胸腹水細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化在病理診斷中的應(yīng)用價(jià)值

魏來

胸腹腔積液在臨床中較為常見,可以由炎癥、腫瘤等多種因素導(dǎo)致。臨床導(dǎo)致胸腹腔積液的疾病眾多,發(fā)病機(jī)制各異。胸腹腔積液的檢查對(duì)于良性、惡性疾病的診斷治療具有十分重要的意義［1］。臨床明確胸腹腔積液性質(zhì)對(duì)于疾病治療具有較大影響,因此需要引起足夠重視［2］。胸腹水脫落細(xì)胞學(xué)檢查雖然是臨床重要的診斷方法,但無法提供準(zhǔn)確的病理診斷。近年來,臨床常利用胸腹水細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化技術(shù)提高診斷準(zhǔn)確性,進(jìn)而有效評(píng)估疾病嚴(yán)重程度。本研究選擇本院2019年1～12月收治的250份臨床送檢胸腹水標(biāo)本,對(duì)標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化和HE染色檢查,探討臨床病理診斷中的胸腹水細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化的應(yīng)用,報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1材料來源 納入本院2019年1～12月收治的250份臨床送檢的胸腹水標(biāo)本,標(biāo)本對(duì)應(yīng)患者中男142例,女108例；年齡37～79歲,平均年齡(56.2±7.6)歲。

1.2納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者臨床上因各種原因?qū)е滦馗骨环e液需要進(jìn)行胸腹水檢查,病歷完整；②患者簽署本研究知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重精神障礙性疾病的患者；②妊娠期或哺乳期女性患者；③合并嚴(yán)重心肺功能障礙的患者。

1.3方法 對(duì)納入的所有胸腹水標(biāo)本進(jìn)行液基細(xì)胞學(xué)檢查,將檢查結(jié)果中疑似存在腫瘤細(xì)胞的50份標(biāo)本進(jìn)行細(xì)胞塊以及切片制作,對(duì)切片進(jìn)行HE常規(guī)染色、細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化染色。

細(xì)胞沉渣切片制作方法為將疑似惡性胸腹腔積液的標(biāo)本裝于離心管中差速離心10 min并用吸管吸取上清液。在離心管加入20 ml的10% 中性福爾馬林并使用震蕩儀震蕩后再次離心10 min,棄去上清液將沉淀物用鑷子取出,使用擦鏡紙將沉淀物包裝,隨后進(jìn)行透明、脫水、浸蠟、包埋、切片、染色等操作。對(duì)于血性成分較多的胸腹水標(biāo)本可以加入20 ml 乙醇與冰醋酸的混合液充分混合再進(jìn)行離心。

細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化染色嚴(yán)格按照試劑說明書的相關(guān)規(guī)定進(jìn)行,檢測CK7、CEA、Calretinin、WT-1等相關(guān)分子的表達(dá)。

1.4觀察指標(biāo) 觀察分析標(biāo)本病理結(jié)果；對(duì)比兩種方法檢測陽性率；并比較腺癌和惡性間皮瘤CK7、CEA、Calretinin、WT-1抗體表達(dá)陽性情況。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1標(biāo)本病理結(jié)果分析 250份臨床送檢的胸腹水標(biāo)本,其中50份疑似腫瘤性胸腹腔積液標(biāo)本,包括27份腺癌,8份鱗狀細(xì)胞癌,5份小細(xì)胞癌,4份反應(yīng)性間皮細(xì)胞,6份惡性間皮瘤。

2.2兩種方法檢測陽性率比較 細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化檢測的陽性率為100.00%(50/50),高于HE染色檢測的68.00%(34/50),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=19.05,P＜0.05)。

2.3腺癌和惡性間皮瘤CK7、CEA、Calretinin、WT-1抗體表達(dá)陽性情況比較 腺癌和惡性間皮瘤的WT-1抗體表達(dá)陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；腺癌的CK7、CEA抗體表達(dá)陽性率高于惡性間皮瘤,Calretinin抗體表達(dá)陽性率低于惡性間皮瘤,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 腺癌和惡性間皮瘤CK7、CEA、Calretinin、WT-1抗體陽性表達(dá)情況比較［n(%)］

3 討論

胸腹腔積液是有多種疾病導(dǎo)致的胸部、腹部液體滲出并在局部腔隙中聚集導(dǎo)致的疾病,主要由于液體吸收和形成不平衡導(dǎo)致［3］。胸腹腔積液根據(jù)積液形成的原因不同分為滲出性胸腔積液以及漏出性胸腔積液兩種［4］。滲出性胸腔積液通過增加局部血管的滲透性或者局部組織的滲透情況而導(dǎo)致胸腹腔積液,腫瘤性胸腔積液主要由腫瘤細(xì)胞侵犯局部組織導(dǎo)致組織間隙擴(kuò)大或失去原有分子屏障,從而導(dǎo)致胸腹腔積液［5］。

