反毛滴蟲研究的最新進(jìn)展：更新審查

趙詩佳 編譯，徐志 審校

(1武漢科技大學(xué)化工學(xué)院，武漢 430080；2湖北德信辰科技有限公司，武漢 430080)

1 引言

滴蟲病是世界上最常見的由鞭毛原生動物陰道毛滴蟲引起的非病毒性性傳播疾病(STD)，發(fā)病率極高，據(jù)世界衛(wèi)生組織組織報(bào)道每年有2.76億新增病例。人類是這種寄生蟲的天然宿主，它會導(dǎo)致男性和女性的泌尿生殖道感染。雖然這種感染是可以治愈的，但可能會對女性造成嚴(yán)重的后遺癥，如宮頸癌、不孕癥、感染艾滋病毒(人類免疫缺陷病毒)和胎盤膜過早破裂、早產(chǎn)和出生低體重嬰兒等不良妊娠結(jié)果。滴蟲病在男性中通常是無癥狀的，但最近發(fā)現(xiàn)滴蟲病與前列腺癌有關(guān)，另一個(gè)令人擔(dān)憂的問題是它與艾滋病的感染與傳播有關(guān)，目前的研究結(jié)果證明了這一點(diǎn)。

滴蟲病的傳統(tǒng)治療方法涉及5'-硝基咪唑類藥物，其中甲硝唑(MTZ)是唯一有效的經(jīng)批準(zhǔn)藥物。人們對滴蟲病藥物的耐藥性不斷提高，而MTZ治療陰道炎的失敗引起了人們的高度關(guān)注。因此，這些耐藥的病例通常是用增加MTZ劑量來治療的。這可能會導(dǎo)致副作用的增加。毫無疑問，滴蟲病的治療需要替代療法，包括保護(hù)策略。

在這篇綜述中，我們將簡要而全面地概述過去10年來對滴蟲病治療的研究進(jìn)展，包括合成和天然產(chǎn)品研究。本報(bào)告旨在將合成化合物和天然產(chǎn)物的抗毛滴蟲活性結(jié)果進(jìn)行匯總。

2 治療陰道炎的合成產(chǎn)品

合成化合物的研究一直是藥物發(fā)現(xiàn)的重要途具。在過去的十年里，為了找到一種有效的MTZ替代療法來治療滴蟲病，已合成了多種化學(xué)數(shù)據(jù)庫，并對其進(jìn)行了生物測試。我們根據(jù)這些化合物的結(jié)構(gòu)相似性對他們進(jìn)行分組。

2.1 5-硝基咪唑衍生物

對5-硝基咪唑類化合物的研究仍在進(jìn)行中，以尋找類似衍生物的替代衍生物，以期恢復(fù)MTZ陰道毛滴蟲的抗性，提高其效價(jià)。Upcroft等合成了30種5-硝基咪唑衍生物來改善陰道毛滴蟲對MTZ的抗藥性。其中三種化合物對陰道毛滴蟲耐藥菌(B7268，MIC為3.1～10 μmol/L和DUR36，MIC為1.6～6.3 μmol/L)的抑制作用是MTZ的5倍?；衔?（見圖1）被發(fā)現(xiàn)在MIC為3.1 μmol/L和1.6 μmol/L對陰道毛滴蟲病耐藥菌B 7268和DUR 36分別最有效。Anthwal和cogners合成了新的MTZ-查爾酮雜合物，并對MTZ易感和抗性毛滴蟲特性進(jìn)行了篩選。所有雜合物對MTZ敏感菌株(MIC為1.56～25 μg/mL)和耐藥菌株(MIC 3.125～100μg/mL)均有活性。與MTZ(MIC 為12.5 μg/mL)相比，兩種化合物(2, 3)對MTZ耐藥滴蟲表現(xiàn)出優(yōu)越的活性譜(＞4倍，MIC為3.125 μg/mL)，而對敏感株(MIC為1.56 μg/mL)沒有喪失活性。這些化合物還顯示了對HELa細(xì)胞的安全性和與陰道菌群的相容性。

由Mandalapu等通過環(huán)氧化物的親核開環(huán)反應(yīng)合成了60個(gè)2-甲基-4/5-硝基咪唑衍生物庫。所有的分子(兩個(gè)除外)分別在MIC在8.55～336.70 μmol/L及28.80～1445.08 μmol/L時(shí)對敏感株和耐藥株均有活性。對最具前景的化合物4(MIC,855 μmol/L對敏感株，MIC, 37.10 μmol/L對耐藥株)采用小鼠膿腫試驗(yàn)篩選體內(nèi)抗毛滴蟲活性。與MTZ治療組比較，化合物4治療后膿腫的大小明顯縮小。

