李建勛，范蓓，周杰，甄云鵬，單吉浩*

1(農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全收貯運(yùn)管控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所，北京，100193) 2(河北冠卓檢測(cè)科技股份有限公司，河北 石家莊，050000) 3(沃特世科技(上海)有限公司，上海，100026)

農(nóng)藥在預(yù)防病蟲害以及保證農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量和品質(zhì)方面起到了積極的作用，因此被廣泛應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品種植過(guò)程中。目前，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用的農(nóng)藥及化學(xué)品超過(guò)1 100種[1]。但伴隨著農(nóng)藥的廣泛使用，濫用和誤用等不規(guī)范行為也隨之產(chǎn)生，殘留在農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥給人類健康帶來(lái)潛在威脅，同時(shí)對(duì)國(guó)際貿(mào)易產(chǎn)生了不利影響。許多國(guó)家和國(guó)際性組織(如美國(guó)、日本、中國(guó)、CAC、歐盟和韓國(guó)等)針對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的污染現(xiàn)狀制定了農(nóng)藥最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)(MRLs)，例如歐盟規(guī)定了465種農(nóng)產(chǎn)品中的162 248項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)，美國(guó)為351種39 147項(xiàng)，日本為579種51 600項(xiàng)，并且限量水平低至10 μg/kg，并呈逐年嚴(yán)格的趨勢(shì)[2]。這些標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施加強(qiáng)了農(nóng)藥的監(jiān)管力度，保證了農(nóng)藥的規(guī)范化使用，確保了公眾的身體健康。但與此同時(shí)，如此繁多的MRLs法規(guī)對(duì)農(nóng)藥殘留的監(jiān)控提出了新的難題。

目前，在農(nóng)藥多殘留分析中，LC-MS/MS技術(shù)的應(yīng)用最為廣泛，但由于其掃描速度和駐留時(shí)間的限制，對(duì)于幾百種農(nóng)藥的多殘留檢測(cè)往往需要分組建立多個(gè)檢測(cè)方法，樣品需反復(fù)測(cè)定，耗時(shí)費(fèi)力；此外，標(biāo)準(zhǔn)品有效期的限制使得其需要不斷的購(gòu)買和更新，這些因素提高了檢測(cè)的時(shí)間和成本，成為制約農(nóng)藥多殘留篩查技術(shù)發(fā)展的主要瓶頸[3]。為了解決這些問(wèn)題，越來(lái)越多的研究者將注意力集中在高分辨液相質(zhì)譜(LC-HRMS)技術(shù)上，比如LC-Q-TOF/MS、LC-FTICR/MS以及LC-Orbitrap/MS等。LC-HRMS技術(shù)具有高分辨識(shí)別能力和精確質(zhì)量數(shù)測(cè)定能力，能夠?qū)?fù)雜基質(zhì)中的目標(biāo)化合物進(jìn)行定性確認(rèn)[4-9]。此外，LC-HRMS一次分析化合物的數(shù)目沒(méi)有限制，且全譜掃描數(shù)據(jù)還可用于數(shù)據(jù)的溯源[10]。因此，LC-HRMS已被廣泛應(yīng)用于環(huán)境、生物基質(zhì)和食品中農(nóng)藥殘留的篩查中[11-17]。

針對(duì)蔬菜基質(zhì)的農(nóng)藥殘留，我國(guó)已經(jīng)逐步建立起國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，但這些標(biāo)準(zhǔn)方法檢測(cè)農(nóng)藥范圍有限，很多標(biāo)準(zhǔn)只是針對(duì)某一種或一類農(nóng)藥的檢測(cè)技術(shù)，無(wú)法實(shí)現(xiàn)對(duì)不同種類農(nóng)藥化合物的全覆蓋、高通量的檢測(cè)。因此，現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)僅能夠?qū)κ孪却_定的目標(biāo)物進(jìn)行檢測(cè)，卻無(wú)法達(dá)到“全面搜尋、提前監(jiān)控”的目的，導(dǎo)致監(jiān)測(cè)范圍外農(nóng)藥的“漏檢”“放行”情況常常發(fā)生，造成食品安全的極大隱患和風(fēng)險(xiǎn)，因此，急需一種全覆蓋、高通量的檢測(cè)技術(shù)予以解決。

針對(duì)上述問(wèn)題，本文將QuEChERS前處理技術(shù)與UPLC-Q-TOF/MS檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合，建立快速篩查測(cè)定芹菜和西紅柿中154種農(nóng)藥殘留的新方法，發(fā)揮了二者高效、便捷、靈敏的特點(diǎn)?；谙惹瓣P(guān)于LC-Q-TOF/MS定性檢索參數(shù)考察的報(bào)道很少[7-9]，本研究對(duì)其定性檢索參數(shù)(精確質(zhì)量提取窗口，保留時(shí)間偏差窗口和離子化模式等)進(jìn)行了全面考察和優(yōu)化，以提高定性結(jié)果準(zhǔn)確度和靈敏度，從而實(shí)現(xiàn)了對(duì)芹菜和西紅柿中農(nóng)藥多殘留的高通量、快速、準(zhǔn)確測(cè)定的目的，為我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)提供了一種快速有效的方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

ACQUITY UPLC I-Class、Xevo G2-XS Q-TOF飛行時(shí)間質(zhì)譜，美國(guó)Waters公司；Triple Quad 6495三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀，美國(guó)Agilent公司；Milli-Q純水儀，美國(guó)millipore公司；3K15離心機(jī)，美國(guó)Sigma公司。甲醇(質(zhì)譜級(jí))，美國(guó)Fisher公司；甲酸、乙酸、乙酸銨(色譜純)，美國(guó)Sigma公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理

采用改進(jìn)的QuEChERS方法[18]，具體過(guò)程如下：稱取10 g攪碎的蔬菜樣品(精確至0.01 g)于50 mL聚四氟乙烯離心管中，加入10.0 mL體積分?jǐn)?shù)1%甲酸乙腈提取液，加蓋振搖10 min。再往離心管中加入1 g NaCl和4 g MgSO4，加蓋密封后劇烈振搖1 min。以5 000 r/min離心5 min，取上清液5.00 mL于另外10 mL離心管中，再依次加入750 mg MgSO4、150 mg PSA和25 mg GCB后，蓋緊管蓋，渦旋1 min后，以5 000 r/min離心5 min。取2.00 mL上清液在45 ℃下經(jīng)氮?dú)獯蹈?，?zhǔn)確加入1.00 mLV(乙腈)∶V(水)=20∶80溶液，超聲，旋渦混勻后過(guò)0.22 μm濾膜，上機(jī)測(cè)定。

