不同貯藏條件和包裝對(duì)防風(fēng)飲片質(zhì)量影響的研究△

田壯，鄧哲，周海燕，王浩，杜杰，鐘榮榮，范亞楠，孫曉叢

中國中藥有限公司，北京 102600

包裝和貯藏是影響中藥質(zhì)量的關(guān)鍵因素，尤其是貯藏環(huán)節(jié)，古人非常重視，我國最早的藥學(xué)專著《神農(nóng)本草經(jīng)》提出“藥物的陰干、曝干，采造時(shí)月，生熟、土地所出，真?zhèn)涡玛悾⒏饔蟹ā?，初步為中藥的貯藏和養(yǎng)護(hù)奠定了基礎(chǔ)；其后論述中藥貯藏以及中藥貯藏好壞與療效關(guān)系的論著居多，甚至南北朝時(shí)期有藥藏局的出現(xiàn)；明代《本草蒙筌》中就有對(duì)抗同貯的記載等[1]。近代雖然有一些中藥貯藏和養(yǎng)護(hù)相關(guān)的著作和新方法介紹，但包裝和貯藏環(huán)節(jié)在中藥行業(yè)依然不夠重視，處于弱勢(shì)地位。《中華人民共和國藥典》對(duì)中藥飲片的貯藏也只是簡單地描述，更無包裝和有效期的要求。中藥飲片作為可直接臨床處方的藥物，質(zhì)量尤為關(guān)鍵。為保證中藥質(zhì)量，保障臨床療效，開展中藥飲片包裝和貯藏的研究具有實(shí)質(zhì)性的意義。

防風(fēng)為傘形科植物防風(fēng)Saposhnikoviadivaricate(Turcz.)Schischk.未抽花莖植株的干燥根，味辛、甘，性微溫，歸膀胱、肝、脾經(jīng)，具有祛風(fēng)解表、勝濕止痛、止痙的作用[2]。防風(fēng)用藥歷史悠久，《神農(nóng)本草經(jīng)》中列為上品，具有“風(fēng)藥中之潤劑”的美譽(yù)，主治感冒頭痛、風(fēng)濕痹痛、風(fēng)疹瘙癢、破傷風(fēng)等癥。同時(shí)防風(fēng)也是臨床常用的大宗藥材之一。2018年國家中醫(yī)藥管理局公布的《經(jīng)典名方目錄100首(第一批)》中含防風(fēng)的經(jīng)典名方就有10首，包括桂枝芍藥知母湯、羌活勝濕湯、三痹湯等。此外，中成藥大品種如玉屏風(fēng)顆粒、防風(fēng)通圣丸等的主要原料也是防風(fēng)?，F(xiàn)代對(duì)防風(fēng)的化學(xué)成分和藥理作用研究較多[3-6]，其主要含有色原酮類、揮發(fā)油類、香豆素類、多糖類等化學(xué)成分，具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、解熱、抗炎、提高免疫力、抗腫瘤等顯著的藥理活性。對(duì)影響防風(fēng)質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)——貯藏和包裝卻未見文獻(xiàn)報(bào)道。本文以防風(fēng)飲片為研究對(duì)象，以目前常用且符合藥用標(biāo)準(zhǔn)的聚乙烯塑料袋、鋁塑復(fù)合袋和牛皮淋膜紙袋等材料采用真空與非真空兩種方式包裝，置于陰涼和高溫高濕兩種不同貯藏條件下，參考2015年版《中華人民共和國藥典》中“原料藥物與制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則”進(jìn)行防風(fēng)飲片穩(wěn)定性研究，探討防風(fēng)飲片適宜的包裝材料、包裝方式、貯藏條件并暫定保質(zhì)期，以期為市場上的防風(fēng)飲片的包裝貯藏提供參考。

1 材料

1.1 儀器

Waterse2695型高效液相色譜儀；XS205DU型電子天平[梅特勒-托利多國際貿(mào)易(上海)有限公司]；Milli-Q超純水儀(德國密理博)；KQ-500DE型數(shù)控超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；Labonce-250GS穩(wěn)定箱(北京蘭貝石恒溫技術(shù)有限公司)。

1.2 試藥

升麻素苷(中國食品藥品檢定研究院，純度：96.2%，批號(hào)：111522-201712)；5-O-甲基維斯阿米醇苷(中國食品藥品檢定研究院，純度：96.1%，批號(hào)：111523-201610)；甲醇(色譜級(jí))；其他試劑均為分析純。

