郭俊杰,楊 璐,符芳芳,連喜軍※,王雪青,康海岐
(1.天津商業(yè)大學(xué)生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院,天津市食品生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津300134;2.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所,成都610066)
直鏈淀粉和支鏈淀粉是淀粉的兩大主要組分。甘薯淀粉中直鏈淀粉含量在15.3%~28.8%之間,而支鏈淀粉含量在71.2%~84.7%之間[1]。直、支鏈淀粉的比例和含量對(duì)淀粉的產(chǎn)品加工、物化特性等有著直接影響[2-3]??剐缘矸郏姑附獾矸郏┦且环N不被健康人體小腸吸收,但能在大腸中發(fā)酵降解的淀粉,這類(lèi)淀粉不僅可以增加食品的耐泡性、耐煮性[4],延長(zhǎng)食品貨架期[5],還具有增強(qiáng)人體的工作耐力[6],抑制肥胖[7],預(yù)防心腦血管疾病等生理作用[8]??剐缘矸壑饕ㄟ^(guò)回生法制備,而淀粉的回生不僅取決于其分子大小、分子鏈長(zhǎng),還取決于其分子量分布指數(shù)(PDI polydispersitigindex)。淀粉分子分布越均一,其回生性越好[9]。研究表明,只有特定鏈長(zhǎng)(DP 12-22)的淀粉分子才可以產(chǎn)生晶核并回生[10-11]。淀粉的雙螺旋結(jié)構(gòu)在回生階段產(chǎn)生,特定鏈長(zhǎng)淀粉組分的比例越高,且分子量分布范圍越窄,淀粉的回生率越高[12]。甘薯淀粉為天然的高分子,其直、支鏈淀粉的分子量約為5×105g/mol[13]和1.6×106g/mol[14],且分子量分布很寬[15],采用回生酶解的方法可以切斷其高分子鏈,降低分子量,并使分子量分布變窄,從而加速淀粉回生[16]。淀粉在高壓濕熱后進(jìn)行酶解,淀粉鏈斷裂,分子量變小,并產(chǎn)生不同分子量分布的淀粉分子。將不同鏈長(zhǎng)淀粉分子分離純化,得到較小PDI的淀粉組分,對(duì)于控制淀粉回生具有重要的意義。
柱層析法是根據(jù)混合物中各組分的理化性質(zhì)差異,利用混合物中各組分在固定相和流動(dòng)相中分配系數(shù)不同,經(jīng)多次分配將各組分分離而達(dá)到純化的目的[17]。柱層析所需設(shè)備簡(jiǎn)單,且分離得到的產(chǎn)品純度極高[18],該法不僅可對(duì)天然產(chǎn)物進(jìn)行分離純化,還可以廣泛應(yīng)用于制藥、食品、化工等領(lǐng)域中[19]。沸石是自然界中一種廣泛分布的多孔型架狀硅酸鹽礦物[20],其比表面積大,具有較高的吸附能力及較強(qiáng)的離子交換能力,可用于柱層析的固定相中[21]。以沸石為固定相可以分離不同鏈長(zhǎng)的淀粉,而目前該方面相關(guān)研究較少。本文通過(guò)分別對(duì)甘薯直、支鏈淀粉進(jìn)行回生酶解,使分子量分布變窄,然后采用沸石作為固定相,進(jìn)行柱層析法分離,得到相近PDI的淀粉組分,并對(duì)其進(jìn)行可見(jiàn)光譜、高效體積排阻柱色譜、X-射線(xiàn)衍射及顯微圖譜分析,探索沸石對(duì)不同分子量分布淀粉的分離效果,得到其分離的具體條件,為甘薯淀粉分離工藝的選擇提供了相關(guān)理論基礎(chǔ)。
甘薯原淀粉:市售;α高溫淀粉酶、無(wú)水乙醇、氫氧化鉀、正丁醇(分析純)、鹽酸(分析純):天津市風(fēng)船化學(xué)試劑有限公司、人造沸石(大沸石粒徑4~6 mm,小沸石粒徑1~3 mm):天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所。
