陳 巍 侯粉霞 楊慧芳

(中國(guó)疾病預(yù)防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所 毒理室，北京 100050)

Wistar大鼠是醫(yī)學(xué)及生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的大鼠品系，建立其體質(zhì)量正常參考值對(duì)于開(kāi)展Wistar大鼠相關(guān)研究具有重要的參考作用。本實(shí)驗(yàn)室最近開(kāi)展了一項(xiàng)為期2年的Wistar大鼠喂飼試驗(yàn)，記錄了正常對(duì)照組Wistar大鼠自5周齡至109周齡在其大部分生命過(guò)程中37個(gè)時(shí)點(diǎn)的體質(zhì)量及其增長(zhǎng)速度，這些資料可對(duì)已有的Wistar大鼠體質(zhì)量正常參考值的相關(guān)文獻(xiàn)資料進(jìn)行進(jìn)一步完善和補(bǔ)充，為Wistar大鼠體質(zhì)量的實(shí)驗(yàn)室間比較或相關(guān)技術(shù)人員提供一些有用的參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：SPF級(jí)Wistar大鼠(4周齡)，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，合格證號(hào)為SCXK-(京)2006-0009；經(jīng)隨機(jī)分組后正常對(duì)照組有雄性和雌性大鼠各60只。試驗(yàn)前觀察1周，之后開(kāi)始試驗(yàn)。試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)(大鼠5周齡)雄性和雌性大鼠的體質(zhì)量分別為(132.0±11.2)g和(122.2±5.8)g。

1.1.2飼養(yǎng)條件：動(dòng)物飼養(yǎng)于中國(guó)疾病預(yù)防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，屏障環(huán)境，許可證號(hào)為SYXK(京) 2009-0032；每籠5只。雄性動(dòng)物于試驗(yàn)的第14周調(diào)整為每籠3只，雌性動(dòng)物于試驗(yàn)的第37周調(diào)整為每籠4只。試驗(yàn)期為104周，整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi)正常對(duì)照組大鼠自由攝食常規(guī)飼料(由科澳協(xié)力飼料有限公司制備，其合格證號(hào)為SCXK(京)2009-0012)、自由飲水。試驗(yàn)符合3R原則，倫理審批號(hào)為EAWE-2010-013。

1.2 方法

1.2.1體質(zhì)量測(cè)量：于試驗(yàn)開(kāi)始當(dāng)日(試驗(yàn)的0周，此時(shí)大鼠5周齡)測(cè)量大鼠的體質(zhì)量，之后在試驗(yàn)的前13周內(nèi)，每周測(cè)量一次體質(zhì)量，實(shí)驗(yàn)13周之后每4周測(cè)量一次體質(zhì)量。采用電子天平(編號(hào)：DW1101-5，常熟市雙杰測(cè)試儀器廠，量程1 000 g，精度0.1 g)對(duì)大鼠體質(zhì)量進(jìn)行測(cè)量。

1.2.2計(jì)算體質(zhì)量的增長(zhǎng)速度：根據(jù)各時(shí)點(diǎn)體質(zhì)量與前一時(shí)點(diǎn)體質(zhì)量之差，除以兩時(shí)點(diǎn)之間的周數(shù)，計(jì)算各時(shí)點(diǎn)每周增長(zhǎng)的克數(shù)，即為體質(zhì)量的增長(zhǎng)速度。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果

2.1 體質(zhì)量

雄性和雌性Wistar大鼠在5周齡至109周齡(共37個(gè)時(shí)點(diǎn))的體質(zhì)量見(jiàn)表1和圖1。隨著鼠齡的增加，體質(zhì)量呈持續(xù)增長(zhǎng)趨勢(shì)，雄性大鼠在94周齡達(dá)到最大體質(zhì)量(755.7±103.4)g，雌性大鼠在102周齡達(dá)到最大體質(zhì)量(515.4±96.6)g，之后體質(zhì)量呈減低趨勢(shì)。

表1 5周齡至109周齡Wistar大鼠的體質(zhì)量Table 1 Body weight of Wistar rat in age from 5 to 109 weeks

圖1 5周齡至109周齡Wistar大鼠的體質(zhì)量Fig.1 Body weight of Wistar rat in age betweent 5 and 109 weeks

2.2 體質(zhì)量的增長(zhǎng)速度(每周增長(zhǎng)的克數(shù))

雄性和雌性Wistar大鼠在5周齡至109周齡的體質(zhì)量增長(zhǎng)速度見(jiàn)表2和圖2。隨著鼠齡的增加，大鼠的體質(zhì)量增長(zhǎng)速度總體上呈逐漸減慢的趨勢(shì)。

圖2 5周齡至109周齡Wistar大鼠的體質(zhì)量增長(zhǎng)速度的減低趨勢(shì)Fig.2 The decrease trend of weight gain rate of Wistar rat in age betweent 5 and 109 weeks old

表2 5周齡至109周齡Wistar大鼠體質(zhì)量的增長(zhǎng)速度(g/周，Table 2 The rate of body weight gain of Wistar rat in age from 5 to 109 weeks(g/周，

鼠齡越小的時(shí)候，體質(zhì)量增長(zhǎng)速度越大；鼠齡越大的時(shí)候，體質(zhì)量增長(zhǎng)速度越小；雄性大鼠在66周齡、雌性大鼠在82周齡首次出現(xiàn)了負(fù)增長(zhǎng)，負(fù)增長(zhǎng)的幅度最終變得更大。