圖1 5-硝基咪唑衍生物（1～4）作為抗毛滴蟲藥物

Kumar等也進(jìn)行了廣泛的研究，以增強(qiáng)MTZ穩(wěn)定性，使之對陰道耐藥菌更加有效。他們合成了一系列MTZ-二硫代氨基甲酸酯雜合物。例如2-(2-甲基-5-硝基-1H-咪唑-1-基)乙基-4-取代哌啶-1-碳二硫酸鹽，并對其抗MTZ敏感株和耐藥菌株進(jìn)行了檢驗(yàn)。所合成的13種化合物對MTZ耐藥株的抑菌效果(MIC為24.1～246 μmol/L)是MTZ本身(MIC為292 μmol/L)的1.2～12.1倍。最有效的化合物5（見圖2）的活性譜對敏感株MIC為1.68 μmol/L和對耐藥株MIC為24.1 μmol/L。硝基咪唑的酰胺衍生物也被證實(shí)具有抗毛滴蟲活性。這些化合物對敏感株有很強(qiáng)的活性，其EC50值為0.6～1.4 μmol/L，而MTZ的EC50僅為0.8 μmol/L。含有嗎啉取代基的化合物6在EC50值為0.6 μmol/L時(shí)活性最強(qiáng)。

兩個(gè)新合成的咪唑系列，即咪唑乙酰胺和咪唑磺胺類似物。在乙酰胺衍生物中，4個(gè)化合物(7～10)對陰道炎具有較高的生物活性(＜10 μmol/L)。其中磺胺類化合物11活性最高，其IC50值為2.93 μmol/L。

2.2 苯并咪唑衍生物

通過Korosh和他的同事對一系列雙苯并咪唑類似物(10個(gè)化合物)的抗毛滴蟲活性進(jìn)行了測試?；衔?2（見圖3）被發(fā)現(xiàn)活性最高，約為MTZ(MIC為145 μmol/L)活性的5.5倍( MIC為26 μmol/L)。用MTZ耐藥株085感染小鼠皮下模型，對化合物12的體內(nèi)抗毛滴蟲活性進(jìn)行了檢驗(yàn)。每日25 mg，連續(xù)4 d感染后，測定其有效率為100 %。

合成了一系列N-甲基苯并咪唑雜合物(13)，以測試其抗原生動物的活性。這些化合物的抗陰道毛滴蟲IC50值為0.023～0.0356 μmol/L。2-(三氟甲基)-1H苯并咪唑衍生物(14)其抗毛滴蟲活性IC50值范圍在0.016～0.970 μmol/L。

圖2 5-硝基咪唑衍生物（5～11）作為抗毛滴蟲藥物

對1-甲基苯并咪唑的酯類和酰胺類化合物的抗毛滴蟲活性進(jìn)行了篩選。兩個(gè)化合物系列對比標(biāo)準(zhǔn)藥物MTZ(IC50，1.2260 μmol/L)均表現(xiàn)出較好的活性(IC50值0.0275～0.5117 μmol/L)。其中酯類衍生物(15)被發(fā)現(xiàn)最為活躍。其IC50值為0.0275～0.0686 μmol/L。

苯并咪唑和戊烷脒的十種新型雜合物，對它們的體外抗原生動物活性進(jìn)行了測試，包括抗滴蟲的能力。1,5-雙[4-(5-甲氧基-1H-苯并咪唑-2-基)苯氧基]戊烷(16)的活性約為標(biāo)準(zhǔn)藥物MTZ(IC50為0.286 μmol/L)的兩倍，其IC50值為0.164 μmol/L 。

合成了新型苯并咪唑衍生物2-{[2-(1H-咪唑-1-基)乙基]砜基}-1H苯并咪唑(17)，并對其抗陰道毛滴蟲進(jìn)行了生物活性測定。與MTZ相比顯示了很強(qiáng)的活性(IC50為0.0698～0.1780 μmol/L)。

2.3 胺衍生物

Zuanazzi等合成了5種不同的二胺類和氨基醇衍生物，研究了5種不同濃度(0.1～1.5 μg/mL)的抗毛滴蟲活性。二胺類中的化合物18（見圖4）在所有試驗(yàn)濃度下，顯示出對一株新鮮臨床菌株(TV-VP60)和一株長期培養(yǎng)的(ATCC 30236)菌株的抗毛滴蟲活性與MTZ相當(dāng)。