Lambda25 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),美國(guó)PerkinElme 公司;D/max-2500 X-射線(xiàn)衍射分析儀,日本理學(xué)公司;高效體積排阻柱色譜系統(tǒng)(high performance size exclusion column chromatography system,HPSEC),系統(tǒng)配有多角度激光光散射檢測(cè)器(multi-angle laser light scattering detecotr,MALS),折光率檢測(cè)器(refractive index detector,RI)。 串 聯(lián) 雙 柱(300 mm×7.5 mm,PL aquagel-OH MIXED,8 μm 凝膠色譜柱,英國(guó)什羅普郡Polymer 有限公司);DAWN DSP-F型激光光度計(jì),采用He-Ne激光(l=623.8 nm)為光源;K-5 貫流分析池,美國(guó)懷雅特技術(shù)公司,美國(guó)圣塔芭芭拉;RID-10A 型差示折光儀,日本島津公司;0.4 μm 薄膜濾器,Membrane Solutions 有限責(zé)任公司;OLYMPUS IX71 型光學(xué)顯微鏡,日本奧林巴斯公司。
1.2.1 人造沸石的活化
將人造沸石置于坩堝中,放入馬沸爐,活化3 h 后取出(600℃),以除去沸石中的雜質(zhì)。
1.2.2 甘薯直、支鏈淀粉的制備
參照文獻(xiàn)[22-24]方法制備甘薯回生淀粉,分離甘薯直鏈和支鏈淀粉,并將得到的直、支鏈淀粉二次回生、酶解、洗滌,干燥后備用。
1.2.3 沸石對(duì)甘薯回生淀粉組分分離
在100 mL 4 mol/L 的KOH 溶液中加入1.2.2 中制備的甘薯回生淀粉1.0 g,水浴加熱溶解后離心,取上清液,得到回生淀粉溶液。將得到的回生淀粉溶液傾倒入層析柱中,并向2個(gè)不同層析柱(20 mm×200 mm)中分別加入活化好的人造大、小沸石2500 g,直至淀粉溶液沒(méi)過(guò)沸石1~2 cm 即可。待吸附完成后(10 min),打開(kāi)開(kāi)關(guān)將淀粉溶液放出。將200 mL 0.01%草酸溶液分別倒入裝有吸附過(guò)回生淀粉的大、小沸石層析柱中,進(jìn)行洗脫,將收集到的洗脫液按照先后順序平均分為4 等份。取各洗脫液組分5 mL于試管中,分別滴加1滴碘液,靜置30 min。觀察碘液顏色,判斷大、小沸石吸附直、支鏈淀粉的情況。
1.2.4 柱層析法分別分離甘薯直鏈、支鏈淀粉組分
在1 000 mL 4 mol/L 的KOH 溶液中加入1.2.2 步驟制備的甘薯直、支鏈淀粉8 g,水浴加熱溶解后離心,取上清液,得到直鏈和支鏈淀粉溶液。將得到的直、支鏈淀粉溶液分別傾倒入裝有大、小沸石的層析柱(沸石質(zhì)量2500 g)中,直至淀粉溶液沒(méi)過(guò)沸石1~2 cm 即可。吸附10 min 后打開(kāi)開(kāi)關(guān)將淀粉溶液放出。將2000 mL 0.01%草酸溶液,分別倒入裝有吸附過(guò)直、支鏈淀粉的沸石層析柱中,進(jìn)行洗脫,將收集到的洗脫液平均分為4 等份(留取中間的第二組份和第三組份)。將得到的直鏈淀粉組分記為F1a、F2a,支鏈淀粉組分記為F1b、F2b。
將F1a、F2a、F1b、F2b 分別倒入4 顆層析柱中,向?qū)游鲋蟹謩e加入活化后的大沸石(F1a、F2a)和小沸石(F1b、F2b),直至直、支鏈淀粉溶液沒(méi)過(guò)沸石1-2 cm。待吸附10 min 后,將液體放出并棄去。再分別用2000 mL 0.01%草酸溶液洗脫4 顆層析柱。將收集到的洗脫液分別平分為4 等份:第一份回收,第二份至第四份分別編號(hào),直鏈淀粉為F1a-1、F1a-2、F1a-3 和F2a-1、F2a-2、F2a-3,支鏈淀粉為F1b-1、F1b-2、F1b-3 和F2b-1、F2b-2、F2b-3。最后將分離得到的各淀粉組分減壓蒸餾濃縮后,離心分離,沉淀充分水洗,干燥。