包裝材料：聚乙烯塑料袋、鋁塑復(fù)合袋、牛皮淋膜紙袋；防風(fēng)飲片(北京華邈藥業(yè)有限公司，批號(hào)：D1705012)。

2 方法

2.1 防風(fēng)飲片處理

防風(fēng)飲片樣品分別采用聚乙烯塑料袋包裝(簡稱S)、鋁塑復(fù)合袋包裝(簡稱L)、牛皮淋膜紙袋包裝(簡稱N)，每袋200 g，并且分別采用真空(牛皮淋膜紙袋不能抽真空除外)和非真空方式。將上述不同包裝的樣品分為A、B兩組，A組置于藥品穩(wěn)定性試驗(yàn)箱中[溫度：(40±2)℃、相對(duì)濕度：(75±5)%]貯藏；B組置于北京華邈藥業(yè)有限公司陰涼庫中(溫度≤20 ℃，相對(duì)濕度：45%～75%)貯藏。A組分別在貯藏時(shí)間0、1、2、3、6個(gè)月的月末取樣，B組在貯藏時(shí)間0、3、6個(gè)月的月末取樣，分別評(píng)價(jià)防風(fēng)飲片質(zhì)量。樣品信息見表1。

2.2 指標(biāo)測(cè)定

2.2.1 外觀性狀檢查 將表1中FF00～FF30樣品分別在對(duì)應(yīng)的儲(chǔ)藏時(shí)間取出，進(jìn)行性狀檢查并拍照記錄，性狀檢查重點(diǎn)包括外表面/斷面顏色、質(zhì)地、氣味、霉變、蟲蛀等項(xiàng)目。

2.2.2 內(nèi)在指標(biāo)測(cè)定 水分、升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷的總量、浸出物等指標(biāo)測(cè)定均依據(jù)2015年版《中華人民共和國藥典》方法。

表1 防風(fēng)飲片包裝材料、貯藏方式、貯藏條件及時(shí)間

3 結(jié)果與分析

3.1 外觀性狀方面

6個(gè)月內(nèi)，A組和B組樣品的外觀性狀都發(fā)生明顯變化，并且A組樣品的性狀變化較B組嚴(yán)重，A、B兩組均未見蟲蛀現(xiàn)象。見圖1。

3.1.1 A組 貯藏1個(gè)月時(shí)，與0個(gè)月的樣品相比，僅牛皮淋膜紙袋樣品出現(xiàn)顏色變深、變軟的現(xiàn)象。貯藏2個(gè)月時(shí)，塑料袋、真空塑料袋、牛皮淋膜紙袋樣品外表皮均呈灰褐色、斷面發(fā)黑、質(zhì)地較軟、特異氣味散失，牛皮淋膜紙袋內(nèi)的樣品尤為明顯；鋁塑復(fù)合膜袋和真空鋁塑復(fù)合膜袋內(nèi)樣品性狀無明顯的變化。貯藏3個(gè)月時(shí)，塑料袋、真空塑料袋、牛皮淋膜紙袋樣品泛黑嚴(yán)重，塑料袋和真空塑料袋包裝的樣品，僅見個(gè)別斷面木部呈黃色，牛皮淋膜紙袋樣品斷面均呈黑色；鋁塑和真空鋁塑包裝的樣品無明顯變化。貯藏6個(gè)月時(shí)，塑料袋、真空塑料袋、牛皮淋膜紙袋樣品均變黑，斷面無黃色木心；塑料袋和牛皮淋膜紙袋吸水明顯嚴(yán)重，質(zhì)地較軟；鋁塑袋和真空鋁塑袋部分樣品外表皮呈灰褐色，斷面變黑，但樣品依舊干燥。

3.1.2 B組 貯藏3個(gè)月時(shí)，牛皮淋膜紙袋內(nèi)樣品出現(xiàn)吸潮變軟現(xiàn)象，至6個(gè)月時(shí)，部分樣品外表皮呈現(xiàn)灰褐色。其余包裝各時(shí)間點(diǎn)性狀無明顯變化。在B組試驗(yàn)過程中，發(fā)現(xiàn)一個(gè)有趣的現(xiàn)象，在貯藏6個(gè)月時(shí)，真空鋁塑袋樣品結(jié)塊，如圖1中B-6-ZL所示，并且樣品表面出現(xiàn)明亮的顆粒狀結(jié)晶。