1.2.2 色譜條件

色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm，1.7 μm)；流動(dòng)相A：0.1%(體積分?jǐn)?shù))甲酸水溶液(含5 mmol/L乙酸銨)；流動(dòng)相B：乙腈溶液；梯度洗脫條件：0～0.25 min，98%A保持不變；0.25～12.5 min，98% A線性變化1% A；12.5～13.0 min，1%A保持不變，13.0～13.1 min，1%A變化至98%；13.1～17.0 min，98%A保持不變；流速0.45 mL/min；柱溫：45 ℃；進(jìn)樣量：10 μL。

1.2.3 質(zhì)譜條件

離子化模式：ESI+；毛細(xì)管電壓：1.0 kV；離子源溫度：120 ℃；脫溶劑溫度：550 ℃；脫溶劑氣流速：1 000 L/h；錐孔氣流速：50 L/h；MSE低碰撞能量：4 eV，MSE高碰撞能量：10～45 eV；采集質(zhì)量范圍：50～1 200m/z；為保障質(zhì)量數(shù)精度，數(shù)據(jù)采集時(shí)，以亮氨酸腦啡肽溶液(質(zhì)量濃度為50 ng/mL)進(jìn)行實(shí)時(shí)校準(zhǔn)，質(zhì)量窗口偏差為±5 ppm。

1.2.4 數(shù)據(jù)采集

采用MSE數(shù)據(jù)模式信息全采集功能，并對(duì)照UNIFI篩查數(shù)據(jù)庫(kù)中154種化合物的化學(xué)名稱、化學(xué)結(jié)構(gòu)、母離子精確質(zhì)量、保留時(shí)間、同位素類型與強(qiáng)度、子離子精準(zhǔn)質(zhì)量數(shù)等信息進(jìn)行比對(duì)分析，通過(guò)數(shù)據(jù)分析平臺(tái)進(jìn)行自動(dòng)數(shù)據(jù)解析，最終篩選出未知?dú)埩羲幬镄畔ⅰ?54種農(nóng)藥化合物信息見表1。提取離子流色譜圖見圖1。

表1 154種農(nóng)藥化合物的色譜質(zhì)譜信息Table 1 Chromatograph and mass spectrometry information for 154 pesticides

續(xù)表1

序號(hào)農(nóng)藥化學(xué)式加合離子母離子精確質(zhì)量a與數(shù)據(jù)庫(kù)匹配的碎片離子數(shù)量14Butralin(仲丁靈)C14H21N3O4[M+H]+296.923 5315Butylate(丁草特)C11H23NOS[M+H]+218.920 3416Cadusafos(硫線磷)C10H23O2PS2[M+H]+271.858 0317Carbaryl(甲萘威)C12H11NO2[M+H]+202.849 3218Carbofuran(克百威)C12H15NO4[M+H]+222.875 5419Carboxin(萎銹靈)C12H13NO2S[M+H]+236.837 0220Chlorfenvinphos(毒蟲畏)C12H14Cl3O4P[M+H]+359.739 8521Chlorpyrifos(毒死蜱)C9H11Cl3NO3PS[M+H]+350.696 6222Chromafenozide(環(huán)蟲酰肼)C24H30N2O3[M+H]+395.995 9323Clethodim(烯草酮)C17H26ClNO3S[M+H]+360.902 5524Clofentezine(四螨嗪)C14H8Cl2N4[M+H]+303.782 9425Clothianidin(噻蟲胺)C6H8ClN5O2S[M+H]+250.779 0326Cyflufenamid(環(huán)氟菌胺)C20H17F5N2O2[M+H]+413.891 3327Cymoxanil(清菌脲)C7H10N4O3[M+H]+199.845 6428Cyproconazole(環(huán)丙唑醇)C15H18ClN3O[M+H]+292.884 1329Cyromazine(滅蠅胺)C6H10N6[M+H]+167.867 0430Desmedipham(甜菜安)C16H16N2O4[M+NH4]+318.144 9531Diazinon(二嗪農(nóng))C12H21N2O3PS[M+H]+305.871 4232Diethofencarb(乙霉威)C14H21NO4[M+H]+268.917 4333Difenoconazole(苯醚甲環(huán)唑)C19H17Cl2N3O3[M+H]+406.835 0334Diflubenzuron(氟脲殺)C14H9ClF2N2O2[M+H]+312.809 6335Dimethachlor(二甲草胺)C13H18ClNO2[M+H]+256.872 9536Dimethoate(樂(lè)果)C5H12NO3PS2[M+H]+230.769 9537Dimethomorph(烯酰嗎啉)C21H22ClNO4[M+H]+388.894 0538Dimoxystrobi(n醚菌胺)C19H22N2O3[M+H]+327.933 3439Diuron(敵草隆)C9H10Cl2N2O[M+H]+233.787 3340Dodemorph(十二環(huán)嗎啉)C18H35NO[M+H]+283.042 2241Epoxiconazole(氟環(huán)唑)C17H13ClFN3O[M+H]+330.843 4342Ethion(乙硫磷)C9H22O4P2S4[M+H]+385.757 9543Ethirimol(乙嘧酚)C11H19N3O[M+H]+210.923 1344Ethoprophos(滅線磷)C8H19O2PS2[M+H]+243.826 7345Ethoxyquin(乙氧喹啉)C14H19NO[M+H]+218.917 0446Ethoxysulfuron乙氧嘧磺隆)C15H18N4O7S[M+H]+399.859 9247Fenamidone(咪唑菌酮)C17H17N3OS[M+H]+312.879 5248Fenamiphos(苯線磷)C13H22NO3PS[M+H]+304.876 1349Fenarimol(氯苯嘧啶醇)C17H12Cl2N2O[M+H]+331.803 0350Fenazaquin(喹螨醚)C20H22N2O[M+H]+307.943 5351Fenbuconazole(腈苯唑)C19H17ClN4[M+H]+337.884 5352Fenhexamid(環(huán)酰菌胺)C14H17Cl2NO2[M+H]+302.833 9353Fenoxycarb(苯氧威)C17H19NO4[M+H]+302.901 7454Fenpropimorph(丁苯嗎啉)C20H33NO[M+H]+305.026 5355Fenpyroximate(唑螨酯)C24H27N3O4[M+H]+422.970 5256Flazasulfuron(啶嘧磺隆)C13H12F3N5O5S[M+H]+408.821 4357Florasulam(雙氟磺草胺)C12H8F3N5O3S[M+H]+360.800 3558Flufenacet(氟噻草胺)C14H13F4N3O2S[M+H]+364.836 8359Flufenoxuron(氟蟲脲)C21H11ClF6N2O3[M+H]+489.806 5460Fluoxastrobin(氟嘧菌酯)C21H16ClFN4O5[M+H]+459.849 6261Fluquinconazole(氟喹唑)C16H8Cl2FN5O[M+H]+376.779 3362Flurochloridone(氟咯草酮)C12H10Cl2F3NO[M+H]+312.779 5563Fluroxypyr(氟草煙)C7H5Cl2FN2O3[M+H]+255.736 4264Flurtamone(呋草酮)C18H14F3NO2[M+H]+334.868 0265Flusilazole(氟哇唑)C16H15F2N3Si[M+H]+316.870 6466Fosthiazate(噻唑磷)C9H18NO3PS2[M+H]+284.816 93