合成了N-單烷基二胺，并對其抗陰道毛滴蟲的體外活性進(jìn)行了檢驗(yàn)。N-十六烷基-1，4-丁二胺(19)是抗陰道毛滴蟲最有效的化合物，其 MIC為2.5 mg/mL，是MTZ(5.0 mg/mL)活性的兩倍。3,4-二氯苯胺酰胺也具有抗毛滴蟲活性，化合物20在100 μmol/L濃度下對毛滴蟲的抑制率為69 %。

2.4 靛紅衍生物

Vipan和他的同事通過銅催化的‘click’化學(xué)”合成了十八種化合物，分別為1H-1,2,3-三唑連接的β-內(nèi)酰胺-異染色質(zhì)雙功能雜合物，并對陰道毛滴蟲G3株進(jìn)行了生物活性研究。在β-內(nèi)酰胺環(huán)的N-1上含有苯基取代基的化合物21（見圖5）和未取代的異染色質(zhì)環(huán)活性是活性最強(qiáng)的化合物，其IC50值為7.69 μmol/L，且無細(xì)胞毒性。

他們進(jìn)一步合成了單尿嘧啶和雙尿嘧啶的靛紅結(jié)合物，并在50 μmol/L處對陰道毛滴蟲進(jìn)行了檢測。與單尿嘧啶異辛酯偶聯(lián)物相比，雙尿嘧啶異辛酯偶聯(lián)物在50 μmol/L時(shí)表現(xiàn)出更好的抑制譜(90%抑制)含氯代物的化合物22的活性最好(IC50為9.79 μg/mL)。

2.5 已批準(zhǔn)上市的的抗毛滴蟲活性藥物

圖3 5-硝基咪唑衍生物（12～17）作為抗毛滴蟲藥物

圖4 胺衍生物（18～20）作為抗毛滴蟲藥物

圖5 靛紅衍生物（21～22）作為抗毛滴蟲藥物

米特福辛(Miltefosine，MLT，見圖6)是一種膜活性合成脂質(zhì)類似物-烷基磷膽堿，首次用于治療乳腺癌的皮膚轉(zhuǎn)移?；谝郧皥?bào)道MLT具有抗寄生蟲活性，Rocha等研究了MLT對陰道毛滴蟲活力和組織結(jié)構(gòu)的抑制作用。MLT在24 h和48 h潛伏期內(nèi)的IC50值分別為14.5和20 μmol/L。用透射電子顯微鏡(TEM)觀察，經(jīng)MLT處理的細(xì)胞有幾處超微結(jié)構(gòu)改變：皺紋細(xì)胞、圓形細(xì)胞和膜泡。

質(zhì)子泵抑制劑(PPIs)、奧美拉唑、蘭索拉唑、泮托拉唑和雷貝拉唑被廣泛用于治療消化性潰瘍、胃食管反流和幽門螺桿菌根除等的抗生素治療中。這些已上市的PPIs的抗毛滴蟲活性已經(jīng)進(jìn)行測試，所有4個(gè)測試的PPIs都顯示出抗毛滴蟲活性(IC50為0.0756 ～0.1218 μmol/L)。其中泮托拉唑的活性(IC50為0.0756 μmol/L)比MTZ(IC50為0.2360 μmol/L)高3倍。Tara 等進(jìn)行了儀器研究，并確定了PPIs(奧美拉唑，泮托拉唑、雷貝拉唑)為尿苷核糖水解酶抑制劑，是陰道毛滴蟲增殖所需要的酶，其作用是清除尿嘧啶。二鹽酸奧替尼丁是人們所熟知的陽離子表面活性劑，其作用方式與細(xì)胞膜的陰離子結(jié)構(gòu)結(jié)合，使細(xì)胞膜進(jìn)一步破裂。結(jié)果表明，二鹽酸辛尼丁與苯氧基乙醇聯(lián)用對陰道毛滴蟲有較強(qiáng)的抑制作用，MTZ抗性株與敏感株無顯著性差異。經(jīng)30 min的處理后，以試驗(yàn)培養(yǎng)基的蛋白質(zhì)濃度而定，50%有效濃度(EC50)范圍為0.68～2.11 μg/mL。在另一項(xiàng)經(jīng)批準(zhǔn)的藥物研究中，體外測試了抗逆轉(zhuǎn)錄病毒蛋白酶抑制劑對MTZ耐藥株的抗毛滴蟲活性。Kaletra(ritonavir和lopinavir的聯(lián)合制劑)對上述活性最為有效，MIC為10～50 μmol/L。0.2 %濃度的硼酸也能顯著降低陰道毛滴蟲的增值速度。

