滕小宇

甲狀腺癌作為臨床常見的腫瘤疾病，對其盡早診斷治療及預(yù)后分析極為重要［1］。凋亡抑制蛋白加速屬于高度保守的抗凋亡基因表達(dá)產(chǎn)物，存活素屬于其中的新成員，具有凋亡調(diào)控作用，其可能抑制凋亡信號傳導(dǎo)通路的終末效因子半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)起到凋亡作用［2，3］。為此，本次研究對細(xì)胞凋亡抑制因子存活素與血管內(nèi)皮生長因子在甲狀腺癌中的表達(dá)及其意義進(jìn)行了探討，詳細(xì)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取本院2016年3月～2018年3月收治的58例甲狀腺癌患者、10例甲狀腺腺瘤患者及10例甲狀腺組織正常者作為研究對象。甲狀腺癌患者中男24例,女34例；年齡20～60歲,平均年齡(42.62±6.85)歲；甲狀腺乳頭狀癌(PTC)30例,甲狀腺濾泡狀癌(FTC)12例,甲狀腺髓樣癌(MTC)12例,甲狀腺未分化癌 (UTC)4例；臨床分期：Ⅰ、Ⅱ期42例,Ⅲ、Ⅳ期16例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移22例,淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移36例。甲狀腺腺瘤患者中男3例,女7例；年齡25～55歲,平均年齡(42.16±5.92)歲。甲狀腺組織正常者中男4例,女6例；年齡25～58歲,平均年齡(42.33±6.47)歲。

1.2檢測方法 采用鏈酶親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物法檢測三組研究對象的存活素水平與血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)情況。嚴(yán)格依據(jù)試劑盒操作說明開展,標(biāo)本均預(yù)先進(jìn)行蘇木精-伊紅染色法(HE)染色重新確診分類,檢測中進(jìn)行切片脫蠟水化,微波修復(fù)抗原及山羊血清封閉,再滴加抗存活素、血管內(nèi)皮生長因子抗體,過夜以生物素標(biāo)記二抗及ABC復(fù)合物孵育,利用DAB顯色,再利用蘇木素復(fù)染后封片。將PBS代替一抗平行操作染色作為陰性對照,將乳腺癌陽性片作為陽性對照。

1.3觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 統(tǒng)計(jì)甲狀腺癌患者、甲狀腺腺瘤患者及甲狀腺組織正常者組織存活素陽性表達(dá)情況；比較甲狀腺癌患者不同組織分型、不同臨床分期及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移存活素、血管內(nèi)皮生長因子陽性表達(dá)情況。陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)［4］：組織切片顯示胞漿或胞核染為淡黃至棕黃色為陽性細(xì)胞標(biāo)識。計(jì)數(shù)5個(gè)高倍視野各100個(gè)細(xì)胞,計(jì)算陽性細(xì)胞百分率并進(jìn)行分類,如0：陽性細(xì)胞＜10%,1：陽性細(xì)胞10%～25%,2：陽性細(xì)胞26%～50%,3：陽性細(xì)胞51%～75%,4：陽性細(xì)胞＞75%。依據(jù)染色程度分類,弱(+)：淡黃色或僅個(gè)表細(xì)胞呈黃至棕黃色,強(qiáng)度(+++)：呈黃至棕黃色,中等(++)：介于兩者之間。將染色強(qiáng)度與陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)相乘評價(jià)陽性(≥1)率。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1甲狀腺癌患者、甲狀腺腺瘤患者及甲狀腺組織正常者組織存活素陽性表達(dá)情況 甲狀腺癌患者組織中32例(55.17%)表達(dá)陽性,甲狀腺腺瘤患者組織中1例(10.00%)呈弱陽性表達(dá),甲狀腺組織正常者組織中未見表達(dá)。

2.2甲狀腺癌患者不同組織分型、不同臨床分期及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移存活素陽性表達(dá)情況比較 甲狀腺未分化癌和甲狀腺髓樣癌存活素陽性表達(dá)率100.00%、91.67%顯著高于甲狀腺濾泡狀癌的41.67%和甲狀腺乳頭狀癌的40.00%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.15、5.10,χ2=6.75、9.24,P＜0.05)；臨床分期Ⅲ、Ⅳ期存活素陽性表達(dá)率81.25%顯著高于Ⅰ、Ⅱ期的45.24%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.08,P＜0.05)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存活素陽性表達(dá)率81.82%顯著高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移的38.89%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10.18,P＜0.05)。見表1。

表1 甲狀腺癌患者不同組織分型、不同臨床分期及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移存活素陽性表達(dá)情況比較(n,%)

2.3甲狀腺癌患者血管內(nèi)皮生長因子蛋白陽性表達(dá)情況 甲狀腺未分化癌血管內(nèi)皮生長因子蛋白陽性表達(dá)率100.00%(4/4)顯著高于甲狀腺髓樣癌的41.67%(5/12)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.15，P＜0.05)；Ⅲ、Ⅳ期陽性表達(dá)率93.75%(15/16)顯著高于Ⅰ、Ⅱ期的40.48%(17/42)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.14，P＜0.05)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性表達(dá)率90.91%(20/22)顯著高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移的33.33%(12/36)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.14，P＜0.05)。

3 討論

根據(jù)相關(guān)研究可知，死亡蛋白酶系統(tǒng)是細(xì)胞凋亡信號傳導(dǎo)的重要途徑，而caspase-3作為中心分子，在細(xì)胞生理和病理性死亡中均參與，對啟動細(xì)胞凋亡有明顯作用，而存活素抗凋亡功能能夠?qū)aspase-3產(chǎn)生直接抑制作用，阻斷凋亡調(diào)節(jié)通路。而且一些研究發(fā)現(xiàn)，caspase-3表達(dá)與正常甲狀腺組織表達(dá)相似，即caspase-3具有獨(dú)特的存在方式，其需激活后才促凋亡，存活素可能無法全面抑制，因此無法將其作為甲狀腺癌診治的有效依據(jù)。本次研究結(jié)果顯示，甲狀腺癌患者組織中32例(55.17%)存活素表達(dá)陽性，甲狀腺腺瘤患者組織中1例(10.00%)存活素呈弱陽性表達(dá)，甲狀腺組織正常者組織中未見存活素表達(dá)。表明存活素在在正常甲狀腺和良性甲狀腺腫表達(dá)不明顯，而在甲狀腺癌組織中表達(dá)顯著，認(rèn)為其與甲狀腺癌的發(fā)生關(guān)聯(lián)較大，其能夠阻斷凋亡，促使轉(zhuǎn)化細(xì)胞異常存活，并參與甲狀腺癌的發(fā)展［5］。研究結(jié)果顯示，存活素與血管內(nèi)皮生長因子陽性表達(dá)中，均以甲狀腺未分化癌最高，臨床分期Ⅲ、Ⅳ期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移偏高，表明在相對惡性分期、轉(zhuǎn)移及類型中表達(dá)更加顯著，提示其可預(yù)測甲狀腺癌的侵襲性和不良預(yù)后。而且其與血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)呈現(xiàn)相同變化趨勢，則可分析其可能與血管內(nèi)皮生長因子介導(dǎo)參與血管生成，與學(xué)者研究結(jié)果存在相似性［6］。

綜上所述，存活素與血管內(nèi)皮生長因子參與甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展，其中存活素阻抗細(xì)胞凋亡，且與血管內(nèi)皮生長因子協(xié)同促進(jìn)血管生成，具有較高的研究價(jià)值。