3 討論

體質(zhì)量幾乎是在開(kāi)展各種動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)都需要測(cè)量的一項(xiàng)指標(biāo)。首先，它是計(jì)算動(dòng)物染毒或給藥劑量的依據(jù)，因?yàn)槿径净蚪o藥劑量是按每公斤體質(zhì)量給藥量來(lái)表示的，而且在動(dòng)物染毒過(guò)程中，還常常需要根據(jù)動(dòng)物的體質(zhì)量來(lái)調(diào)整染毒量；其次，體質(zhì)量是一項(xiàng)最直接、最客觀的毒性評(píng)價(jià)指標(biāo)，染毒引起動(dòng)物發(fā)生的系統(tǒng)毒性可直接反映在體質(zhì)量的改變(主要表現(xiàn)為體質(zhì)量減低)，如果染毒組體質(zhì)量與對(duì)照組相比顯著減低且具有劑量-效應(yīng)關(guān)系，則可說(shuō)明受試物產(chǎn)生了一定的毒性效應(yīng)。在慢性毒性和致癌試驗(yàn)中，高劑量的劑量設(shè)計(jì)原則是“不應(yīng)引起嚴(yán)重的毒性或動(dòng)物死亡，但應(yīng)表現(xiàn)出毒性效應(yīng)，如，體質(zhì)量增長(zhǎng)降低了10%”[1-3]，這進(jìn)一步說(shuō)明了體質(zhì)量在反映毒性效應(yīng)的直接性；體質(zhì)量的客觀性在于很容易對(duì)體質(zhì)量進(jìn)行準(zhǔn)確的定量測(cè)量。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，除了染毒因素外，動(dòng)物體質(zhì)量還會(huì)受多種因素的影響，主要是飼養(yǎng)環(huán)境條件和人員操作，如動(dòng)物過(guò)度擁擠、噪聲、溫度、濕度超標(biāo)、不及時(shí)換墊料、缺水、缺食等照護(hù)不周、發(fā)生自發(fā)性疾病等，因此，相同鼠齡的大鼠在實(shí)驗(yàn)室間會(huì)存在一定的差別，建立體質(zhì)量正常參考值需要積累多個(gè)實(shí)驗(yàn)室的大量相關(guān)數(shù)據(jù)。

本研究報(bào)告了正常對(duì)照組Wistar大鼠自5周齡至109周齡在其大部分生命過(guò)程中共37個(gè)時(shí)點(diǎn)的體質(zhì)量及其增長(zhǎng)速度。通過(guò)全面查閱國(guó)內(nèi)外與大鼠體質(zhì)量正常值相關(guān)的文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)國(guó)內(nèi)關(guān)于大鼠體質(zhì)量正常參考值的研究中，SD大鼠相關(guān)的文獻(xiàn)較多，而Wistar大鼠相關(guān)的文獻(xiàn)較少，而且Wistar大鼠的相關(guān)文獻(xiàn)目前僅涉及18周齡以內(nèi)的大鼠[4-8]。此外，國(guó)內(nèi)外開(kāi)展的2年慢性毒性和致癌試驗(yàn)中，國(guó)內(nèi)多使用SD大鼠，國(guó)外多使用Fischer 344大鼠；有關(guān)使用Wistar大鼠進(jìn)行的2年慢性毒性和致癌試驗(yàn)研究中，多數(shù)情況下對(duì)體質(zhì)量資料不做詳細(xì)介紹[9-12]，或用圖來(lái)表示體質(zhì)量的變化趨勢(shì)，不報(bào)告體質(zhì)量的具體數(shù)據(jù)[13-14]；有體質(zhì)量具體數(shù)據(jù)的文獻(xiàn)中體質(zhì)量測(cè)定的時(shí)點(diǎn)數(shù)較少，如王靜等[15]在24個(gè)月的慢性毒性試驗(yàn)研究中僅報(bào)告了9個(gè)時(shí)點(diǎn)的體質(zhì)量、Otabe等[16]在104周的慢性毒性試驗(yàn)期內(nèi)報(bào)告了20個(gè)時(shí)點(diǎn)的體質(zhì)量；比較這些文獻(xiàn)的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)大鼠8周齡以前各實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的體質(zhì)量基本一致，鼠齡越大，各實(shí)驗(yàn)室報(bào)告的體質(zhì)量差異越大，以最大體質(zhì)量為例，王靜等[15]報(bào)告的雄性和雌性大鼠的最大平均體質(zhì)量分別為515.4 g和354.0 g，Otabe 等[16]報(bào)告的雄性和雌性大鼠的最大平均體質(zhì)量分別為624 g和396 g；本研究5～10周齡鼠的體質(zhì)量與文獻(xiàn)基本一致，但雄性和雌性大鼠的最大平均體質(zhì)量較高，分別為755.7 g和515.4 g。

本研究不僅建立了我實(shí)驗(yàn)室Wistar大鼠自5周齡至109周齡不同時(shí)點(diǎn)體質(zhì)量的正常參考值，也可對(duì)已有的Wistar大鼠體質(zhì)量正常值的相關(guān)文獻(xiàn)資料進(jìn)行進(jìn)一步完善和補(bǔ)充，為Wistar大鼠體質(zhì)量正常值的實(shí)驗(yàn)室間比較或相關(guān)技術(shù)人員提供一些有用的參考。