續(xù)表1

序號(hào)農(nóng)藥化學(xué)式加合離子母離子精確質(zhì)量a與數(shù)據(jù)庫(kù)匹配的碎片離子數(shù)量67Halosulfuron methyl(氯吡嘧磺隆)C13H15ClN6O7S[M+H]+435.811 4268Hexaconazole(己唑醇)C14H17Cl2N3O[M+H]+314.845 2369Hexythiazox(噻螨酮)C17H21ClN2O2S[M+H]+353.871 5570Imazalil(抑霉唑)C14H14Cl2N2O[M+H]+297.818 6471Imazosulfuron咪唑磺隆)C14H13ClN6O5S[M+H]+413.806 0472Imidacloprid(吡蟲啉)C9H10ClN5O2[M+H]+256.822 6473Indoxacarb(茚蟲威)C22H17ClF3N3O7[M+H]+528.841 0574Ipconazole(種菌唑)C18H24ClN3O[M+H]+334.931 1275Iprovalicarb(纈霉威)C18H28N2O3[M+H]+321.980 3376Isoprothiolane(稻瘟靈)C12H18O4S2[M+H]+291.835 0577Isoproturon(異丙隆)C12H18N2O[M+H]+207.912 2378Isoxaben(異惡酰草胺)C18H24N2O4[M+H]+333.943 9379Kresoxim-methyl(醚菌酯)C18H19NO4[M+H]+314.901 7380Lactofen(乳氟禾草靈)C19H15ClF3NO7[M+NH4]+479.082 1481Linuron(利谷隆)C9H10Cl2N2O2[M+H]+249.782 2282Malathion(馬拉硫磷)C10H19O6PS2[M+H]+331.806 4383Mecarbam(滅蚜磷)C10H20NO5PS2[M+H]+330.822 4584Mepanipyrim(嘧菌胺)C14H13N3[M+H]+224.881 3385Mepronil(滅銹胺)C17H19NO2[M+H]+270.911 9486Mesosulfuron-methyl(甲基二磺隆)C17H21N5O9S2[M+H]+504.848 4287Metalaxyl(甲霜靈)C15H21NO4[M+H]+280.917 4588Metamitron(苯嗪草酮)C10H10N4O[M+H]+203.855 8489Metconazole(葉菌唑)C17H22ClN3O[M+H]+320.915 4290Methabenzthiazuron(甲基苯噻隆)C10H11N3OS[M+H]+222.832 6391Methamidophos(甲胺磷)C2H8NO2PS[M+H]+142.771 6392Methiocarb(甲硫威)C11H15NO2S[M+H]+226.852 7493Methomyl(滅多威)C5H10N2O2S[M+H]+163.816 6394Metolachlor(異丙甲草胺)C15H22ClNO2[M+H]+284.904 2495Metrafenone(苯菌酮)C19H21BrO5[M+H]+409.827 5496Metsulfuron-methyl(甲磺隆)C14H15N5O6S[M+H]+382.844 6397Monocrotophos(久效磷)C7H14NO5P[M+H]+224.831 3598Monuron(滅草隆)C9H11ClN2O[M+H]+199.826 3299Myclobutanil(腈菌唑)C15H17ClN4[M+H]+289.884 53100Napropamide(敵草胺)C17H21NO2[M+H]+272.927 54101Omethoate(氧樂(lè)果)C5H12NO4PS[M+H]+214.792 85102Oxadixyl(噁霜靈)C14H18N2O4[M+H]+279.897 04103Oxamyl(殺線威)C7H13N3O3S[M+H]+220.838 14104Oxycarboxin(氧化萎銹靈)C12H13NO4S[M+H]+268.826 82105Oxydemeton-methyl(砜吸磷)C6H15O4PS2[M+H]+247.785 23106Paclobutrazol(多效唑)C15H20ClN3O[M+H]+294.899 82107Penconazole(戊菌唑)C13H15Cl2N3[M+H]+284.834 65108Pencycuron(戊菌隆)C19H21ClN2O[M+H]+329.904 53109Phenmedipham(甜菜寧)C16H16N2O4[M+NH4]+318.145 74110Phosalone(伏殺硫磷)C12H15ClNO4PS2[M+H]+368.757 25111Phosphamidon(磷胺)C10H19ClNO5P[M+H]+300.839 22112Phoxim(辛硫磷)C12H15N2O3PS[M+H]+299.824 43113Picolinafen(氟吡酰草胺)C19H12F4N2O2[M+H]+377.853 84114Picoxystrobin(啶氧菌酯)C18H16F3NO4[M+H]+368.873 43115Pirimicarb(抗蚜威)C11H18N4O2[M+H]+239.913 35116Pirimiphos-methyl(甲基嘧啶磷)C11H20N3O3PS[M+H]+306.866 64117Prochloraz(咪鮮胺)C15H16Cl3N3O2[M+H]+376.801 14118Profenofos(丙溴磷)C11H15BrClO3PS[M+H]+373.705 43119Propamocarb(霜霉威)C9H20N2O2[M+H]+189.922 84