1.2.5 淀粉可見(jiàn)吸收測(cè)定
將分離得到的淀粉溶液用4 mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)pH 值至7.0,再分別量取各組份溶液25 mL,加3 滴碘液[25],放置30 min 后,用Lambda25 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定可見(jiàn)吸收的最大吸收波長(zhǎng)。
1.2.6 X-射線(xiàn)測(cè)定
用銅箔和鎳箔包裹淀粉粉末采用X-射線(xiàn)衍射儀掃描,掃描電流和電壓分別為27 mA 和50 kV,掃描衍射角(2θ)從4o到40o,步長(zhǎng)為0.05,間隔時(shí)間為2 s。
1.2.7 分子量分布曲線(xiàn)
如文獻(xiàn)[26]所述,將100 g 樣品加到80 mL 去離子水中,然后在沸水中加熱并攪拌20 min 使樣品完全溶解。通過(guò)5 μm 的醋酸纖維素濾膜過(guò)濾后,將溶解后的樣品放入高效體積排阻柱色譜系統(tǒng)中。流動(dòng)相速度為0.5 mL/min。流動(dòng)相為含0.02%NaN3的0.1 mol/L NaNO3溶液,該溶液通過(guò)0.4 μm 薄膜濾器過(guò)濾。分子量計(jì)算時(shí),比折光指數(shù)增量(dn/dc)值為0.150,數(shù)據(jù)處理采用ASTRA 軟件(4.73.04 版)。
1.2.8 光學(xué)顯微圖
將制備的淀粉樣品片置于顯微鏡樣品臺(tái)上,觀察淀粉顆粒的形貌。在B 光(波長(zhǎng)420~480 nm)下對(duì)淀粉顆粒進(jìn)行拍照。
圖1 為淀粉經(jīng)小沸石和大沸石洗脫后淀粉組分加碘液的顯色反應(yīng)。
由圖1a 可知,人造小沸石洗脫下來(lái)的組分基本呈現(xiàn)粉紅色,說(shuō)明小沸石吸附的主要是支鏈淀粉。由圖1b 可知,人造大沸石的3、4 組分呈現(xiàn)深藍(lán)色,說(shuō)明大沸石可吸附大量直鏈淀粉,而且洗脫過(guò)程中支鏈淀粉先洗下來(lái),直鏈淀粉后洗下來(lái)。因此,后續(xù)試驗(yàn)用人造大沸石分離直鏈淀粉組分,人造小沸石分離支鏈淀粉組分。
圖1 經(jīng)沸石洗脫后淀粉各組分加碘液的顯色反應(yīng)(洗脫先后順序?yàn)?,2,3,4)Fig.1 Chromogenic reactions of starch components separated by zeolite
表1 為以大、小沸石為固定相,采用柱層析法,分別分離100 g甘薯直、支鏈淀粉得到的各組分的質(zhì)量。并按下式計(jì)算得到直、支鏈淀粉的制備率。
表1 采用人造沸石分離的甘薯直、支鏈淀粉各組分質(zhì)量(100 g干淀粉)Table 1 Weight of sweet potato amylose and amylopectin separated by artificial zeolite(100 g dry starch)
式中mi為100 g 直鏈或支鏈淀粉分離得到的不同組分淀粉的質(zhì)量。直鏈淀粉各組分質(zhì)量在450 mg左右,100 g甘薯直鏈淀粉經(jīng)柱層析分離得到各組分總質(zhì)量為2800 mg,制備率高達(dá)2.8%。支鏈淀粉各組分質(zhì)量在410 mg左右,100 g甘薯支鏈淀粉經(jīng)柱層析分離得到各組分總質(zhì)量為2450 mg,制備率為2.45%,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于普通液相制備色譜對(duì)有機(jī)分子的分離[27]。
