浙貝母治療白血病的研究進展

祁愛風(fēng) 梁平書 王璐 劉素芳 白雪艷 霍萌 封若雨 邢峰麗

浙貝母，為中國傳統(tǒng)大宗中藥材之一，是浙江的道地藥材，被列為“浙八味”之一，其性苦寒，苦泄寒潤，善于開泄，歸肺、心經(jīng)，中醫(yī)學(xué)認為其具有清熱化痰、止咳平喘、散結(jié)解毒、消腫消癰等作用。近年來，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)通過對浙貝母化學(xué)成分的研究，發(fā)現(xiàn)其有效成分主要是生物堿、總皂苷和多糖，其中生物堿包含了浙貝甲素、浙貝乙素、浙貝丙素、浙貝寧、浙貝酮、貝母辛、貝母新堿、植物甾醇、膽堿、去氫鄂貝啶堿、西貝素、異貝母素甲等[1-2]?？傇碥瞻阖悓庈?、西貝素苷、貝母堿苷、貝母素甲苷、平貝堿苷、伊貝堿苷A等成分[3]。浙貝母具有抗腫瘤活性，臨床多應(yīng)用于白血病的治療，浙貝母可以誘導(dǎo)白血病細胞凋亡，逆轉(zhuǎn)白血病多藥耐藥，增加白血病細胞內(nèi)抗癌藥物濃度，增強機體免疫力，減少毒副反應(yīng)，能夠提高患者的生活質(zhì)量。本文查閱相關(guān)研究文章，從浙貝母治療白血病方面對其研究進展進行如下概述。

1 誘導(dǎo)白血病細胞凋亡

細胞凋亡是由細胞凋亡基因控制，是細胞選擇自主性死亡的一種程序，而白血病發(fā)病的一個重要原因就是細胞異常凋亡。浙貝母可通過促進細胞凋亡來發(fā)揮抗腫瘤的效應(yīng)，其主要活性成分之一的貝母素甲的抗腫瘤作用受到關(guān)注[4]。

張宇等[5]通過選用高表達人白血病干細胞特異性抗原的人急性髓系白血病細胞系KG-la作為研究對象，研究得出貝母甲素能夠抑制具有LSCs特征的KG-la細胞的繁殖，但是對KG-la細胞的抑制作用只有濃度依賴性，而無明顯的藥物作用時間相關(guān)性。從細胞周期角度來說，貝母素甲通過升高G2/M期細胞比例，降低G0/G1期細胞比例來誘導(dǎo)KG-la細胞凋亡，可以提高KG-la細胞晚期凋亡率以及總凋亡率，對早期凋亡卻無明顯的影響。因此，筆者認為貝母素甲可以通過抑制白血病細胞的增值以及加速細胞凋亡來發(fā)揮治療白血病的作用。還有實驗研究，以人白血病細胞株K562為對象，通過MMT檢測發(fā)現(xiàn)貝母素甲對白血病K562細胞的抑制同樣具有濃度依賴性，當(dāng)IC50達到238 μg/mL時，貝母素甲能夠致使K562細胞的氧化—還原狀態(tài)失衡，能夠明顯的抑制K5622/A02細胞活力，加速細胞內(nèi)谷胱甘肽的消耗，使谷胱甘肽含量下降，從而引發(fā)細胞內(nèi)活氧性上升，抑制其細胞的增值。而細胞內(nèi)谷胱甘肽含量的下降常伴隨細胞凋亡率的上升，從而加速誘導(dǎo)細胞凋亡，達到殺死白血病細胞目的[6-8]。鄭智等[9]通過研究證實，復(fù)方浙貝顆粒聯(lián)合阿奇霉素可以下調(diào)白血病細胞移植瘤組織細胞中谷胱甘肽的含量，抵抗抗氧化酶的表達，誘導(dǎo)白血病細胞凋亡，提高難治性白血病的臨床緩解率。

綜上，細胞活氧化及谷胱甘肽含量在白血病細胞的繁殖與凋亡中占據(jù)重要地位，而浙貝母的有效成分貝母素甲達到一定濃度后可以影響二者在細胞中的作用，因此，筆者認為針對貝母素甲對此二者的作用及作用機制有必要進行深入的研究，而對于浙貝母其他有效成分是否具有同樣的作用也值得進一步探討，以提高浙貝母治療白血病的臨床效果。

2 逆轉(zhuǎn)白血病多藥耐藥

腫瘤細胞的多藥耐藥現(xiàn)象導(dǎo)致化療藥物不能夠完全有效的殺死腫瘤細胞，是臨床導(dǎo)致白血病患者死亡的主要原因，也是白血病治療失敗的重要原因之一。