續(xù)表1

序號(hào)農(nóng)藥化學(xué)式加合離子母離子精確質(zhì)量a與數(shù)據(jù)庫(kù)匹配的碎片離子數(shù)量120Propanil(敵稗)C9H9Cl2NO[M+H]+218.776 42121Propaquizafop(惡草酸)C22H22ClN3O5[M+H]+444.895 15122Propoxur(殘殺威)C11H15NO3[M+H]+210.875 54123Pymetrozine(吡蚜酮)C10H11N5O[M+H]+218.866 73124Pyraclostrobin(吡唑醚菌酯)C19H18ClN3O4[M+H]+388.868 94125Pyrazophos(吡菌磷)C14H20N3O5PS[M+H]+374.856 43126Pyridaben(噠螨靈)C19H25ClN2OS[M+H]+365.907 94127Pyridalyl(啶蟲丙醚)C18H14Cl4F3NO3[M+H]+490.738 34128Pyrimethanil(嘧霉胺)C12H13N3[M+H]+200.881 33129Quinmerac(氯甲喹啉酸)C11H8ClNO2[M+H]+222.794 74130Quinoclamine(滅藻醌)C10H6ClNO2[M+H]+208.779 04131Rotenone(魚藤酮)C23H22O6[M+H]+395.911 95132Simazine(西瑪津)C7H12ClN5[M+H]+202.848 45133Spiromesifen(螺甲螨酯)C23H30O4[M+H]+371.984 73134Spiroxamine(螺噁茂胺)C18H35NO2[M+H]+299.037 14135Sulcotrione(磺草酮)C14H13ClO5S[M+H]+329.787 53136Tebuconazole(戊唑醇)C16H22ClN3O[M+H]+308.915 43137Tebufenozide(蟲酰肼)C22H28N2O2[M+H]+353.985 43138Tebufenpyrad(吡螨胺)C18H24ClN3O[M+H]+334.931 14139Terbufos(特丁硫磷)C9H21O2PS3[M+H]+289.814 45140Tetraconazole(氟醚唑)C13H11Cl2F4N3O[M+H]+372.791 85141Thiabendazole(噻菌靈)C10H7N3S[M+H]+202.806 43142Thiamethoxam(噻蟲嗪)C8H10ClN5O3S[M+H]+292.789 64143Thiophanate-Methyl(甲基硫菌靈)C12H14N4O4S2[M+H]+343.816 04144Tolclofos-methyl(甲基立枯磷)C9H11Cl2O3PS[M+H]+301.724 72145Triadimefon(三唑酮)C14H16ClN3O2[M+H]+294.863 44146Triadimenol(三唑醇)C14H18ClN3O2[M+H]+296.879 12147Triasulfuron(醚苯磺隆)C14H16ClN5O5S[M+H]+402.826 44148Triazophos(三唑磷)C12H16N3O3PS[M+H]+314.835 32149Trichlorfon(敵百蟲)C4H8Cl3O4P[M+H]+257.692 95150Tricyclazole(三環(huán)唑)C9H7N3S[M+H]+190.806 45151Trifloxystrobin(肟菌酯)C20H19F3N2O4[M+H]+409.900 04152Triflumizole(氟菌唑)C15H15ClF3N3O[M+H]+346.855 95153Triflumuron(殺鈴脲)C15H10ClF3N2O3[M+H]+359.803 53154Triforine(嗪胺靈)C10H14Cl6N4O2[M+H]+433.695 15

注：a與數(shù)據(jù)庫(kù)匹配的碎片離子數(shù)量：指與數(shù)據(jù)庫(kù)匹配質(zhì)量偏差≤3 ppm的碎片離子數(shù)量。

圖1 154種農(nóng)藥化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0 μg/L)的提取離子流色譜圖(BPI)Fig.1 Extracted ion chromatogram (BPI) of 154 pesticides standard solution (1.0 μg/L)

1.2.5 定性篩查

采用UNIFI軟件對(duì)市售蔬菜樣品中的農(nóng)藥殘留進(jìn)行測(cè)定，在軟件中調(diào)用數(shù)據(jù)庫(kù)，并設(shè)置定性檢索標(biāo)準(zhǔn)為：精確質(zhì)量偏差±5.0 ppm；保留時(shí)間偏差±0.2 min；離子化形式為+H、+Na或+NH4；至少1個(gè)碎片離子檢出且質(zhì)量偏差±10 ppm；同位素RMS值偏差≤20%；同位素RMS值偏差≤50%。軟件最后給出各檢索參數(shù)的實(shí)測(cè)值和理論值的偏差，通過(guò)匹配結(jié)果來(lái)確證農(nóng)藥的檢出情況。

1.2.6 定量分析

采用單點(diǎn)外標(biāo)法對(duì)農(nóng)藥定量。根據(jù)農(nóng)藥在芹菜和西紅柿中的MRLs值(見表2)，配制1.5倍MRL濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)，采用單點(diǎn)校正法對(duì)目標(biāo)物定量；如果測(cè)定農(nóng)藥的濃度高于2.25 MRLs值，根據(jù)測(cè)定結(jié)果重新配制相近濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)對(duì)目標(biāo)物再次定量。當(dāng)樣品中檢測(cè)出農(nóng)藥濃度過(guò)高而導(dǎo)致檢測(cè)器飽和時(shí)，需要將樣品基質(zhì)和基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行同等稀釋，然后進(jìn)行準(zhǔn)確定量。

2 結(jié)果與討論

2.1 前處理回收率

QuEChERS方法因具有快速、簡(jiǎn)便和高效的特點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)領(lǐng)域。本研究對(duì)QuEChERS方法進(jìn)行改進(jìn)，加入氮吹濃縮步驟以提高農(nóng)藥檢出靈敏度。本研究根據(jù)GB/T 27404—2008實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范中對(duì)檢測(cè)方法確認(rèn)的技術(shù)要求，在芹菜和西紅柿中進(jìn)行3個(gè)水平添加(定量限，2倍定量限和10倍定量限)對(duì)方法的準(zhǔn)確性和精密性進(jìn)行了考察，結(jié)果顯示，芹菜和西紅柿2種基質(zhì)中均有93.5%以上農(nóng)藥的回收率在70%～120%，且RSD≤20%，結(jié)果見表2。這表明該方法具有良好的準(zhǔn)確度和精密度，能夠完全滿足2種基質(zhì)中農(nóng)藥殘留分析檢測(cè)的實(shí)際要求[19]。

表2 154種農(nóng)藥在芹菜和西紅柿基質(zhì)中的最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)、線性范圍、回收率、篩查限和定量限Table 2 The MRLs, linearity range, recovery, screening detection limit and limit of quantification of 154 pesticides in celery and tomato matrix