碘分子可嵌入淀粉的雙螺旋結(jié)構(gòu)內(nèi)部而生成藍(lán)紫色絡(luò)合物[28-29],Gidley 和Bulpin 等的研究表明[30],只有聚合度大于10 的淀粉才能形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。由圖2a、2b 可知,經(jīng)人造大沸石分離直鏈淀粉得到的組分加碘液后,除了F1a-1 有558 nm 最大吸收外,其他組分在可見(jiàn)光區(qū)沒(méi)有發(fā)現(xiàn)明顯的吸收,表明其聚合度均小于10,雙螺旋結(jié)構(gòu)在分離過(guò)程中打開(kāi),而后卻沒(méi)有重新形成。回生淀粉中直鏈淀粉組分聚合度大多小于10,說(shuō)明直、支鏈淀粉混合回生過(guò)程中,一個(gè)長(zhǎng)直鏈淀粉鏈可以和很多個(gè)支鏈或直鏈淀粉形成氫鍵,長(zhǎng)直鏈淀粉有部分間隔的鏈段沒(méi)有形成氫鍵,該鏈段由于在淀粉酶水解過(guò)程中被水解而斷裂成多個(gè)小的鏈段。由圖2c、2d 可知,經(jīng)人造小沸石分離支鏈淀粉所得組分加碘液后均出現(xiàn)了明顯的可見(jiàn)吸收,表明其分子聚合度均大于10,并且保持了雙螺旋結(jié)構(gòu)。洗脫后的甘薯支鏈淀粉組分的最大吸收波長(zhǎng)為:λF1b-2>λF1b-1>λF2a-3、λF2b-1>λF2b-2>λF2b-3,說(shuō)明小沸石柱層析分離甘薯支鏈淀粉過(guò)程中聚合度大的組分先被分離出來(lái),聚合度小的后分離出來(lái)。大、小沸石分離甘薯直、支鏈淀粉均是聚合度大的組分先分離出來(lái),說(shuō)明人造沸石孔徑大于聚合度為10的淀粉分子直徑,所以聚合度較小的淀粉分子可進(jìn)入沸石孔隙,吸附力大,后被洗脫下來(lái);而聚合度大的淀粉分子依賴(lài)沸石表面吸附,洗脫速度快,先被洗脫下來(lái)。
圖2 甘薯直、支鏈淀粉的可見(jiàn)吸收光譜Fig.2 Vis spectrum of sweet potato amylose and amylopectin components
圖4、圖5和表2為回生酶解后,以大、小沸石為固定相采用柱層析法分離得到的甘薯直、支鏈淀粉各組分的分子量分布。文獻(xiàn)報(bào)道[30]抗性淀粉的均分子量(Mw)為18 614 g/mol,數(shù)均分子量(Mn)為12 681 g/mol,分子量分布指數(shù)(PDI)為1.468,分子量分布較寬。本試驗(yàn)結(jié)果表明,通過(guò)回生酶解,直鏈淀粉和支鏈淀粉的Mw分別變窄為1 641~2 069 g/mol 和1 671~2 167 g/mol,Mn則 變 窄為1 516~1 710 g/mol和1 526~1 678 g/mol。對(duì)應(yīng)的直鏈淀粉PDI范圍為1.082~1.209,支鏈淀粉PDI為1.095~1.291,說(shuō)明通過(guò)酶解回生淀粉制備出的甘薯直、支鏈淀粉的分子量分布比回生淀粉本身的分子量分布范圍要窄很多。
圖3 甘薯直鏈淀粉的分子量分布圖Fig.3 Molecular weight distribution curve of sweet potato amylose
圖4 甘薯支鏈淀粉的分子量分布圖Fig.4 Molecular weight distribution curve of sweet potato amylopectin
表2 甘薯淀粉的分子量分布Table 2 Molecular weight distribution of sweet potato starch