2.6 具有抗毛滴蟲潛力的雙功能陰道殺菌劑

外用陰道殺菌劑是女性通過固定精子來預(yù)防HIV/STD(毛滴蟲、白色念珠菌)和意外懷孕的一種預(yù)防性措施。游離硫醇組被認(rèn)為可抑制如毛滴蟲、白色念珠菌和精子等厭氧細(xì)胞的存活?？紤]到上述雙重靶向事實(shí)，Sharma等合成了一系列氟西汀的二硫代碳二酸衍生物，用以防止懷孕和抵御滴蟲病。在合成的20個(gè)化合物中，有7個(gè)化合物在7～52 μg/mL濃度下表現(xiàn)出抗滴蟲活性，其中甲基-[3-苯基-3-(4-三氟甲基苯基氧基)-丙基]卡二硫代酸S-(2-吡咯烷二乙基)酯(23，見圖7)活性較好，其殺精活性為0.05%，抗毛滴蟲14 μg/mL，抗真菌3.12～25 μg/mL。他們還報(bào)告了含有巰基的結(jié)構(gòu)雜化物，即二硫代氨基甲酸鹽和二硫醚(24)并通過巰基(SH)結(jié)合人精子和毛滴蟲來評估它們的作用。與MTZ(MIC，50.0 μg/mL)相比，11個(gè)化合物(MIC為3.12～50.0 μg/mL)對毛滴蟲有更強(qiáng)的抑制作用。

圖6 已批準(zhǔn)上市的抗毛滴蟲活性藥物

Sharma等還設(shè)計(jì)了吡咯烷酮-1卡二硫代甲酸吡咯烷酮(PPC，25)及其衍生物用于預(yù)防性避孕。它對人類精子的活性譜(MEC，145 μmol/L)和對敏感株(MIC為5.25 μmol/L)和耐藥菌株(MIC 13.50 μmol/L)的敏感菌(MIC 5.25 μmol/L)和耐藥菌株(MIC 13.50 μmol/L)均顯著高于標(biāo)準(zhǔn)株，諾奧諾-9(N-9，MEC 243 μmol/L)和MTZ(對敏感株MIC為13.64 μmol/L和對耐藥株MIC為358 μmol/L)。在PPC結(jié)果的啟發(fā)下，他們合成了15個(gè)新化合物，即二烷基二硫代氨基甲酸(26)的仲胺鹽，鑒定出11種具有強(qiáng)至中等(MIC為11.94～332.13 μmol/L)抗毛滴蟲活性的化合物。所有化合物對HeLa細(xì)胞均表現(xiàn)出較高的安全性，且與乳酸菌也有很好的兼容性。他們還報(bào)道了二十九種氨基二硫代甲酸銨鹽，進(jìn)一步擴(kuò)展了這項(xiàng)研究。11種化合物對易感菌株的抗毛滴蟲活性與MTZ相當(dāng)(MIC為3.25 mg/L)，且對耐藥的陰道毛滴蟲(MICNEW為6.25～25.0 mg/L和MICMTZ為50.0 mg/L)更為有效?；衔?7對敏感菌(MIC為1.56 mg/L)和耐藥滴蟲(MIC為7.8 mg/L)以及抵抗精子 (MEC,為61.5 mg/L)有著很強(qiáng)的活性。同時(shí)小鼠皮下膿腫實(shí)驗(yàn)顯示，化合物27在體內(nèi)具有活性。

在對強(qiáng)效陰道殺微生物劑的后續(xù)研究中，小組還報(bào)告了3-(氮雜-1-基)苯基丙烷(28)作為殺精劑，有10個(gè)化合物顯示了1 %濃度下完全固定精子。12種化合物在12.5～50 μg/mL時(shí)對陰道毛滴蟲有較強(qiáng)的殺菌活性。27個(gè)咪唑衍生物已經(jīng)被有目的地合成出來了，例如2-(2-甲基-5-硝基- 1h -咪唑-1-?；?乙醇(29)。所有化合物在MIC范圍為1.0～111.0 μmol/L時(shí)對陰道毛滴蟲均有活性，而標(biāo)準(zhǔn)藥物MTZ在MIC為11.7 μmol/L時(shí)有活性。