續(xù)表2

農(nóng)藥aMRL/(mg·kg-1)線性范圍/(μg·kg-1)芹菜西紅柿回收率/%芹菜(添加水平)西紅柿(添加水平)LOQRSD2×LOQRSD10×LOQRSDLOQRSD2×LOQRSD10×LOQRSDSDL/(μg·kg-1)LOQ/(μg·kg-1)芹菜西紅柿芹菜西紅柿Dimethoate(樂(lè)果)0.011～5005～500861.687 2.2101 8.9902.694 4.289 4.41115Dimethomorph(烯酰嗎啉)155～5001～500102 8.997 3.41014.3918.494 5.597 8.11151Dimoxystrobi(n醚菌胺)0.011～5005～500863.687 4.697 6.2843.989 4.695 4.71515Diuron(敵草隆)0.015～5005～500863.298 5.499 1.2925.299 1.492 2.55155Dodemorph(十二環(huán)嗎啉)0.015～5001～500984.196 3.2104 4.51068.492 4.4117 6.21151Epoxiconazole(氟環(huán)唑)0.055～5005～500924.291 7.795 5.2832.586 2.797 2.91155Ethion(乙硫磷)0.015～50010～500766.476 1680 8.678 9.178 9.178 6.555510Ethirimol(乙嘧酚)0.055～5001～500934.391 3.597 0.8828.489 7.587 9.95151Ethoprophos(滅線磷)0.025～5001～500935.4100 798 4814.084 5.492 7.51151Ethoxyquin(乙氧喹啉)0.05100～50010～500833.61254.6885.4905.285 3.8101 12.11001010010Ethoxysulfuron乙氧嘧磺隆)0.015～500100～500884.385 8.597 7.8835.39322.5927.351005100Fenamidone(咪唑菌酮)301～50010～500102 8.896 4.3956.3826.387 5.191 7.1110110Fenamiphos(苯線磷)0.025～5001～500935.399 10.796 6749.572 4.699 12.91151Fenarimol(氯苯嘧啶醇)0.0210～5005～500894.7102 11.397 4.68111.588 12.789 8.155105Fenazaquin(喹螨醚)0.011～5005～5001029.4113 13.190 10.81183.998 4.7125 6.61115Fenbuconazole(腈苯唑)0.055～5001～500996.4107 9.293 6.39310.587 5.595 11.51151Fenhexamid(環(huán)酰菌胺)505～5005～500966.797 10.293 3.2905.3100 4.990 8.35555Fenoxycarb(苯氧威)0.0510～50010～500987.3103 8.693 10.4758.476 4.896 13551010Fenpropimorph(丁苯嗎啉)0.015～5001～5009910.499 2.9101 4.611610.492 6.1120 101151Fenpyroximate(唑螨酯)0.011～5005～500839.087 5.184 13909.489 9.8115 8.61115Flazasulfuron(啶嘧磺隆)0.0110～5005～50063 7.863 7.867 39628.564 11.373 8.455105Florasulam(雙氟磺草胺)0.011～5005～500957.397 14.290 1.58412.395 2.172 16.71115Flufenacet(氟噻草胺)0.0510～5005～500946.3101 9.498 7.58918.582 799 10.455105Flufenoxuron(氟蟲脲)1100～500100～500717.869 10.1646.37121.26812.575 6.4100100100100Fluoxastrobin(氟嘧菌酯)0.015～50010～500846.389 3.587 5.292 6.292 6.293 8.355510Fluquinconazole(氟喹唑)0.0510～5005～5001026.2100 9.198 6.4808.083 8.699 12.855105Flurochloridone(氟咯草酮)0.15～50010～500864.6101 9.395 7.2835.886 1097 9.255510Fluroxypyr(氟草煙)0.015～5005～500853.688 4.190 3.88411.494 5.896 6.45555Flurtamone(呋草酮)0.015～5001～500897.381 11.398 4.57910.581 10.792 8.51151Flusilazole(氟哇唑)0.015～5005～500955.8105 8.892 7.78312.479 9.1101 161155Fosthiazate(噻唑磷)0.025～5001～500996.395 0.9102 1.4869.987 6.395 2.51151Halosulfuron methyl(氯吡嘧磺隆)0.011～5005～500844.680 7.386 5.29010.089 4.794 5.31115Hexaconazole(己唑醇)0.015～5001～500995.1105 1095 8.58415.699 6.5101 131151Hexythiazox(噻螨酮)0.510～5005～50095 4.485 16.7843.68619.484 1694 8.755105Imazalil(抑霉唑)0.051～5005～5001014.7102 7.6104 1.89110.9100 6.995 8.21115Imazosulfuron咪唑磺隆)0.0110～50050～500984.2938.3107 8.8859.48521.498 9.210501050Imidacloprid(吡蟲啉)21～5001～50093 1.7100 0.5977.4803.787 2.994 2.91111Indoxacarb(茚蟲威)310～5001～50098 8.687 14.8943.6727.473 3.397 8.451101Ipconazole(種菌唑)0.015～5005～5007911.378 15.987 9.6747.081 1078 8.75555Iprovalicarb(纈霉威)0.85～50010～500106 9.899 5.91015.3773.880 10.797 8.755510Isoprothiolane(稻瘟靈)0.015～5001～500924.6103 8.497 4.7719.180 8.993 7.41151Isoproturon(異丙隆)0.015～5005～500952.197 3.297 1.18911.797 3.993 31155Isoxaben(異惡酰草胺)0.021～5005～500906.4102 8.598 4.2827.387 8.790 8.21515Kresoxim-methyl(醚菌酯)0.0110～5005～500106 10.8106 10.895 7.78113.586 3.797 7.355105Lactofen(乳氟禾草靈)0.015～50010～500797.377 24.489 11.979 12.179 12.188 4.355510Linuron(利谷隆)0.055～5005～500975.998 8.595 2.89013.795 4.696 6.45555Malathion(馬拉硫磷)0.51～5001～500100 9.398 5.9994.2857.990 8.891 7.61111Mecarbam(滅蚜磷)0.015～5005～500997.3101 9.494 8.47312.785 10.895 9.71555Mepanipyrim(嘧菌胺)0.015～5005～500936.299 8.890 9.6909.492 4.486 315555Mepronil(滅銹胺)0.0110～50010～500105 10.6105 10.698 5.182 9.082 994 9.5551010Mesosulfuron-methyl(甲基二磺隆)0.015～50020～500855.384 4.982 7.6736.3688.493 2.4510510