由表2、圖3 可知,甘薯直鏈淀粉組分F1a 的1、2、3組分中的PDI 分別為1.209、1.082 和1.070,按照洗脫先后順序,組分的均一性越來(lái)越強(qiáng)。組分F1a-1 的PDI 明顯高于組分F1a-2 和F1a-3,推測(cè)F1a-1 的直鏈淀粉未進(jìn)入人造大沸石孔隙內(nèi),而是吸附于沸石表面。F2a 所有組分的PDI 均接近1.0,即重均和數(shù)均分子量接近,說(shuō)明分子量非常均一。F2a 的所有直鏈淀粉組分都進(jìn)入了人造大沸石的孔隙內(nèi),進(jìn)入大沸石孔隙內(nèi)的甘薯直鏈淀粉經(jīng)過(guò)大沸石柱層析,可制備出分子量分布范圍極窄的直鏈淀粉。
由表2、圖4可知,甘薯支鏈淀粉組分F1b的1、2、3組分中的PDI 分別為1.093、1.093 和1.306,1、2 組分的均一度接近且高于組分3。組分F1b-3 的PDI 明顯高于組分F1b-1 和F1b-2,推測(cè)F1b-3 的甘薯支鏈淀粉分子直徑大于人造小沸石的孔徑,沒(méi)能進(jìn)入小沸石孔隙,而是吸附于沸石表面。組分F1b-3 最后洗脫下來(lái)是由于小沸石表面吸附該組分的吸附力大于小沸石孔隙內(nèi)表面對(duì)組分F1b-1 和F1b-2 的吸附。按照洗脫順序,甘薯支鏈淀粉F2b 所有組分的PDI 值依次減小。最后洗脫下來(lái)的F2b-3 的PDI 最小。組分F2b-1 和組分F1b-3 的分子量雖然接近,但洗脫順序不同,F(xiàn)2b-1 先被洗脫,這可能與兩種分子的分支度不同有關(guān),后者分支度大,淀粉分子與小沸石吸附力更強(qiáng),所以后被洗脫。甘薯支鏈淀粉組分F1b 的整體分支度可能要比組分F2b的大。
由于組成淀粉的直鏈和支鏈淀粉晶體結(jié)構(gòu)及比例不同,淀粉顆粒分為有序的結(jié)晶區(qū)和無(wú)序的無(wú)定形區(qū)兩部分[32]。直、支鏈淀粉的晶體特性(聚集狀態(tài))一般通過(guò)X-射線(xiàn)衍射法進(jìn)行研究[33]。A 型結(jié)構(gòu)淀粉在15°和23°附近具有較強(qiáng)的衍射峰,同時(shí)在17°和18°處出現(xiàn)雙峰;B 型結(jié)構(gòu)在17°附近具有最強(qiáng)的衍射峰,同時(shí)在15°,20°,22°和24°處也有一些較小的衍射峰,其典型標(biāo)志是5.6°的衍射峰;C 型結(jié)構(gòu)是A 型和B 型的混合物,在17°和23°附近出現(xiàn)強(qiáng)衍射峰,在5.6°和15°處出現(xiàn)一些弱峰,且干燥樣品中5.6°處的衍射峰可能會(huì)消失。而V 型結(jié)構(gòu)的衍射峰出現(xiàn)在7.8°,13.5°和20.7°附近[34-36]。
圖5 甘薯直、支鏈淀粉組分的X射線(xiàn)衍射圖譜Fig.5 XRD spectrum of sweet potato amylose and amylopectin
圖5 為甘薯直、支鏈淀粉組分的X 射線(xiàn)衍射圖譜,由圖可知,甘薯直鏈和支鏈淀粉組分呈現(xiàn)出類(lèi)似金屬鹽晶體的X射線(xiàn)尖銳衍射峰,甘薯直鏈淀粉組分F1a-2(圖5a)衍射角出現(xiàn)在7°、18.9°、23.4°、27.2°、29.3°、32.2°、33.7°、39.3°。甘薯直鏈淀粉組分F2a-2(圖5b)衍射角出現(xiàn)在5.8°、18.9°、23.4°、27.2°、29.3°、31.6°、32.3°、33.7°、39.3°,這與文獻(xiàn)報(bào)道[37-38]分子量分布范圍在3~6×103g/mol之間淀粉的X 射線(xiàn)衍射峰不同,該類(lèi)淀粉的衍射峰型一般較寬,且峰數(shù)較少,很少見(jiàn)銳利的尖峰。直鏈F2a-2比F1a-2的聚合度低,其衍射峰多了31.6°(對(duì)應(yīng)面間距1.47?),另外弱峰7°衍射角變?yōu)?.8°,出現(xiàn)了晶體面間距較大的晶面,說(shuō)明聚合度越低的直鏈淀粉越容易形成更多的晶面。甘薯支鏈淀粉組分F1b-2 在7.1°、10.1°、12.3°、16.0°、