Bala等報(bào)道了氨基二硫代氨基硫酸鹽衍生物作為非表面活性劑，雙活性的陰道殺精劑，與SH基團(tuán)相互作用。最理想的化合物為2(吡咯烷酮-1-酰基)乙基哌啶-1-?；被姿狨?30，見圖8)，殺精(MEC，0.36 mmol/L)，對MTZ敏感株(MIC，0.056 mmol/L)和MTZ耐藥株(MIC，0.228 mmol/L)均具有抗毛滴蟲活性。他們進(jìn)一步將抗HIV的潛力與上述研究結(jié)合在一起，因?yàn)樾詡鞑ナ荋IV病毒傳播的最主要方式。他們以毛滴蟲、精子和HIV病毒為靶點(diǎn)，將二硫代氨基甲酸酯與硫脲雜交。該研究得到了12個(gè)雙活性化合物，其中最理想的化合物是辛基4-(苯甲酰氨基硫酰基)哌嗪-1-碳二硫酸鹽(31)，因?yàn)樗憩F(xiàn)出抗毛滴蟲(MIC為15.56 μg/mL)，殺精(MEC，0.025 %)活性和RT抑制(41.29 %)。為了增強(qiáng)RT的抑制作用，他們合成了一系列新的N-烷基/芳基-4-(3-取代-3-苯基丙基)哌嗪-1-碳硫酰胺衍生物。最優(yōu)的化合物是正丁基-4-(3-氧基-3-苯基丙基)哌拉嗪- 1-卡硫代酰胺(32)，其RT抑制(72.30 %)、抗毛滴蟲(MIC為46.72 μmol/L)、抗耐藥菌株(MIC為187.68 μmol/L)和殺精(MEC, 0.01 %)活性均優(yōu)于N-9。在合成的15個(gè)化合物中，9個(gè)(MIC為118.37～260.96 μmol/L)對MTZ耐毛滴蟲菌株的活性高于MTZ(MIC為292.80 μmol/L)。

圖7 具有抗毛滴蟲潛力的雙功能陰道殺菌劑（23～29）

另一組pandey等合成了3-(1-烷基/氨基烷基-3-乙烯基哌啶-4-基)-1-(喹諾林-4-基)-丙-1-酮及其2-亞甲基衍生物作為潛在的殺微生物的殺精劑。他們首先檢查了殺精活性，并進(jìn)行了活性化合物(MEC 0.5 %)抗滴蟲試驗(yàn)。化合物33殺精子MEC，0.01 %和抗毛滴蟲(敏感株MIC為1.5 μg/mL，耐藥菌株MIC為3.125 μg/mL)比N-9(殺精率0.02 %)和MTZ(MIC敏感株為2.0 μg/mL，MIC耐藥株為62.5 μg/mL)殺精效果好。

2.7 雜項(xiàng)試劑

PAN等研究了來自epinecidin-1的三種合成肽的抗菌活性。這些化合物有很強(qiáng)的抗毛滴蟲活性(MIC為12.5～200 μg/mL)。通過透射電鏡TEM和掃描電鏡(SEM)觀察，用這些肽處理的陰道毛滴蟲其外膜腫脹、破裂，胞內(nèi)含物滲出。Benchimol等對3-(聯(lián)苯-4-基)-3-羥基喹啉丁(BPQ-OH，34，見圖9)的抗毛滴蟲活性進(jìn)行了研究。BPQ-OH在IC50為46 μmol/L的情況下抑制陰道毛滴蟲的體外增殖。

白樺酸衍生物對耐藥性菌株ATCC 30236表現(xiàn)出明顯的的抗毛滴蟲活性，其活性降低了100 %。

Berzel的團(tuán)隊(duì)通過合成新的氮雜環(huán)來對付寄生原生動物感染的過程中，合成了兩個(gè)新的吲哚類衍生物，并測試了其抗毛滴蟲活性?；衔?5 3-(3-羥基丙氧基)吲哚唑衍生物對MTZ敏感和耐藥菌株的IC50值分別為7.25 μmol/L和9.11 μmol/L。Sharma等的團(tuán)隊(duì)已經(jīng)研究出了查爾康尼混合三唑類有機(jī)抗生素作為殺蟲劑和殺滴蟲劑。所有合成的化合物對陰道毛滴蟲均表現(xiàn)出顯著的活性。 IC50值為18.24～101.26 μmol/L。2-酰基氨基-5-硝基-1,3-噻唑衍生物已被用來對付被忽視的原生動物寄生蟲，包括陰道弓形蟲?；衔?6，即乙氧乙酸衍生物(IC50為10 nmol/L)比MTZ(IC50為290 nmol/L)活性提高29倍。

對硝唑嗪和氮雜嗪的苯并族化合物進(jìn)行了初步篩選，確定了它們的抗原生動物活性譜和硝唑嗪類化合物的苯系物，其中37種是廣譜的原生動物防原蟲劑，包括抗陰道毛滴蟲的活性，IC50為842 nmol/L。4-氨基-7-氯喹啉和二茂鐵酰亞胺衍生物也顯示出抗毛滴蟲的活性，在10 μmol/L的濃度下抑制率為34.9 %～61.5 %。