續(xù)表2

農(nóng)藥aMRL/(mg·kg-1)線性范圍/(μg·kg-1)芹菜西紅柿回收率/%芹菜(添加水平)西紅柿(添加水平)LOQRSD2×LOQRSD10×LOQRSDLOQRSD2×LOQRSD10×LOQRSDSDL/(μg·kg-1)LOQ/(μg·kg-1)芹菜西紅柿芹菜西紅柿Metalaxyl(甲霜靈)35～5005～50092 1.497 0.9993.5964.897 1.590 1.41155Metamitron(苯嗪草酮)0.11～5005～500953.590 2.493 1.6859.282 12.989 31515Metconazole(葉菌唑)0.025～5001～500988.4101 11.793 7.37311.679 5.7101 14.11151Methabenzthiazuron(甲基苯噻隆)0.015～5005～5001016.3106 9.195 5.29414.3104 9.686 4.91155Methamidophos(甲胺磷)0.011～5005～500941.884 1.890 0.8845.686 2.292 9.91515Methiocarb(甲硫威)110～5005～50097 7.7107 5.61000.4818.485 3.796 10.655105Methomyl(滅多威)0.25～50010～500965.299 292 3.8824.690 5.390 2.5510510Metolachlor(異丙甲草胺)0.055～5001～500904.9101 7.397 4.87411.586 7.396 8.71151Metrafenone(苯菌酮)0.011～5001～500846.287 7.389 4.5808.888 6.994 6.31111Metsulfuron-methyl(甲磺隆)0.0150～50010～5005210.3536.355 7.969 1.969 1.955 3.650105010Monocrotophos(久效磷)0.011～5005～500942.493 1.296 1.7829.384 4.7100 6.61115Monuron(滅草隆)0.015～5001～500981.593 1.996 1.3844.790 1.990 1.61151Myclobutanil(腈菌唑)0.051～5005～5001015.2102 7.295 5.1797.294 2.597 10.71115Napropamide(敵草胺)0.055～5001～500909.3106 10.198 6.28311.786 6.994 10.11151Omethoate(氧樂(lè)果)0.011～5001～500984.290 1.193 1.2779.590 3.395 5.41111Oxadixyl(噁霜靈)0.051～5005～500901.696 2.598 2.1857.386 8.595 21515Oxamyl(殺線威)0.0110～5005～50088 2.388 2.382 6.2739.673 7.885 4.551105Oxycarboxin(氧化萎銹靈)0.011～5001～500974.288 295 0.38811.990 0.792 2.21111Oxydemeton-methyl(砜吸磷)0.015～5005～500834.388 4.386 5.28315.791 4.995 8.35555Paclobutrazol(多效唑)0.0210～5001～500904.2101 8.997 3.17321.688 9.197 9.551101Penconazole(戊菌唑)0.051～5001～500996.2104 9.197 6.4972.887 10.1106 9.71111Pencycuron(戊菌隆)25～5001～500101 7.490 9.8956.3797.075 12.9105 5.31151Phenmedipham(甜菜寧)0.015～5005～500904.1102 11.297 2.3739.390 7.693 7.45155Phosalone(伏殺硫磷)0.0110～5005～500109 9.2109 9.299 9.3991.582 12.7114 17.555105Phosphamidon(磷胺)0.011～5001～500983.290 196 1.1924.898 2.592 21111Phoxim(辛硫磷)0.0110～50010～50062 3.262 3.272 11.276 9.276 9.276 8.810101010Picolinafen(氟吡酰草胺)0.015～50010～500874.291 6.282 12.576 5.776 5.7105 2555510Picoxystrobin(啶氧菌酯)0.011～50010～500996.3108 9.695 10.794 2.394 2.397 4.5110110Pirimicarb(抗蚜威)1.55～5001～50091 0.596 1.3944.2948.4100 3.591 2.11151Pirimiphos-methyl(甲基嘧啶磷)0.011～5005～500983.8107 10.894 10.49515.8103 8.2101 9.11115Prochloraz(咪鮮胺)55～5001～500105 7.388 12.811113.21275.276 5.9121 9.81151Profenofos(丙溴磷)0.015～5001～500915.2101 3.596 11.511811.770 4.8124 5.45151Propamocarb(霜霉威)405～5001～50095 1.194 0.9974.5967.398 3.793 4.31151Propanil(敵稗)0.015～50010～5001076.6103 6.494 1.894 3.194 3.192 5.855510Propaquizafop(惡草酸)0.11～5001～5009510.0100 9.988 13.9906.273 9.8101 8.91111Propoxur(殘殺威)0.0510～5005～500964.284 5.598 4.5958.090 2.790 4.655105Pymetrozine(吡蚜酮)310～5005～50053 10.956 7523.2606.366 7.964 10.8105105Pyraclostrobin(吡唑醚菌酯)21～5005～500909.3108 9.390 11.4846.387 5.297 51115Pyrazophos(吡菌磷)0.0110～5001～500108 10.3108 10.392 13.5958.988 9.6101 8.111101Pyridaben(噠螨靈)0.055～50010～5009311.9100 14.292 12.610613.6125 4.982 4.4510510Pyridalyl(啶蟲丙醚)310～50010～500835.3944.2737.29311.9108 11.199 5.910101010Pyrimethanil(嘧霉胺)201～5001～500109 9.495 5.5926.81187.497 9.2122 5.51111Quinmerac(氯甲喹啉酸)0.110～50010～500936.292 1.594 1.1856.991 2.592 2.810101010Quinoclamine(滅藻醌)0.0110～5005～50089 3.389 3.397 1933.089 3.995 2.155105Rotenone(魚藤酮)0.015～5005～5009710.4106 10.192 12.4847.388 1093 3.35155Simazine(西瑪津)0.015～5005～500923.898 596 2.99117.994 5.894 91155Spiromesifen(螺甲螨酯)0.025～5001～500836.284 3.688 6.3843.979 3.581 7.41151Spiroxamine(螺噁茂胺)0.015～5001～500892.6107 7.7104 3.7826.395 4.1101 14.21151Sulcotrione(磺草酮)0.0110～5005～50089 4.789 4.794 6.2906.992 4.798 6.855105Tebuconazole(戊唑醇)0.55～5001～500957.3102 9.796 4.48217.377 2.3100 5.51151Tebufenozide(蟲酰肼)105～5005～500107 5.6100 5.1996.2847.076 392 2.71555

