張雨桐 王晟東 李靜 宋明芬 王姝琪 閆盼

阿爾茨海默病的主要病理表現(xiàn)為大腦中Tau 蛋白過度磷酸化及β 淀粉樣蛋白沉積[1-3]。大腦中抗氧化系統(tǒng)功能異常，清除氧自由基能力減弱與阿爾茨海默病的病理過程密切相關(guān)[4]。硫氧還蛋白是細(xì)胞氧化/還原狀態(tài)重要調(diào)節(jié)分子，參與機(jī)體多種生物學(xué)活性[5]。褪黑激素是一種由松果體分泌的具有多種生物功能的內(nèi)源性激素，也具有抗氧化應(yīng)激等作用[6]。它們均可以通過降低氧化應(yīng)激反應(yīng)從而發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用[7-11]。本研究通過檢測(cè)血清中硫氧還蛋白和褪黑激素水平，比較分析其與阿爾茨海默病的相關(guān)性，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象 選擇杭州市第七人民醫(yī)院老年精神科2017年9 月至2018 年11 月住院治療的阿爾茨海默病患者31 例，其中男10 例，女21 例，年齡67～90（79.23±6.07）歲。阿爾茨海默病患者診斷符合美國神經(jīng)病學(xué)語言障礙卒中-老年性癡呆以及相關(guān)疾病學(xué)會(huì)（NINCDSADRDA）的阿爾茨海默病診斷標(biāo)準(zhǔn)。選擇2018 年3 至6 月對(duì)杭州市上城區(qū)某社區(qū)進(jìn)行癡呆早期篩查過程中獲得輕度認(rèn)知功能障礙的患者28 例，其中男11 例，女17 例，年齡65～85（75.18±6.38）歲，總體認(rèn)知功能比較正常，但主訴有記憶障礙，有客觀記憶受損依據(jù)，尚不能診斷其患有阿爾茨海默病；以及同一社區(qū)健康老年人40 例，其中男17 例，女23 例，年齡65～86（75.85±6.55）歲，無癡呆臨床癥狀及其他精神系統(tǒng)疾病，一般認(rèn)知功能及記憶正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡＜65 歲；糖尿病患者；有腦卒中病史患者；患有其他重性精神疾病者；家屬不配合者等。3 組對(duì)象性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。在入組時(shí)均被告知相關(guān)事宜，且簽署知情同意書。本研究涉及的醫(yī)學(xué)倫理已通過杭州市第七人民醫(yī)院倫理委員會(huì)的審查。3 組對(duì)象依據(jù)學(xué)歷不同簡(jiǎn)易智力狀態(tài)檢查量表（mini-mental state examination, MMSE）評(píng)分界限的說明見表1。

表13 組對(duì)象依據(jù)學(xué)歷不同MMSE 評(píng)分界限的說明（分）

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 3 組對(duì)象均于清晨空腹時(shí)抽取靜脈血5ml 于EDTA 抗凝管中，以3000r/min 離心10min，收集上清液，分裝后于-80℃冰箱內(nèi)保存。

1.2.2 血清硫氧還蛋白和褪黑激素水平測(cè)定 采用酶聯(lián)免疫法，試劑盒購自南京建成生物工程研究所，檢測(cè)過程嚴(yán)格按試劑盒說明書要求進(jìn)行。測(cè)定過程中用的酶標(biāo)儀為BIO-RAD 公司的iMark Microplate Reader，洗板機(jī)為BIO-RAD 公司的ImmunoWash 1575 Microplate Washer。

1.2.3 MMSE 評(píng)分 MMSE 量表評(píng)估由兩位副主任醫(yī)師完成。MMSE 評(píng)分包括語言、計(jì)算力、視空間、地點(diǎn)定向力、時(shí)間定向力、注意力、即刻記憶、延遲記憶等7 個(gè)方面，共30 個(gè)條目，總分為30 分，評(píng)分與智力狀態(tài)水平呈正相關(guān)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)軟件，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以表示，3 組間比較采用單因素方差分析；兩兩比較采用LSD-t法。相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.13 組對(duì)象血清硫氧還蛋白和褪黑激素水平、MMSE評(píng)分比較 見表2。

由表2 可見，阿爾茨海默病組的血清硫氧還蛋白水平、褪黑激素水平均低于健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.01），而輕度認(rèn)知障礙患者血清硫氧還蛋白水平和褪黑激素水平與健康對(duì)照組相比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。