新型金屬有機(jī)金屬多核配合物Ru(Ⅱ)、Rh(Ⅲ)和Ir(Ⅲ)吡啶酯配合物的抗毛滴蟲活性測試結(jié)果表明，在50 μmol/L的試驗(yàn)條件下三吡啶酯銥配合物表現(xiàn)出95 %左右的滋養(yǎng)層抑制。

研究表明，N-氯?；撬?NCT)及其與氯化銨(NH4Cl)的結(jié)合對陰道毛滴蟲有抑制作用。NH4Cl對MTZ敏感株和耐藥菌株的NCT活性均有增強(qiáng)作用。添加NH4Cl時(shí)，僅需NCT濃度的三分之一即可達(dá)到100%的抑制效果，即5.5 mmol/L(0.1%)NCT+1.9 mmol/L(0.1 %)NH4Cl。

3 治療陰道毛滴蟲的天然產(chǎn)品

天然產(chǎn)物是新藥的重要來源，也是探索多種鉛結(jié)構(gòu)的重要來源，進(jìn)一步成為醫(yī)藥行業(yè)新藥開發(fā)的模板。近年來，由于沒有副作用，藥物化學(xué)家對天然植物的研究越來越多。值得注意的是，1981年至2010年期間由衛(wèi)生當(dāng)局批準(zhǔn)的抗寄生蟲藥物中，超過50 %為天然產(chǎn)品或衍生物。如表1所示，抗滴蟲活性的天然植物產(chǎn)品的研究在過去十年中也有所增加。整個(gè)天然產(chǎn)物的研究可進(jìn)一步分為兩類，第一類研究考察了粗植物提取物的抗毛滴蟲活性，第二類研究對提取物進(jìn)行了化學(xué)表征，并建立了其活性譜。

圖8 具有抗毛滴蟲潛力的雙功能陰道殺菌劑（30～33）

圖9 雜項(xiàng)試劑（34～37）作為抗毛滴蟲藥物

Lara和同事們研究了黑豆提取物對所選致病菌生長和培養(yǎng)的微生物和毒理作用。酸化水(AW)和乙酸(AA)提取物具有顯著的抗毛滴蟲活性，MICAW=176.8 μg/mL，MICAA=378.3 μg/mL。富含生物堿、黃酮、單寧和酚類化合物的球狀葉乙醇提取物與MTZ具有相同的抗毛滴蟲活性。Villiers等對13個(gè)庫索尼亞種進(jìn)行了與性傳播感染有關(guān)病原體(淋病奈瑟菌和毛滴蟲)的檢測?？鄥⑷~甲醇提取物在MIC 0.8～1.3 mg/mL時(shí)具有抗毛滴蟲活性。以黃桉葉為原料，制備了總提取物、乙醚、氯仿、乙酸乙酯、水提物等5種不同的提取物，并對其抗毛滴蟲活性進(jìn)行了測試。E測試他們的抗毛滴蟲潛力，乙酸乙酯提取物在12.5 mg/mL時(shí)表現(xiàn)出最大的活性，抑制率為100 %。Aminou等研究了酒精提取物、油、蕓豆凝集素對毛滴蟲的治療潛力，并與MTZ比較，研究了它們在500 μg/mL濃度下對陰道毛滴蟲的超微結(jié)構(gòu)的影響。使用透射電鏡觀察表明，紫花苜蓿油和尋常型凝集素處理后，細(xì)胞受到嚴(yán)重?fù)p傷，細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核受到破壞。

Tasca等評價(jià)了來自23種Caatinga植物(在巴西半干旱地區(qū)發(fā)現(xiàn))的44種水提取物對2株ATCC分離株和4株新鮮克林菌的抗毛滴蟲活性。在所有供試物種中，只有Polygala的根提取物顯著降低了滋養(yǎng)體活力，MIC值為1.56 mg/mL，對MTZ耐藥株具有顯著的抑制作用。在另一項(xiàng)研究中，Tasca等評價(jià)了Mby'a-Guarani土著群體廣泛使用的10種藥用植物抗陰道結(jié)核桿菌的活性。在水浸出物中，黃花果喜樹表現(xiàn)出較高的活性，MIC值為4.0 mg/mL。