現(xiàn)代大量研究證實，P-糖蛋白、脂蛋白受體相關(guān)蛋白(lipoprotein receptor-related protein，LRP)、乳腺癌耐藥蛋白(breast cancer resistance protein，BCRP)、多藥耐藥相關(guān)蛋白1(multidrug resistance-related protein，MRP1)能夠介導(dǎo)各種抗腫瘤藥物的耐藥轉(zhuǎn)運，這些介導(dǎo)因子的表達水平都與白血病的耐藥、復(fù)發(fā)及預(yù)后有著密切關(guān)系[10]。浙貝母中的貝母素甲能夠抑制腫瘤細胞的生長，逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞的多藥耐藥[11]。浙貝母另一有效成分浙貝母堿可以通過下調(diào)P-糖蛋白表達，增加藥物在白血病耐藥細胞內(nèi)的堆積，從而逆轉(zhuǎn)多藥耐藥，針對“痰瘀互阻型”難治性白血病，應(yīng)用復(fù)方浙貝顆粒治療，能夠促使耐藥細胞凋亡，減少K562/A02細胞對藥物的排泄，并且能下調(diào)白血病耐藥細胞多藥耐藥相關(guān)蛋白(multidrug resistance-related protein，MRP)、B細胞淋巴瘤/白血病-2(B celllymphoma/lrukemia-2，Bcl-2)、拓撲異構(gòu)酶Ⅱ(topoisomeraseⅡ，TopoⅡ)、谷胱甘肽-π(glutathione，GSH-π)的表達，因此逆轉(zhuǎn)白血病多藥耐藥[9，12-15]。產(chǎn)生多藥耐藥的機制還有很多，除外P-糖蛋白過表達以及其對抗癌藥物的抵抗作用，細胞活氧性信號也參與其中，浙貝母生物堿可刺激K562/A02細胞產(chǎn)生活氧化，促進Caspase-3表達，誘導(dǎo)耐藥細胞凋亡[6，16-20]。齊彥等[21]進一步研究發(fā)現(xiàn)，貝母素甲也可以誘導(dǎo)細胞活氧化升高，在一個相對短的過程中可劑量依賴性的誘導(dǎo)K562/A02細胞凋亡，抑制白血病多藥耐藥細胞生長和增殖，考慮其作用機制可能是由于貝母素甲具有信號效應(yīng)，可以激活相應(yīng)信號通路而引起細胞凋亡與實現(xiàn)耐藥逆轉(zhuǎn)。

綜上所述，筆者認為浙貝母中貝母素甲和浙貝母生物堿成分主要是通過影響白血病腫瘤細胞的各種介導(dǎo)因子來實現(xiàn)逆轉(zhuǎn)多藥耐藥，其具體作用機制及藥物濃度是否具有依賴性還須進一步研究，希望可以開發(fā)浙貝母作為一種白細胞多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑來應(yīng)用于臨床。

3 增加白血病細胞內(nèi)抗癌藥物濃度

胡凱文[22]率先通過體外研究發(fā)現(xiàn)，浙貝甲素可抑制急性白血病細胞膜P-糖蛋白的表達，能夠增加細胞內(nèi)抗癌藥物濃度，提升抗癌藥物活性。隨后又進一步將浙貝母應(yīng)用于臨床研究，發(fā)現(xiàn)多藥耐藥急性白血病病人在常規(guī)化療前連續(xù)3天口服浙貝母散劑，其藥后耐藥細胞的P-糖蛋白表達率為(7.2±2.2)%，對比治療前(21.9±4.1)%有明顯的下降，浙貝母組病人的骨髓原始細胞百分比在治療前為(79±4)%，治療后為(26±5)%，其下降程度遠遠高于對照組，浙貝母組的臨床緩解率達到55%，相對于對照組的20%有一定的提高[23]。其他臨床研究亦證實，浙貝母散劑及復(fù)方浙貝顆?？梢栽鰪娀熕幬餄舛龋岣咚幬飳Π籽〖毎臍?，提高圍化療期的化療緩解率及總有效率，減輕化療骨髓抑制，并且具有較好的安全性，提升了患者的生存時間，具有降低復(fù)發(fā)率及死亡率的優(yōu)勢[23-26]。

以上研究均提示可以進一步開發(fā)浙貝母作為一種有效的中藥耐藥增敏劑。臨床應(yīng)用時，浙貝母有效成分及單復(fù)方制劑均可在一定程度上增加白血病化療藥物在細胞內(nèi)的蓄積，提高治愈率，但是目前浙貝母實驗研究少，能夠增加白血病抗癌藥物濃度的具體機制尚不明確，還需要進一步多角度研究其作用途徑和作用機制，以增加浙貝母的藥用價值。

4 結(jié)語

白血病作為一種造血系統(tǒng)常見的惡性腫瘤，治療的有效方案是放化療，實施骨髓抑制或外周血干細胞移植，但是由于其成功率低、多藥耐藥、易復(fù)發(fā)、價格昂貴等多種原因，不僅嚴重影響人類生活質(zhì)量，還會導(dǎo)致患者產(chǎn)生嚴重的心理疾病。目前，雖然經(jīng)過放化療治療的部分患者的臨床癥狀得以緩解，但其復(fù)發(fā)率卻高達80%左右，許多患者在治療中會對化療藥物產(chǎn)生多藥耐藥性，往往因多重耐藥導(dǎo)致治療失敗。因此，挖掘白血病多藥耐藥機制，加速腫瘤細胞凋亡，尋找一種有效的多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑，提高臨床緩解率，降低復(fù)發(fā)率，改善患者生活質(zhì)量是研究的重點，也是目前急需解決的問題[27]。

目前從中草藥中提取有效抗癌成分是一熱門研究，浙貝母在治療急慢性白血病方面都有低毒性、靶點多、逆轉(zhuǎn)耐藥的特點，顯示出良好的研究前景，因此研究浙貝母對白血病多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)作用及作用機制有著重要意義。目前，對于浙貝母治療白血病機制的研究較少，筆者通過綜述國內(nèi)外浙貝母治療白血病的作用及機制研究進展，希望可以提高其他研究學(xué)者進一步研究浙貝母的興趣，探究其作用靶點，具體作用機制為何，以促進浙貝母的有效成分提取及開發(fā)，以期開發(fā)一種效果良好的多藥耐藥逆轉(zhuǎn)劑和治療白血病藥物的增敏劑，為臨床上白血病患者帶來益處。