌鼠體重為27.99±0.21 g，雄鼠體重為31.3±0.3 g。一共54只小鼠，雄鼠共18只，雌鼠36只。隨機(jī)分組，分別為對照組、試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2。每組雄鼠6只，雌鼠12只，且雌鼠、雄鼠分籠培養(yǎng)。

適應(yīng)培養(yǎng)一周，開始經(jīng)口每日定時給藥。對照組為自然飲用清水，根據(jù)試驗(yàn)需求配制不同濃度富硒蛹蟲草溶液，試驗(yàn)組1為300 mg·kg-1劑量給藥，試驗(yàn)組2為按900 mg·kg-1劑量給藥。雄鼠連續(xù)給藥21 d，雌鼠連續(xù)給藥35 d[4]。

于給藥14天后，按雄鼠∶雌鼠=1∶2合籠，合籠的第2天起，每天清晨觀察雌鼠陰道出現(xiàn)陰道栓情況，觀察到陰道栓的認(rèn)為該雌鼠已經(jīng)交配，當(dāng)日作為“受孕”第0天[5]。于合籠第7天將雄鼠與雌鼠分籠，分出的各組雄鼠以脫頸方式處死。合籠后第14天后，各組雌鼠半數(shù)處死，另一半給藥至自然分娩前[6]。觀察不同濃度的富硒蛹蟲草溶液對雌鼠、雄鼠生育功能的影響。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察各組小鼠日常飲食、飲水、活動，體重變化等一般情況。觀察并計算雄鼠生殖器官臟器系數(shù)、精子數(shù)量、精子有無畸變。合籠后雌鼠受孕率，受孕雌鼠生育的仔鼠數(shù)及仔鼠平均體重以及仔鼠是否出現(xiàn)畸形。

附睪臟器系數(shù)=附睪重量（g）/小鼠體重（g） × 100%

睪丸臟器系數(shù)=睪丸重量（g）/小鼠體重（g） ×100%[7]

2 結(jié)果與分析

2.1 行為狀態(tài)

試驗(yàn)過程中，各劑量組雌鼠行為活動均正常，無死亡現(xiàn)象出現(xiàn)。試驗(yàn)組雄鼠與對照組相比行為活動更興奮，未出現(xiàn)死亡現(xiàn)象。各試驗(yàn)組飲食量飲水量未出現(xiàn)異常情況。各劑量組雌、雄鼠體重均平穩(wěn)增長（表1、表2）， 與對照組比較無顯著性差異，P>0.05。

2.2 雄鼠

各組雄鼠精子形態(tài)正常均無明顯畸變，試驗(yàn)組雄鼠睪丸、附睪重量及臟器系數(shù)與對照組相比較均無顯著性差異（P>0.05）（表3）。隨著富硒蛹蟲草溶液濃度的增加精子數(shù)量呈增長趨勢。

2.3 孕鼠和胎鼠

試驗(yàn)過程期間，各組雌鼠狀態(tài)良好，合籠后各組雌鼠均進(jìn)行交配受孕率為100%。孕14 d雌鼠各劑量組卵巢重、平均胎仔鼠、每窩體重、吸收胎數(shù)、胎鼠平均體重、胎盤質(zhì)量與對照組比較，差別均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）（表4）。

2.4 仔鼠

各試驗(yàn)組雌鼠自然分娩仔鼠外觀均無畸形出現(xiàn)，試驗(yàn)組自然分娩的仔鼠數(shù)量，體重與對照組相比，差別均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）（表5）。

3 小結(jié)與討論

蛹蟲草含有多種生物活性物質(zhì)，主要包括：蟲草菌素、核苷類、氨基酸類、糖醇和甾醇類、肽類、有機(jī)酸類、微量元素等[8]。硒元素是人體必需微量元素之一，在過去一段時間里硒元素被認(rèn)為是有毒試劑，直到1957年德國科學(xué)家Schwarz和Foliz證實(shí)硒對肝臟具有很強(qiáng)的保護(hù)作用[9]。隨著深入研究，硒元素是人體必不可少的一種微量元素，對于人體健康有著重要作用，它不僅有抗癌、抗氧化、保護(hù)機(jī)體免受活性氧自由基損傷等功能，還與增強(qiáng)人體免疫力、保護(hù)心血管系統(tǒng)、肌肉耐力、以及生殖密切相關(guān)[10]。將硒元素富集于蛹蟲草中，既可獲得蛹蟲草所有的活性物質(zhì)，又補(bǔ)充了人體所需硒元素，價值更加提升。本試驗(yàn)意在檢測富硒蛹蟲草對小鼠生殖功能是否有影響，為其安全性提供科學(xué)理論依據(jù)。

本試驗(yàn)過程中小鼠飲食飲水量均正常，體重平穩(wěn)。小鼠行為無異常，且雄鼠隨富硒蛹蟲草濃度的增加，行為更加活躍。各劑量雄鼠睪丸、附睪重量及臟器系數(shù)與陰性對照組相比均無顯著差異（P>0.05）。雄鼠精子數(shù)量隨富硒蛹蟲草濃度升高而增加，精子形態(tài)無明顯畸變。

各劑量組孕鼠體重、卵巢重、平均胎仔鼠、每窩體重、吸收胎數(shù)、胎鼠平均體重、胎盤質(zhì)量與陰性對照相比，差別均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;各劑量組雌鼠生育仔鼠外觀均無畸形出現(xiàn)，試驗(yàn)組自然分娩的仔鼠數(shù)量，體重與陰性對照組相比，差別均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。說明在本試驗(yàn)的劑量條件下，富硒蛹蟲草對雌雄鼠生殖功能及受孕無明顯毒性影響，對胚胎及自然分娩的仔鼠無致畸作用。

參考文獻(xiàn)：

[1] Gi-Ho Sung， Nigel L. Hywel-Jones， et al. Phylogenetic classification of Cordyceps and the clavicipitaceous fungi[J]. Studies in Mycology， 2007（57）： 5-59.

[2] 王明洋，方勇，裴斐，等.硒對杏鮑菇營養(yǎng)品質(zhì)和抗氧化酶活性的影響[J].食品科學(xué)，2016，37（11）：208-213.

[3] 吳晟妮，林球珍，陸武弟，等.男用和女用避孕藥對育成KM小鼠生育能力影響的比較研究[J].現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生，2018，34（4）：495-496，499.

[4] 黃燕，張會軍，王莎莉，等.青蒿水提物對小鼠生殖功能及胎鼠生殖發(fā)育的影響[J].生殖與避孕，2010，30（8）：505-508.

[5] 郭瑞新，蔡承妹，曾慶元，等.冬蟲夏草提高“腎陽虛”小鼠生殖功能的實(shí)驗(yàn)研究[J].基層中藥雜志，2002（2）：3-5.

[6] 王玉娥，宋毅，馮玲玲，等.苦蒲湯對小鼠受孕及死胎的影響[J].湖北預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2000（S1）：68.

[7] 申涌，劉詠梅.枸杞多糖對甲醛所致雄性小鼠生殖毒性的拮抗作用[J].貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2017，42（4）：440-443，448.

[8] 傅嵐，陳作紅.蟲草屬真菌化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].生命科學(xué)研究，2004（1）：1-7.

[9] Schwarz K， Foltz CM. Selenium as an integral part of factor against dietary necrotic liver degeneration[J]. Journal of the American Chemical Society， 1957， 70（32）： 92-93.

[10] Mehdi Y， Hornick JL， Istasse L， et al. Selenium in the environment，metabolism and involvement in body functions [J]. Molecules， 2013， 18（3）： 3292-3311.

（責(zé)任編輯：敬廷桃）