中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)在自身免疫病中的作用的研究進(jìn)展

林怡君 李碩峰 李 傲

華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 河北唐山 063000

中性粒細(xì)胞是體內(nèi)先天性先天免疫的重要組成部分，占人體總白細(xì)胞的50%至70%，它是免疫防御系統(tǒng)中非常重要的防線。通過(guò)吞噬和脫顆粒等機(jī)制,在固有免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。2004年Brinkmann 等[1]首次發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)（neutrophil extracellular traps,NETs），是從中性粒細(xì)胞中分泌出的由顆粒組分組裝而成的纖維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。其主要成分為組蛋白、高度解離染色質(zhì)纖維、彈性蛋白酶以及髓過(guò)氧化物酶(MPO)等酶類。有研究發(fā)現(xiàn)，NETs與許多自身免疫疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus,SLE）、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RheumatoId ArthrItIs,RA）、小血管炎等關(guān)系密切，是系統(tǒng)自身免疫疾病發(fā)病機(jī)制中的主要參與者。深入了解自身免疫疾病中導(dǎo)致NETosis 觸發(fā)的機(jī)制和細(xì)胞內(nèi)在通路，對(duì)于了解其在各種疾病中的治療提供策略具有重要意義。

1 NETs的基本組成

NETs具有獨(dú)特的超微結(jié)構(gòu)，其骨架由直徑約為15-17nm 的核小體組成的染色質(zhì)形成。骨架上點(diǎn)綴著直徑約為50nm 的球狀結(jié)構(gòu)，是顆粒蛋白和其他細(xì)胞間隔，為NETs發(fā)揮生物學(xué)作用提供結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。NETs內(nèi)含組蛋白、多種顆粒蛋白和某些胞漿蛋白等具有殺菌作用的蛋白，包括髓過(guò)氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）、組織蛋白酶G（cathepsin G,CTSG）、彈性蛋白酶（neutrophil elastase,NE）、抗菌肽LL-37、乳鐵蛋白酶以及屬金屬蛋白酶9（MMP-9）等。只用脫氧核糖核酸酶（DNase）而無(wú)需用蛋白水解酶即使NETs分解，說(shuō)明DNA 是NETs的主要成分。

2 NETs與自身免疫疾病

2.1 NETs與系統(tǒng)性紅斑狼瘡

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）是一種復(fù)雜的自身免疫疾病，其特點(diǎn)是自身抗體分泌過(guò)多，累及多個(gè)器官。SLE 患者血清中自身抗體水平含量較高，如抗DNA 抗體、抗核糖體蛋白等，多以NET 成分為靶點(diǎn)。此外，在SLE 患者和狼瘡易感小鼠的皮膚和腎臟中發(fā)現(xiàn)NETs凈沉積水平增高[2]。當(dāng)NETs不能有效降解時(shí)，會(huì)具有一定致病性。在SLE 患者中，NETs和其他凋亡物質(zhì)降解程度與狼瘡性腎炎嚴(yán)重程度相關(guān)。而異常數(shù)量的NETs產(chǎn)生自身抗原和自身抗體，并在SLE 患者中產(chǎn)生持續(xù)損傷，直接參與SLE 疾病的發(fā)生發(fā)展[3]。由于存在能夠阻斷DNase1 進(jìn)入NETs的DNase 抑制劑，SLE 患者表現(xiàn)出降解NETs的能力下降。且研究表明，SLE 誘導(dǎo)產(chǎn)生NETs的過(guò)程不依賴于NADPH 氧化酶。

2.2 NETs與ANCA 相關(guān)性血管炎

抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體（anti-neutrophil cytoplasmic antibodies）相關(guān)性血管炎（ANCA-associated vasculitis，AAV）是一種以免疫沉積和ANCAs 存在為特征的小血管炎亞群，包括鏡下多血管炎(microscopic polyangiitis,MPA)、肉芽腫性多血管炎(Granulomatosis with Polyangiitis,GPA)、嗜酸性肉芽腫性多血管炎（Eosinophil Granulomatosis with Polyangiitis,EGPA) 三種疾病。由于缺乏caspase 活化的DNase（CAD），巨噬細(xì)胞有缺陷的狼瘡乙肝小鼠抗DNA 抗體水平較高。血栓形成是ANCA 合并血管炎的常見(jiàn)并發(fā)癥之一。

2.3 NETs與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Rheumatoid Arthritis,RA）一種慢性自身免疫性疾病，已知NETosis 可以加速RA 患者中自身抗原的修飾和自身抗原的暴露。在RA 中的NETosis 模型中，自身抗體如類風(fēng)濕因子（RF）、ACPAs、炎性細(xì)胞因子（IL-17A,TNF-α,和 IL-8）、成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞和B 細(xì)胞被認(rèn)為是RA 中增強(qiáng)NETosis 的潛在刺激，主要造成關(guān)節(jié)損傷和自身抗體形成。以滑膜關(guān)節(jié)炎癥和自身產(chǎn)生瓜氨酸化蛋白抗原抗體(ACPAs)為特征,而研究表明，瓜氨酸抗原主要來(lái)源于NETs。此外，RA 患者外周血、滑膜液、類風(fēng)濕結(jié)節(jié)、皮膚中網(wǎng)狀物增多，NETs含量與ACPA 含量呈正相關(guān)[4]。

3 小結(jié)

綜上所述，NETosis 是中性粒細(xì)胞死亡的一種特異性形式，越來(lái)越多的證據(jù)表明，NETosis 在自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制和發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。此外，NETs的組成部分很可能成為疾病活動(dòng)、診斷或自身免疫性疾病治療靶點(diǎn)的新的生物標(biāo)志物候選。