注：A.加速穩(wěn)定性試驗(yàn)；B.常溫穩(wěn)定性試驗(yàn)；S.塑料非真空包裝；ZS.塑料真空包裝；N.牛皮淋膜紙袋；L.鋁塑非真空包裝；ZL.鋁塑真空包裝。圖1 樣品性狀變化

3.2 內(nèi)在指標(biāo)

A組和B組各時(shí)間點(diǎn)各包裝測(cè)定的內(nèi)在指標(biāo)含量見表2，包括水分、升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷的總量、浸出物等。從數(shù)據(jù)可知，水分除0個(gè)月外，其余均超過《中華人民共和國藥典》不得過10.0%的含量標(biāo)準(zhǔn)；指標(biāo)成分總量除FF-13、FF-19低于《中華人民共和國藥典》含量標(biāo)準(zhǔn)外，其余均符合《中華人民共和國藥典》含量標(biāo)準(zhǔn)；浸出物均遠(yuǎn)高于《中華人民共和國藥典》標(biāo)準(zhǔn)。

表2 內(nèi)在指標(biāo)測(cè)定結(jié)果 %

3.2.1 不同貯藏條件和包裝對(duì)樣品水分的影響 不同貯藏條件和包裝情況下，A組和B組樣品水分均呈增加趨勢(shì)，并且A組貯藏1個(gè)月以上的樣品和B組貯藏3個(gè)月以上的樣品，其水分均超過《中華人民共和國藥典》不得過10.0%的含量標(biāo)準(zhǔn)，為不合格水分，見圖2。但不同的是，A組水分變化明顯快于B組，尤其是塑料袋包裝和牛皮淋膜紙袋包裝，從貯藏1個(gè)月起，其樣品水分快速增加并始終處于高位狀態(tài)，至6個(gè)月時(shí)，分別達(dá)21.0%和26.1%，其余包裝變化較平緩。而B組除牛皮淋膜紙袋樣品波動(dòng)較大外(0～3個(gè)月水分先升高，3～6個(gè)月后下降)，其余包裝樣品水分變化平緩且趨于一致。B組牛皮淋膜紙袋樣品在貯藏3個(gè)月水分升高原因是恰逢當(dāng)年的7月份，空氣中相對(duì)濕度較大，牛皮淋膜紙袋阻濕性能較差，因此，出現(xiàn)水分急劇升高后下降的趨勢(shì)。從A組和B組試驗(yàn)中可以得出，防風(fēng)飲片的水分受貯藏條件和包裝的影響較大，即使是陰涼條件，貯藏時(shí)間不到3個(gè)月，其水分均超過《中華人民共和國藥典》標(biāo)準(zhǔn)。用牛皮淋膜紙袋包裝，樣品水分容易受到環(huán)境中相對(duì)濕度的影響。

注：A.加速穩(wěn)定性試驗(yàn)；B.常溫穩(wěn)定性試驗(yàn)。圖2 不同貯藏條件和包裝的樣品水分變化

3.2.2 不同貯藏條件和包裝對(duì)樣品指標(biāo)成分含量的影響 依據(jù)《中華人民共和國藥典》，以升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷的總量為指標(biāo)成分，探討不同貯藏條件和包裝對(duì)防風(fēng)飲片質(zhì)量的影響。從圖3可知，A組指標(biāo)成分總量呈大幅波動(dòng)變化，B組變化相對(duì)平緩，并且A組指標(biāo)成分總量降低幅度較大，說明貯藏條件對(duì)指標(biāo)成分總量影響較大。同時(shí)，A組中真空復(fù)合鋁塑袋包裝、鋁塑袋包裝和真空塑料袋包裝內(nèi)的樣品指標(biāo)成分總量與其他包裝相比，變化波動(dòng)幅度較大。而B組中，除牛皮淋膜紙袋包裝的樣品指標(biāo)成分總量稍有升高外，其余均稍微降低，但5種包裝均在貯藏3個(gè)月后，指標(biāo)成分總量基本保持穩(wěn)定。除A組真空鋁塑復(fù)合袋的樣品指標(biāo)成分稍低于《中華人民共和國藥典》含量標(biāo)準(zhǔn)外，其他包裝指標(biāo)成分總量均在《中華人民共和國藥典》規(guī)定的不得少于0.24%以上。