美洲海洋生物中的CHCl3和EtOH的提取物對陰道毛滴蟲具有顯著的活性，IC50值分別為0.524 g/mL和0.533 g/mL。Eldin和Badawy研究了黃連木乳香油和羅勒油對陰道滋養(yǎng)體的體外作用。結(jié)果表明，這兩種植物對陰道毛滴蟲的生長均有抑制作用，并通過透射電鏡觀察其形態(tài)變化。培養(yǎng)48 h后，扁豆霉的MIC為10 mg/mL，羅勒油的MIC為20 μg/mL。

研究者對陰道毛滴蟲有效的分離/鑒定化合物的研究。Giordani等研究發(fā)現(xiàn)，從巴戟天種子中提取的單抗毛滴蟲生物堿具有抗毛滴蟲的作用。野百合堿(monocrotaline)在1 mg/mL時(shí)抑制毛單胞菌74 %，對陰道上皮細(xì)胞無細(xì)胞毒性，對溶血活性無明顯影響。他們還合成了其衍生物疊氮次堿(azidoretronecine)，其活性高于野百合堿(monocrotaline)，在1 mg/mL時(shí)殺滅85 %的寄生蟲。Friedman等研究了商品四糖、番茄糖、生物堿、番茄堿和苷元托馬替丁對陰道毛滴蟲G3株的抑制作用。篩選結(jié)果顯示，在100 μmol/L時(shí)，番茄堿完全抑制了陰道彎曲菌G3株。

Tasca等對西北特有植物Manilkararufula的7個(gè)部分的抗滴蟲活性進(jìn)行了評價(jià)。從M30和M100組分中鑒定出的黃酮類化合物和縮合單寧具有較高的抗毛滴蟲活性。用M30和M100組分測定MIC，濃度范圍為2.0～0.0156 mg/mL。在這個(gè)濃度范圍內(nèi)沒有任何一種陰道毛滴蟲能夠存活。

表1 天然植物產(chǎn)品成分顯示出抗毛滴蟲的能力

在另一項(xiàng)研究中，Tasca等展示了來自紀(jì)堯亞、西番蓮和冬青屬植物的皂甙的抗毛滴蟲能力。其中白花西番蓮和刺五加皂苷的抗毛滴蟲活性最強(qiáng)(MIC為0.025 %)。乳酸脫氫酶(LDH)檢測結(jié)果表明，膜損傷可能是抑制毛滴蟲活性的機(jī)理之一。

姜黃衍生物姜黃素對陰道彎曲菌的治療作用研究表明，在培養(yǎng)24 h后，三種測試(ATCC 30001、ATCC 30236和ATCC 50138)，EC50(有效濃度)在73.0～105.8 μg/mL之間。

Consolaria等使用了沙棘中的水-乙醇(WE)和丁醇(BE)提取物，以及純化的皂甙樣品(SP)，以進(jìn)行殺精子和抗毛滴蟲的活性測試。這些化合物是對臨床毛滴蟲(WE、BE MIC 為0.156 mg/mL, SP為0.078 mg/mL)和ATCC(WE、BE和SP，MIC分別為0.312 mg/mL、0.156 mg/mL和0.078 mg/mL)均有一定的抑制作用。Almeida和他的團(tuán)隊(duì)對石蒜堿及其半合成酯衍生物進(jìn)行了抗毛滴蟲活性研究。石蒜堿是石蒜科的生物堿，從山桐的鱗莖中提取。研究結(jié)果表明，作為石蒜堿的單酯衍生物，2-氧-月桂基石蒜堿在250 μmol/L時(shí)對毛滴蟲有100%的抑制作用。

Sun等首次報(bào)道了草果精油和香葉醇對陰道毛滴蟲的活性和形態(tài)變化。Tv1毛滴蟲分離株中草果精油的IC50為22.49 μg/mL, Tv2分離株中IC50為44.97 μg/mL，而香葉醇的IC50分別為342.96 μg/mL, 171.48 μg/mL。透射電鏡觀察陰道毛滴蟲的形態(tài)變化，包括核膜損傷、染色質(zhì)積累、胞漿內(nèi)出現(xiàn)大量空泡、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張等。

采用GC/MS對伊朗野生大黃花的揮發(fā)油進(jìn)行了分析，共鑒定出19個(gè)化合物。主要成分里貝斯花精油為棕櫚酸(27.08 %)、正二十烷(9.9 %)、正四環(huán)素(7.34 %)、亞油酸(6.56 %)和亞油酸(4.76 %)。用植物的花、莖、葉不同部位提取物對寄生蟲進(jìn)行處理，以確定其抗毛滴蟲的潛力?？姑蜗x活性譜(MIC為0.5～1.0 mg/mL)為進(jìn)一步研究提供了幫助。