續(xù)表2

農(nóng)藥aMRL/(mg·kg-1)線性范圍/(μg·kg-1)芹菜西紅柿回收率/%芹菜(添加水平)西紅柿(添加水平)LOQRSD2×LOQRSD10×LOQRSDLOQRSD2×LOQRSD10×LOQRSDSDL/(μg·kg-1)LOQ/(μg·kg-1)芹菜西紅柿芹菜西紅柿Tebufenpyrad(吡螨胺)0.011～5005～500978.397 7.593 11.81078.296 6.1100 11.91115Terbufos(特丁硫磷)0.0110～50010～500103 11.3103 11.389 10.382 10.182 10.1120 13.510101010Tetraconazole(氟醚唑)0.0210～5001～500925.2108 9.395 7.1837.095 6.795 11.811101Thiabendazole(噻菌靈)0.011～5001～500743.767 9.883 5.28516.366 1589 8.21111Thiamethoxam(噻蟲嗪)51～5005～50091 1.399 5.4959.311818.1102 6.996 3.61115Thiophanate-Methyl(甲基硫菌靈)0.110～5005～5007211.480 13.372 12.5737.979 11.284 10.8105105Tolclofos-methyl(甲基立枯磷)210～5005～50088 7.692 8.39210.3891.487 8.895 8.255105Triadimefon(三唑酮)0.011～5001～500984.7102 8.596 5860.693 3.397 11.51111Triadimenol(三唑醇)0.015～5005～500854.182 6.293 4843.888 11.193 9.35555Triasulfuron(醚苯磺隆)0.0510～5001～500891.890 4.692 1.11329.686 8.1118 411101Triazophos(三唑磷)0.015～5005～500956.2102 7.495 8.4788.887 8.995 10.21155Trichlorfon(敵百蟲)0.015～50010～500933.583 2.595 2.5101 5.9101 5.991 455510Tricyclazole(三環(huán)唑)0.011～5001～500858.388 1.393 1.17512.593 1.9101 1.31111Trifloxystrobin(肟菌酯)1510～5005～500101 7.290 6.59610.39713.678 9101 1711105Triflumizole(氟菌唑)0.15～5001～500846.199 1189 12894.985 12.5127 13.35151Triflumuron(殺鈴脲)0.055～50010～500874.3103 11.689 11.4928.577 7.5104 4.155510Triforine(嗪胺靈)0.0110～5005～50097 4.797 4.789 7.3913.995 6.997 5.255105

注：aMRL表示歐盟指導(dǎo)性文件規(guī)定的最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)值。

2.2 檢索參數(shù)優(yōu)化

本研究采用Waters公司提供的農(nóng)藥數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)樣品中農(nóng)藥殘留進(jìn)行篩查，而檢索參數(shù)的設(shè)定直接決定篩查結(jié)果的準(zhǔn)確性。檢索參數(shù)包括保留時(shí)間窗口、精確質(zhì)量數(shù)偏差、離子化形式、碎片離子、同位素類型和同位素強(qiáng)度等。通過(guò)對(duì)檢索參數(shù)的優(yōu)化以達(dá)到最大限度減少假陽(yáng)性的結(jié)果，提高篩查的準(zhǔn)確性。

2.2.1 精確質(zhì)量提取窗口

精確質(zhì)量偏差是化合物定性的重要依據(jù)，通過(guò)配制溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg/L)和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg/kg)對(duì)154種農(nóng)藥的質(zhì)量偏差進(jìn)行考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)定結(jié)果中質(zhì)量偏差在5 (ppm)以內(nèi)的農(nóng)藥占總數(shù)的98.2%，10 (ppm)以內(nèi)的農(nóng)藥占總數(shù)的100%；在芹菜和西紅柿基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)定結(jié)果中質(zhì)量偏差在5 (ppm)以內(nèi)的農(nóng)藥分別為85.1%和96.6%，且在芹菜中的質(zhì)量偏差高于西紅柿。當(dāng)質(zhì)量偏差窗口設(shè)置為10 (ppm)時(shí)，2種基質(zhì)中均有部分背景干擾離子被誤認(rèn)為是目標(biāo)離子，很容易造成假陽(yáng)性結(jié)果。因此，考慮到實(shí)際情況樣品基質(zhì)的復(fù)雜性，本方法將質(zhì)量提取窗口設(shè)置為5 (ppm)。

2.2.2 保留時(shí)間偏差窗口

在對(duì)復(fù)雜基質(zhì)數(shù)百種目標(biāo)化合物的偵測(cè)識(shí)別過(guò)程中，可能會(huì)在同一質(zhì)量窗口內(nèi)檢出多個(gè)色譜峰，互相干擾，增加了假陽(yáng)性結(jié)果產(chǎn)生的可能性；另外，對(duì)于分子式完全一樣的同分異構(gòu)化合物，僅依據(jù)精確質(zhì)量數(shù)不能實(shí)現(xiàn)對(duì)其有效區(qū)分和認(rèn)定。而增加保留時(shí)間限定要素，可以解決上述可能存在的假陽(yáng)性問(wèn)題。通過(guò)溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg/L)和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg/kg)對(duì)154種農(nóng)藥保留時(shí)間偏差進(jìn)行考察，每種基質(zhì)進(jìn)行5次重復(fù)測(cè)定，結(jié)果顯示溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)定結(jié)果中154種目標(biāo)物時(shí)間偏差均在0.12 min以內(nèi)，芹菜和西紅柿基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液中目標(biāo)物時(shí)間偏差分別在0.18和0.15 min之內(nèi)，2種基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液中所有農(nóng)藥保留時(shí)間5次重復(fù)測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別在±0.015～±0.009 min，考慮到保留時(shí)間偏差窗口設(shè)置應(yīng)該大于色譜峰時(shí)間偏差與標(biāo)準(zhǔn)偏差的和(0.18+0.015 min)，因此，將保留時(shí)間識(shí)別窗口設(shè)置為±0.2 min。

2.2.3 離子化模式選擇

對(duì)于液相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)，常見的離子化模式是[M+H]+、[M+Na]+、[M+NH4]+。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)本次研究涉及的154種農(nóng)藥，其離子化形式以[M+H]+為主，占總數(shù)的97.5%，以[M+NH4]+和[M+Na]+離子化形式為主的化合物分別占1.9%和0.6%，如涕滅威，甜菜安等。因此，同時(shí)選擇[M+H]+、[M+NH4]+、[M+Na]+模式進(jìn)行檢索有利于避免假陰性結(jié)果。

2.3 方法學(xué)驗(yàn)證

2.3.1 線性范圍

在優(yōu)化條件下，對(duì)6個(gè)質(zhì)量濃度水平的系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，以各組分的定量離子(加合離子)峰面積為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果表明各待測(cè)物在一定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，滿足相關(guān)系數(shù)(R2)≥0.995，154種農(nóng)藥的線性范圍見表2，多數(shù)農(nóng)藥表現(xiàn)出較寬的線性范圍，僅有芹菜中的乙氧喹啉、氟蟲脲和西紅柿中的烯草酮、乙氧嘧磺隆和氟蟲脲因定量限(均為100 μg/kg)較高，獲得了較窄的線性范圍。