注：A.加速穩(wěn)定性試驗(yàn)；B.常溫穩(wěn)定性試驗(yàn)。圖3 不同貯藏條件和包裝的樣品含量變化

3.2.3 不同貯藏條件和包裝對(duì)樣品浸出物的影響 浸出物的變化趨勢(shì)和指標(biāo)成分總量的變化趨勢(shì)相同，表現(xiàn)為高溫高濕條件下各包裝樣品浸出物呈波動(dòng)變化且幅度較大，如圖4A所示；而陰涼條件下各包裝樣品浸出物變化相對(duì)平緩，如圖4B所示。并且不同的是：A組各包裝樣品的浸出物均呈下降趨勢(shì)，尤其是塑料袋包裝和牛皮淋膜紙袋包裝的樣品；B組各包裝樣品的浸出物稍呈增加趨勢(shì)，除真空塑料袋包裝的樣品變化幅度較大外，其余樣品在貯藏3個(gè)月后基本保持穩(wěn)定。

注：A.加速穩(wěn)定性試驗(yàn)；B.常溫穩(wěn)定性試驗(yàn)。圖4 不同貯藏條件和包裝的樣品浸出物變化

3.3 貯藏條件的確定

結(jié)合A、B兩組結(jié)果，綜合考慮可知，貯藏條件對(duì)防風(fēng)飲片質(zhì)量的影響大于包裝。因此，在實(shí)際貯藏過程中，應(yīng)嚴(yán)格控制環(huán)境中的溫濕度，置于陰涼干燥處貯藏，與《中華人民共和國藥典》一致。包裝方面，發(fā)現(xiàn)真空包裝方式在指標(biāo)成分總量和浸出物方面變化幅度較大，并且樣品容易結(jié)塊，出現(xiàn)析晶現(xiàn)象，因此，建議采用非真空方式，塑料袋非真空、牛皮淋膜紙袋、鋁塑復(fù)合袋非真空均可，尤以鋁塑復(fù)合袋非真空最佳。因?yàn)榉里L(fēng)很容易吸潮發(fā)生變質(zhì)，鋁塑復(fù)合袋阻濕性能較好，能相對(duì)延長保質(zhì)期。根據(jù)上述結(jié)果，從嚴(yán)把控質(zhì)量，防風(fēng)飲片保質(zhì)期暫定為1年，后期根據(jù)陰涼庫長期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行修正。

4 討論

4.1 穩(wěn)定性試驗(yàn)條件選擇

本研究陰涼穩(wěn)定性試驗(yàn)借助北京華邈藥業(yè)有限公司的倉庫開展，實(shí)際控制溫濕度較恒定，全年控制在15～20 ℃，濕度45%～70%，其貯藏條件與實(shí)際中藥飲片貯藏一致，所得結(jié)果能為防風(fēng)飲片的包裝貯藏提供參考。加速試驗(yàn)參照《中華人民共和國藥典》“原料藥物與制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則”進(jìn)行，所以選擇溫度(40±2)℃，相對(duì)濕度75%±5%，為期6個(gè)月的試驗(yàn)。

4.2 保質(zhì)期確認(rèn)

中藥材保質(zhì)期的確定是一個(gè)值得深入研究和探討的問題。目前中藥飲片企業(yè)生產(chǎn)的飲片保質(zhì)期均暫定為3年。3年是否合適，值得研究。防風(fēng)易吸潮且含揮發(fā)油，是一種對(duì)包裝和倉儲(chǔ)條件有較高要求的飲片。在B組(陰涼條件下)，發(fā)現(xiàn)6個(gè)月牛皮淋膜紙袋的部分防風(fēng)樣品性狀發(fā)生變化，其他包裝的飲片無明顯變化。為了盡好保存飲片并與實(shí)際結(jié)合，故暫定1年，后期根據(jù)長期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行修正。當(dāng)然，在包裝和貯藏條件恰當(dāng)?shù)那闆r下，如鋁塑袋包裝、冷處貯藏等，防風(fēng)的保質(zhì)期可以根據(jù)實(shí)際情況延長。