在一項(xiàng)研究中，對楊梅葉的乙醇、水、己烷和乙酸乙酯提取物對毛滴蟲進(jìn)行了評價(jià)，發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯提取物在500 μg/mL濃度上是有效的(生長抑制率達(dá)100 %)，并且研究了從泰國植物中分離純化的β-糖苷和幾種糖苷類化合物的抗毛滴蟲作用。所有β-糖苷類藥物對毛滴蟲的MIC均在6.25～12.5 μmol/L范圍內(nèi)

Cargnin和他的小組使用超臨界流體萃取(50 ℃,150 bar)得到的金絲桃提取物和分離的化合物進(jìn)行了抗毛滴蟲活性的評價(jià)。從該提取物中提取烏利肌苷B、間苯三酚衍生物和3種苯并吡喃:6-異丁基-5,7-二甲氧基-2,2-二甲基苯并吡喃(HP1)、7-羥基-6-異丁基-5-甲氧基-2,2-二甲基苯并吡喃(HP2)和5-羥基-6-異丁基-7-甲氧基-2,2-二甲基苯并吡喃(HP3)。HP1對耐MTZ菌株和敏感菌株均表現(xiàn)出最佳的選擇性。

茉莉酸鹽是一組在植物中產(chǎn)生的小脂，對癌細(xì)胞有選擇性的細(xì)胞毒性。茉莉酸甲酯(MJ)是一種天然的茉莉酸酯，具有線粒體毒性作用。Flesher等研究了綜合利用MJ對一株耐MTZ的毛滴蟲 (ATCC 50143)菌株的抗毛滴蟲作用，發(fā)現(xiàn)該菌株對毛滴蟲表現(xiàn)出線粒體獨(dú)立的細(xì)胞毒性。

為了開發(fā)一種天然的殺微生物避孕藥，Tiwari等對Sapindus皂苷的抗毛滴蟲潛力進(jìn)行了研究。這些皂苷為六種皂苷的混合物，其中皂苷B為主要成分之一，經(jīng)正丁醇萃取法從木犀果果皮乙醇提取物(Reetha或soap nut)中分離得到。其抗毛滴蟲活性比其最低有效殺精濃度(0.05 %)低10倍(0.005 %)。在另一項(xiàng)針對精子和陰道毛滴蟲的研究中，將一種合成的殺精劑(DSE-37)與皂甙結(jié)合，在體內(nèi)對人精子和陰道毛滴蟲進(jìn)行了研究。將含有0.0015 %的DSE-37和0.003 % sapindus saponin的藥物組合，分別在30 s和24 h內(nèi)不可逆地固定100 %的人類精子和100%的毛滴蟲，在24～48 h內(nèi)不破壞人類宮頸細(xì)胞(HeLa)。

埃及Nahda大學(xué)通過臨床試驗(yàn)，開展了一項(xiàng)Commol/Liphoramolmol抗毛滴蟲作用的研究。在這項(xiàng)研究中，對33名耐MTZ陰道毛滴蟲女性給MTZ和替硝唑聯(lián)合用藥。此外，仍對該治療有耐藥性的患者，連續(xù)6～8 d口服Commol/Liphoramolmol提取物，發(fā)現(xiàn)Commol/Liphoramolmol的治愈率為84.6 %。

Tiana等對巴西南部海岸發(fā)現(xiàn)的海洋相關(guān)的真菌抗毛滴蟲活性化合物進(jìn)行了評估。兩種濾液樣品分別來自于Hypocrealixii F02和青霉霉citrinum F40，在2.5 mg/mL時(shí)對MTZ耐藥菌株表現(xiàn)出明顯的抗毛滴蟲活性。

4 結(jié)論

我們簡要地描述了在過去的十年中用于開發(fā)多種抗毛滴蟲藥物的各種合成和天然產(chǎn)品的研究。硝基咪唑類藥物MTZ是抗陰道毛滴蟲最有效的處方藥。但是全球陰道毛滴蟲耐藥性的發(fā)展使得研究人員開發(fā)出一些替代MTZ的方法。我們的研究介紹了合成化學(xué)文庫和藥用植物的多樣性，顯示出有很好的抗毛滴蟲活性。本綜述認(rèn)為，幾種合成的和天然的引線可以作為潛在的候選藥物來治療陰道毛滴蟲。此外，這篇文章中編譯的信息不僅會更新科學(xué)家最近的抗毛滴蟲的研究發(fā)現(xiàn)，同時(shí)也鼓勵(lì)他們進(jìn)一步探索有希望的新型藥物，以對抗陰道毛滴蟲感染。