胸腹水細(xì)胞學(xué)檢查是臨床檢測胸腹腔積液性質(zhì)的重要檢測方法,通過檢測胸腹水中相關(guān)細(xì)胞的比例組成情況有利于疾病的準(zhǔn)確診斷［6］。胸腹水細(xì)胞學(xué)檢查方法簡便、檢測迅速、經(jīng)濟(jì)有效,具有重要的臨床價(jià)值。炎性、惡性胸腹水的鑒別診斷是臨床重要的研究熱點(diǎn),對(duì)于后續(xù)疾病治療方案的制定具有決定性的意義。細(xì)胞塊切片與細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化聯(lián)合用于胸腹水的檢測有利于提高診斷的陽性率。臨床檢驗(yàn)的過程中通過對(duì)細(xì)胞沉渣石蠟進(jìn)行石蠟包埋、連續(xù)切片可以制作高效的標(biāo)本［7］。石蠟包埋有利于避免涂片過厚導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)不清晰、細(xì)胞重疊、細(xì)胞成團(tuán)等情況,從而輔助檢驗(yàn)科工作人員快速診斷［8］。胸腹水沉渣蠟塊可以進(jìn)行反復(fù)切片,有利于進(jìn)行細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化染色、原位核酸分子雜交染色等多種檢測過程,提高臨床整體檢測效果［9］。

本研究探討臨床病理診斷中的胸腹水細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化的應(yīng)用。結(jié)果表明,250份臨床送檢的胸腹水標(biāo)本,其中50份疑似腫瘤性胸腹腔積液標(biāo)本,包括27份腺癌,8份鱗狀細(xì)胞癌,5份小細(xì)胞癌,4份反應(yīng)性間皮細(xì)胞,6份惡性間皮瘤。細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化檢測的陽性率為100.00%(50/50),高于HE染色檢測的68.00%(34/50),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=19.05,P＜0.05)。腺癌和惡性間皮瘤的WT-1抗體表達(dá)陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；腺癌的CK7、CEA抗體表達(dá)陽性率高于惡性間皮瘤,Calretinin抗體表達(dá)陽性率低于惡性間皮瘤,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)合研究結(jié)果進(jìn)一步分析,細(xì)胞學(xué)涂片檢查是胸腹腔積液的重要檢查手段,對(duì)于胸腹水具有一定的檢測意義,但總體上檢測靈敏度低。本研究中細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化相比之下優(yōu)勢明顯,檢測陽性率更高,檢測更加靈敏。常規(guī)細(xì)胞涂片染色的方法難以區(qū)分轉(zhuǎn)移性癌癥和原發(fā)性惡性間皮瘤的胸腹水細(xì)胞學(xué)形態(tài),染色定位不夠準(zhǔn)確,很難分辨疾病類型［10］。細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化的方法主要通過二次離心分離技術(shù)獲取細(xì)胞沉渣,并進(jìn)一步強(qiáng)化胸腹水標(biāo)本的脫水、石蠟包埋、切片等操作,從而一定程度上提高臨床檢測的準(zhǔn)確性。胸腹水腫CK7、CR、TIF-1、CEA、Villin、EMA、Vim 等相關(guān)分子的表達(dá)在不同類型的疾病中存在一定的差異［11］。結(jié)合本研究結(jié)果腺癌和惡性間皮瘤的分子表達(dá)情況具有明顯的差別,分子表達(dá)的情況可以作為細(xì)胞塊切片和常規(guī)切片的重要差異對(duì)比項(xiàng)目,是細(xì)胞塊切片的優(yōu)勢所在。雖然常規(guī)細(xì)胞涂片結(jié)合細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化的方法一定程度上也可以顯示相關(guān)分子蛋白的表達(dá)情況,但細(xì)胞塊切片的顯示結(jié)果更加明顯［12］,顯示差異更方便臨床觀察。常規(guī)胸腹水脫落細(xì)胞學(xué)涂片檢查雖然對(duì)于典型的細(xì)胞可以準(zhǔn)確診斷,但由于陽性率較低容易出現(xiàn)疾病的誤診、漏診情況,尤其對(duì)于退變的間皮細(xì)胞、炎性胸腹水增生等難以和惡性細(xì)胞相互區(qū)分,不利于臨床準(zhǔn)確診斷?？傮w上,細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化的方法是對(duì)于傳統(tǒng)細(xì)胞涂片方法的重要補(bǔ)充,是具有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值的檢測項(xiàng)目。

綜上所述,胸腹水積液的性質(zhì)對(duì)于后續(xù)臨床方案的制定以及預(yù)后評(píng)估意義重大,胸腹水細(xì)胞塊切片結(jié)合免疫組化應(yīng)用對(duì)于病理診斷具有明顯的價(jià)值,檢測方法快速、便捷,有利于提高腫瘤細(xì)胞診斷的陽性率,明確原發(fā)疾病類型,值得臨床推廣使用。