2.3.2 篩查限和定量限

高分辨質(zhì)譜是基于高分辨識(shí)別能力和精確質(zhì)量測(cè)定能力對(duì)樣品中一定濃度的目標(biāo)物進(jìn)行識(shí)別，只要該濃度下滿足定性檢索標(biāo)準(zhǔn)，即可確證目標(biāo)物存在，所以篩查限(SDL)也可作為方法靈敏度的考察指標(biāo)。通過(guò)制備不同濃度水平(1、5、10、50和100 μg/kg)的芹菜和西紅柿基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，通過(guò)UPLC-Q-TOF/MS測(cè)定154種農(nóng)藥在2種基質(zhì)中的SDL，結(jié)果如表2和表3所示，2種基質(zhì)中SDL在10 μg/kg以內(nèi)(包括10 μg/kg)的農(nóng)藥占比均為96.7%，可見本研究建立的方法SDL(靈敏度)完全能夠滿足日常農(nóng)藥殘留檢測(cè)需要。

表3 154 種農(nóng)藥在芹菜和西紅柿基質(zhì)中的篩查限和定量限Table 3 The SDL and LOQ for 154 pesticides spiking in celery and tomato matrices

本研究中，定量限(LOQ)定義為線性范圍最低點(diǎn)分析物的濃度，同時(shí)滿足一定的精確性(RSD≤20%)，結(jié)果見表2和表3，在芹菜和西紅柿中均有96.8%農(nóng)藥LOQs≤10 μg/kg，且超過(guò)97.4%農(nóng)藥的LOQ低于歐盟MRL值；僅有乙氧喹啉、乙氧嘧磺隆、咪唑磺隆和甲磺隆4種農(nóng)藥LOQ高于MRL值，這些農(nóng)藥可通過(guò)改變前處理?xiàng)l件，加上濃縮的步驟來(lái)降低LOQ。此外發(fā)現(xiàn)，多數(shù)農(nóng)藥化合物在2種蔬菜基質(zhì)中的LOQ值與SDL一樣或稍高于SDL，說(shuō)明多數(shù)農(nóng)藥在滿足定性要求的濃度時(shí)即可進(jìn)行準(zhǔn)確定量?？傊琔PLC-Q-TOF/MS可以作為一種可靠、有效的工具，用于芹菜和西紅柿中農(nóng)藥多殘留的篩查和定量。

2.3.3 基質(zhì)效應(yīng)

基質(zhì)效應(yīng)可分為對(duì)目標(biāo)物信號(hào)響應(yīng)的增強(qiáng)效應(yīng)或者抑制效應(yīng)，產(chǎn)生原因是目標(biāo)物信號(hào)響應(yīng)受到共流出物的影響，最終影響到定量結(jié)果[20]。本研究中，每種農(nóng)藥在芹菜和西紅柿中受到的基質(zhì)效應(yīng)根據(jù)其在各基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液和溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液中的響應(yīng)比值來(lái)計(jì)算，具體計(jì)算公式如下：

基質(zhì)效應(yīng)(ME)/%=

(1)

根據(jù)受到基質(zhì)效應(yīng)的強(qiáng)弱，將基質(zhì)效應(yīng)分為3類：ME值低于-20%表現(xiàn)為基質(zhì)抑制效應(yīng)；ME值為-20%～20%表現(xiàn)為弱基質(zhì)效應(yīng)；ME值高于20%表現(xiàn)為基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)。154種農(nóng)藥在2種基質(zhì)中受到基質(zhì)效應(yīng)情況統(tǒng)計(jì)結(jié)果見圖2，在芹菜和西紅柿中分別有43.5%和29.2%農(nóng)藥表現(xiàn)出基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)，可能由于芹菜基質(zhì)較為復(fù)雜且不能完全被前處理過(guò)程中的填料吸附，故而引起較明顯的基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)。154種農(nóng)藥在2種基質(zhì)中均未發(fā)現(xiàn)基質(zhì)抑制現(xiàn)象。基于此，本方法需要采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)目標(biāo)物準(zhǔn)確定量。

a-芹菜；b-西紅柿圖2 154種農(nóng)藥在芹菜和西紅柿中的基質(zhì)效應(yīng)分布Fig.2 The matrix effect of 154 pesticides in celery and tomato sample

2.4 實(shí)際樣品檢測(cè)

對(duì)市售的15份芹菜和15份西紅柿樣品進(jìn)行154種農(nóng)藥篩查和定量，共有5例(3例芹菜和2例西紅柿)樣品中檢出6種農(nóng)藥。為了確保篩查和定量結(jié)果的準(zhǔn)確性，采用液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀(LC-MS/MS)對(duì)篩查結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)，結(jié)果如表4所示，通過(guò)本研究建立的UPLC-Q-TOF/MS快速檢測(cè)結(jié)果與LC-MS/MS檢測(cè)結(jié)果基本吻合，偏差在20%以內(nèi)。以檢出超標(biāo)農(nóng)藥氧樂(lè)果的4號(hào)芹菜樣品為例，UPLC-Q-TOF/MS和LC-MS/MS測(cè)定氧樂(lè)果濃度分別為25.1和21.8 μg/kg，濃度相差在20%以內(nèi)，表明2種方法結(jié)果一致，進(jìn)一步驗(yàn)證了本研究建立的UPLC-Q-TOF/MS方法在農(nóng)藥篩查和定量方面的準(zhǔn)確性。

表4 UPLC-Q-TOF/MS和LC-MS/MS測(cè)定市售樣品中農(nóng)藥含量對(duì)比(n=3) 單位：μg/kg

注：*表示檢出農(nóng)藥含量超出MRL值。

3 結(jié)論

本研究將快速、簡(jiǎn)便的QuEChERS提取、凈化技術(shù)與高靈敏度、高選擇性的UPLC-Q-TOF/MS檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合，建立了快速篩查、定量檢測(cè)芹菜和西紅柿中154種農(nóng)藥殘留的方法。通過(guò)對(duì)高分辨質(zhì)譜的定性檢索參數(shù)進(jìn)行全面研究和優(yōu)化，提高了篩查方法的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。該方法具有快速、簡(jiǎn)便、靈敏的特點(diǎn)，監(jiān)測(cè)的農(nóng)藥范圍廣，為應(yīng)用于芹菜和西紅柿以及其他各種類似農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留等安全突發(fā)事件的快速靈敏檢測(cè)提供堅(jiān)實(shí)有效的技術(shù)支撐，具有較強(qiáng)的應(yīng)用性和實(shí)用性。