4.3 重視中藥材/飲片的水分

水分與質(zhì)量的關(guān)系在食品領(lǐng)域研究較多[7-9]，表明水分是食品安全、質(zhì)量維持的關(guān)鍵因素。中藥材/飲片也有水分的規(guī)定，《中國人民共和國藥典》將其列為檢查項(xiàng)，作為質(zhì)量控制的重要指標(biāo)之一?？梢娝质怯绊懼兴庂|(zhì)量的重要因素，尤其在貯藏環(huán)節(jié)。相關(guān)文獻(xiàn)[10]闡述了中藥倉儲(chǔ)過程中其含水量與霉變、蟲害、潮解、軟化、走味、質(zhì)變等的關(guān)系，并著重表明水分是做好中藥倉儲(chǔ)養(yǎng)護(hù)的關(guān)鍵。本文通過防風(fēng)飲片貯藏過程水分的劇烈升高和其外觀質(zhì)量發(fā)生的明顯變化再次證明了水分是中藥貯藏過程中質(zhì)量影響的關(guān)鍵因素。因此，建議中藥貯藏過程中嚴(yán)格控制好水分，包括中藥入庫前的水分和貯藏環(huán)境中的水分。同時(shí)，希望研究人員加強(qiáng)水分與中藥質(zhì)量方面的研究，為中藥質(zhì)量維持和貯藏提供科學(xué)的方法。

4.4 貯藏條件和包裝的比較

從研究結(jié)果可以直觀地看出，貯藏條件對(duì)防風(fēng)飲片質(zhì)量的影響大于包裝的影響。高溫高濕條件下，即A組，飲片性狀的改變明顯，水分增加較快，指標(biāo)成分總量和浸出物均呈大幅度波動(dòng)變化。陰涼條件下，即B組，飲片的性狀、水分、指標(biāo)成分總量和浸出物均緩慢變化且相對(duì)平穩(wěn)。因此，貯藏條件(溫度、濕度)對(duì)防風(fēng)飲片質(zhì)量影響較大，應(yīng)嚴(yán)格控制溫度、濕度的變化。在實(shí)踐中，可采用陰涼貯藏，并控制貯藏環(huán)境濕度在55%以內(nèi)較適宜，同時(shí)密切關(guān)注防風(fēng)飲片水分含量，如條件允許，可考慮放置冷庫貯藏。包裝方面，包裝對(duì)飲片質(zhì)量的影響從小到大依次為：鋁塑復(fù)合袋、塑料袋真空、塑料袋、牛皮淋膜紙袋。因此，實(shí)際應(yīng)用中，建議防風(fēng)飲片盡可能選用阻濕性能強(qiáng)的材料包裝，如鋁塑復(fù)合材料，以維持飲片質(zhì)量。

4.5 析晶的推測(cè)

6個(gè)月時(shí)，B組真空鋁塑復(fù)合膜袋內(nèi)的防風(fēng)飲片結(jié)塊，表面出現(xiàn)了很多的晶塊。筆者推測(cè)，這些晶塊可能是多糖類物質(zhì)。因?yàn)榉里L(fēng)多糖含量較高，最低也有1.6%[11]，在結(jié)塊(產(chǎn)生內(nèi)熱)和溫度(低溫)的作用下，有利于多糖的析出，從而在表面結(jié)晶。防風(fēng)多糖具有抗氧化[12]、預(yù)防骨質(zhì)疏松[13]、免疫調(diào)節(jié)[14]等作用，并且缺少會(huì)影響防風(fēng)的整體藥效[15]?？梢娬婵珍X塑復(fù)合袋包裝不適合防風(fēng)飲片，樣品易結(jié)塊，多糖析出。

4.6 呼吁重視中藥飲片的包裝和貯藏

中藥飲片的包裝和貯藏一直是行業(yè)被忽略的過程，相關(guān)學(xué)術(shù)研究也較少，實(shí)際應(yīng)用也單一。在包裝方面，為控制成本，北方基本上是用牛皮淋膜紙袋，南方則大多采用聚乙烯塑料袋；在貯藏方面，正規(guī)倉儲(chǔ)可以控溫控濕，無條件的則相當(dāng)簡陋。筆者認(rèn)為，中藥的包裝和貯藏有很多值得深入研究的事情：包裝方面，可考慮增加中醫(yī)藥元素，讓包裝符合中醫(yī)藥特點(diǎn)，同時(shí)注重綠色環(huán)保且具功能的包裝材料的研究和開發(fā)；在倉儲(chǔ)方面，建議分類貯藏養(yǎng)護(hù)[16]，借鑒食品行業(yè)，追求科學(xué)、合理、智能化的貯藏設(shè)施。