21.6°、22.9°、23.9°、26.5°、27.1°、29.3°、32.4°、34.1°、35.8°、39.5°附近均出現(xiàn)了明顯的衍射峰,而甘薯支鏈淀粉組分F2b-2 在衍射角為7.0°、10.0°、12.2°、16.0°處衍射峰明顯減小,衍射角為32.4°(對(duì)應(yīng)面間距1.43?)的晶面消失。甘薯支鏈淀粉組分F2b-2比組分F1b-2 的聚合度低,但晶體衍射峰少,說(shuō)明F2b-2 中部分甘薯支鏈淀粉長(zhǎng)度太小,不足以形成穩(wěn)定的分子間氫鍵而產(chǎn)生晶面。分子量分布范圍極窄的甘薯直、支鏈淀粉表現(xiàn)出類(lèi)似金屬鹽的X射線(xiàn)衍射峰,可作為深入研究淀粉大分子空間結(jié)構(gòu)變化的材料。
圖6 甘薯淀粉光學(xué)顯微圖片F(xiàn)ig.6 Optical micrograph of sweet potato amylose and amylopectin
直鏈淀粉是一種線(xiàn)形多聚物,主要由α-D-1,4-糖苷鍵連接而成,還有一部分由α-D-1,6-糖苷鍵連接而成[39-40]。淀粉在外加條件(熱處理、溶劑處理等)的作用下,由于分子內(nèi)氫鍵發(fā)生相互作用,使得直鏈淀粉的鏈狀結(jié)構(gòu)發(fā)生旋轉(zhuǎn),形成了容易與一些疏水基團(tuán)發(fā)生內(nèi)絡(luò)合作用的左手螺旋空腔結(jié)構(gòu)[41]。由圖6a, 6b 可見(jiàn),甘薯直鏈淀粉是由多個(gè)線(xiàn)型分子聚合在一起,呈典型的“柳條”狀,末端側(cè)支較短,C鏈較長(zhǎng)。
而支鏈淀粉是一種高分枝的束狀聚合物,主鏈通過(guò)α-1,4-糖苷鍵連接而成,支鏈通過(guò)α-1,6-糖苷鍵與主鏈相連[32]。甘薯支鏈淀粉光學(xué)顯微圖片(圖6c,6d)顯示支鏈淀粉呈典型的枝型“樹(shù)枝”狀,每個(gè)甘薯支鏈淀粉有6 個(gè)發(fā)散的分支(圖6c 和圖6d 中數(shù)字標(biāo)識(shí)處),這與前期研究結(jié)果吻合[42],其“樹(shù)枝”狀結(jié)構(gòu)中的分支并非均勻分布,而是分成小群體的分支群,可以通過(guò)α-淀粉酶徹底水解分離得到分支群,從而進(jìn)一步降低分子質(zhì)量,分離得到分子量分布更加均一度的淀粉組分。甘薯直、支鏈淀粉的顯微結(jié)構(gòu)與文獻(xiàn)推測(cè)的淀粉直、支鏈微觀結(jié)構(gòu)類(lèi)似[43-46]。
柱層析法可有效分離甘薯直、支鏈淀粉,研究表明粒徑為1~3 mm 的人造沸石適合分離支鏈淀粉,粒徑為4~6 mm 的人造沸石適合分離直鏈淀粉。通過(guò)回生、酶解、柱層析分離后,直鏈淀粉和支鏈淀粉的重均分子量分別變窄為1 641~2 069 g/mol 和1 671~2 167 g/mol,甘薯直、支鏈淀粉組分的分子直徑及分支度均對(duì)沸石柱層析法分離不同鏈長(zhǎng)的淀粉有著顯著影響。當(dāng)甘薯直、支鏈淀粉的PDI 接近1.0 時(shí),直鏈淀粉組分在18.9°、23.4°、27.2°、29.3°、32.3°、33.7°附近,支鏈淀粉組分在21.6°、22.9°、23.9°、26.5°、27.1°、29.3°、34.1°、35.8°、39.5°附近均出現(xiàn)類(lèi)似金屬鹽的X射線(xiàn)衍射強(qiáng)峰。甘薯直鏈淀粉呈典型的“柳條”狀,而甘薯支鏈淀粉呈典型的枝型“樹(shù)枝”狀。其枝條狀結(jié)構(gòu)可以通過(guò)α-淀粉酶徹底水解分離得到分支群,從而進(jìn)一步降低分子質(zhì)量,分離得到分子量分布更加均一度的淀粉組分。柱層析法有望得到大量分子量分布范圍極窄的直、支鏈淀粉,該研究為探索淀粉大分子聚集過(guò)程中的形態(tài)變化創(chuàng)造了有利條件。