參萸養(yǎng)心顆粒提取工藝優(yōu)選

張小斌，雷燕妮，陳書存

(1.商洛學(xué)院 健康管理學(xué)院、中國中醫(yī)科學(xué)院商洛中藥材GAP科研工程中心，陜西 商洛 726000；2.商洛學(xué)院 生物醫(yī)藥與食品工程學(xué)院，陜西 商洛 726000；3.商洛市中醫(yī)醫(yī)院，陜西 商洛 726000)

參萸養(yǎng)心湯[1]由人參、山茱萸、黃芪、桂枝、玉竹、五味子、扣子七、茯苓、 葶藶子、當(dāng)歸十味中藥組成，主治心悸，現(xiàn)代多用于慢性充血性心力衰竭屬于本虛標(biāo)實(shí)，以心陽虛、心氣虛為本，瘀血水飲為標(biāo)。治療以溫補(bǔ)心腎兼顧滋陰養(yǎng)血，佐以化瘀利水為治則，當(dāng)中的人參可以補(bǔ)氣，山茱萸有益于肝腎，兩者相配則可以幫助身體重收心氣，斂汗固脫。黃芪益氣行水為臣。茯苓甘平，可以化濕，葶藶子也有利尿功用，并加入了活血當(dāng)歸等。本方在補(bǔ)陽中配伍補(bǔ)陰藥是宗張介賓“善補(bǔ)陽者，必于陰中求陽，陽可以獲得陰功，而生化無窮。補(bǔ)陰則求于陽，以陽補(bǔ)陰，而泉源不竭”之意[2]。鑒于湯劑患者服用不便，且服用量較大，筆者對參萸養(yǎng)心湯進(jìn)行顆粒劑改進(jìn)，對方劑藥物成分進(jìn)行有效提取的工藝研究，以期為其制劑工藝優(yōu)化和劑型改革奠定一定的基礎(chǔ)。

1 實(shí)驗(yàn)儀器和材料

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

FW100高速萬能粉碎機(jī)(北京中興偉業(yè)儀器有限公司)；電子天平(FA1004 型號，是上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司制造)；SB-1100 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛朗儀器有限公司)，DHG-9123A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海齊欣科學(xué)儀器有限公司)，GT-350W 型超聲波提取器(濟(jì)寧科特超聲電子有限公司)，閃式微波提取器(上海釩幟精密設(shè)備有限公司)；SHZ-Ⅲ循環(huán)水真空泵(鞏義市英峪儀器廠生產(chǎn))，TED電熱恒溫水浴鍋(天津市泰斯特儀器有限公司)。

1.2 試藥與試劑

人參、山茱萸、黃芪、桂枝、玉竹、五味子、扣子七、茯苓、葶藶子、當(dāng)歸飲片等都是出資香菊制藥，并對這些藥劑進(jìn)行檢驗(yàn)，證實(shí)這些藥劑均符合2015年版《中國藥典》要求。乙醇為分析純，所用的蒸餾水是調(diào)配的。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方組成

人參15 g; 山茱萸15 g; 黃芪30 g; 桂枝6 g; 玉竹12 g ; 五味子12 g; 扣子七6 g; 茯苓15 g; 葶藶子12 g; 當(dāng)歸15 g

2.2 提取工藝優(yōu)選

2.2.1 粉碎工藝優(yōu)選 將組方單藥粉碎和混合粉碎進(jìn)行對比實(shí)驗(yàn)，單獨(dú)粉碎組方藥材的出粉率在80% 左右，且在這一過程花費(fèi)了較多時(shí)間，之后進(jìn)行去濕處置，并且根據(jù)處方來將這些藥材進(jìn)行再次加工，這一次的粉碎效果更好，為90%以上，粉碎時(shí)間明顯縮短，所以，可以在粉碎前進(jìn)行混合[3]。

2.2.2 干燥工藝優(yōu)選 對于特殊藥材桂枝，運(yùn)用的是低溫加工工藝，這樣來確保成本不受損。其余藥物常規(guī)干燥。

2.2.3 醇提工藝優(yōu)選 主要有:

(1)正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。參萸養(yǎng)心顆粒組方中山茱萸、黃芪、玉竹、五味子、扣子七、茯苓和當(dāng)歸等，是可水溶的，其成分也得以保存，故工業(yè)化生產(chǎn)中采用稀醇提取工藝。稀醇提取當(dāng)中最需要注意乙醇濃度、提取時(shí)間、提取次數(shù)、溶媒量等，因此運(yùn)用正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，對山茱萸、黃芪、玉竹、五味子、扣子七、茯苓和當(dāng)歸七味藥醇提工藝進(jìn)行篩選，擬定 4 因素3 水平，選用 L9(34)正交實(shí)驗(yàn)，參考表1、表2。

表1 醇提工藝因素水平

表2 正交表L9 (34 )和實(shí)驗(yàn)結(jié)果

由表2可知：A因素：KA2>KA3>KA1；B因素：KB2>KB3>KB1；C因素：KC3>KC2>KC1；D因素：KD3>KD2>KD1。最優(yōu)組合水平為A2B2C3D3，即醇提最佳工藝為加乙醇為40%，提取時(shí)間為1.5 h，提取次數(shù)3次，溶媒量為1∶10；由于RA>RD>RB>RC，可見對提取效率影響最大的是乙醇濃度，溶媒量、提取時(shí)間、提取次數(shù)等也有一定影響。

(1)方差分析。通過對正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析，結(jié)果見表3。

由方差分析表3可以看出：乙醇濃度對參萸養(yǎng)心顆粒提取效果有極大影響，另外，溶媒量、提取時(shí)間、提取次數(shù)則對提取工藝的影響依次遞減。對極差值分析看出，影響提取效果的因素順序?yàn)锳>D>B>C。所以，可以得到這樣的結(jié)論，參萸養(yǎng)心顆粒藥片中所含醇的工藝生產(chǎn)條件是A2B2C3D3。

表3 方差分析

2.2.4 微波提取工藝優(yōu)選 參萸養(yǎng)心顆粒組方中桂枝含有揮發(fā)性成分，不宜采用熱回流提取。參考文獻(xiàn)[4]通過微波能夠?qū)崿F(xiàn)對桂枝成分肉桂酸和桂皮醛的最大提取率，當(dāng)將條件設(shè)置為90%乙醇的提取溶媒，浸泡時(shí)間40 min,微波作用功率4 kW，液固比為10∶1，提取時(shí)間30 min。

2.2.5 超聲波提取工藝優(yōu)選 主要有:

(1)人參總皂苷提取工藝。依據(jù)處方比例稱量藥材，參萸養(yǎng)心顆粒組方中人參總皂苷采用乙醇超聲提取[5]，超聲波在四十?dāng)z氏度溫度下實(shí)現(xiàn)對人參皂苷的最大提取率，提取時(shí)間為40 min，乙醇用量為藥材粗粉量的10倍。

(2)葶藶子總黃酮提取工藝。參萸養(yǎng)心顆粒組方中葶藶子總黃酮最佳提取工藝[6]為：超聲溫度70℃、超聲功率400 W、水料比34 mL·g-1。

2.3 制粒工藝的選擇

取上述提取方法所得處方中各個(gè)藥材有效成分細(xì)粉，將細(xì)粉進(jìn)行制粒處理。根據(jù)工業(yè)化生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，選擇 75% 乙醇制粒較適宜。上述細(xì)粉經(jīng)制粒后，過 60 目篩。

3 結(jié)論與討論

中藥顆粒劑服用方便，并且有好的便攜性、運(yùn)輸性，流動(dòng)性好，其藥效也有一定保證，并且能夠減少煎服中藥造成的引濕，所以成為當(dāng)前臨床上常被使用的中藥劑型[7]。根據(jù)參萸養(yǎng)心顆粒組方中各中藥含有效成分極性不同，醇提的中藥山茱萸、黃芪、玉竹、五味子、扣子七、茯苓和當(dāng)歸最佳工藝條件：乙醇為40%，提取時(shí)間為1.5 h，提取次數(shù)2次，溶媒量為1∶10；桂枝微波提取工藝為：90%乙醇，浸泡時(shí)間40 min,微波功率4 kW，液固比10∶1，提取時(shí)間30 min；人參超聲提取最佳條件：提取溫度40℃，提取時(shí)間40 min，料液比1∶10；葶藶子超聲提取最佳工藝為：超聲溫度70℃、超聲功率400 W、水料比34 mL·g-1。采用該方法優(yōu)選參萸養(yǎng)心顆粒組方提取工藝路線所生產(chǎn)成品工藝穩(wěn)定可行，療效好，值得推廣應(yīng)用。