2.2 阿爾茨海默病患者血清硫氧還蛋白、褪黑激素水平和MMSE 評(píng)分相關(guān)性 見圖1-3。

表23 組對(duì)象血清硫氧還蛋白和褪黑激素水平、MMSE 評(píng)分比較

圖1 阿爾茨海默病患者血清硫氧還蛋白水平與MMSE 評(píng)分的散點(diǎn)圖

圖2 阿爾茨海默病患者血清褪黑激素水平與MMSE 評(píng)分的散點(diǎn)圖

圖3 阿爾茨海默病患者血清硫氧還蛋白水平與褪黑激素水平的散點(diǎn)圖

由圖1-3 可見，阿爾茨海默病患者血清硫氧還蛋白水平與MMSE 評(píng)分、血清褪黑激素水平與MMSE 評(píng)分，血清硫氧還蛋白水平與褪黑激素水平均呈正相關(guān)（均P＜0.05）。

3 討論

阿爾茨海默病的主要病理特征是Tau 蛋白過度磷酸化導(dǎo)致的神經(jīng)纖維纏結(jié)和β 淀粉樣蛋白沉積導(dǎo)致的老年斑，研究表明這兩者均與大腦內(nèi)自由基清除能力不足、氧化損傷導(dǎo)致的神經(jīng)元凋亡有關(guān)[12]。硫氧還蛋白系統(tǒng)是機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化系統(tǒng)之一，廣泛分布在哺乳動(dòng)物的不同組織中，神經(jīng)系統(tǒng)中有高水平的硫氧還蛋白分布。硫氧還蛋白主要分布在細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核里，在清除氧自由基、調(diào)節(jié)氧化還原平衡等方面起重要作用，還在細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化及抑制細(xì)胞凋亡等過程發(fā)揮作用[13]。Lovell 等[14]發(fā)現(xiàn)阿爾茨海默病患者大腦中硫氧還蛋白水平顯著降低，特別是杏仁核和海馬區(qū)的硫氧還蛋白水平顯著下降。而人硫氧還蛋白轉(zhuǎn)基因鼠可以緩解海馬區(qū)氧化應(yīng)激損傷[15]。但是，鮮有阿爾茨海默病患者外周血血清硫氧還蛋白水平相關(guān)報(bào)道。

本文研究表明，阿爾茨海默病患者的外周血血清硫氧還蛋白水平顯著低于健康對(duì)照組，而輕度認(rèn)知功能障礙組與健康對(duì)照組之間血清硫氧還蛋白水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這說明外周血血清硫氧還蛋白水平的變化可能在阿爾茨海默病發(fā)生之后。阿爾茨海默病的病理改變消耗了機(jī)體抗氧化蛋白之一的硫氧還蛋白。而且阿爾茨海默病患者血清硫氧還蛋白水平與MMSE 評(píng)分明顯正相關(guān)。本研究結(jié)果表明外周血血清硫氧還蛋白水平可以在一定程度上反映出阿爾茨海默病的嚴(yán)重程度。但是硫氧還蛋白水平在阿爾茨海默病患者中的變化并不具有特異性，事實(shí)上我們還未發(fā)表的數(shù)據(jù)表明血管性癡呆患者的血清硫氧還蛋白水平也是顯著低于健康對(duì)照組的，而且其他神經(jīng)退行性疾病中也有類似結(jié)果[16]。

除了硫氧還蛋白以外，最近有研究表明褪黑激素在清除氧自由基方面也起著重要作用。褪黑激素在調(diào)節(jié)晝夜節(jié)律[17]、睡眠和抗氧化等多項(xiàng)生理功能上起作用，而且對(duì)學(xué)習(xí)記憶也有一定的調(diào)節(jié)作用。我們檢測(cè)發(fā)現(xiàn)阿爾茨海默病患者外周血血清褪黑激素水平顯著低于健康對(duì)照組，而且阿爾茨海默病患者血清褪黑激素水平與MMSE 評(píng)分呈正相關(guān)。進(jìn)一步分析又發(fā)現(xiàn)血清硫氧還蛋白水平與血清褪黑激素水平呈正相關(guān)。這說明周血血清褪黑激素水平也可以在一定程度上反映出阿爾茨海默病的嚴(yán)重程度。但是阿爾茨海默病患者中，外周血血清硫氧還蛋白水平和褪黑激素水平的這一變化到底是因是果，硫氧還蛋白（或其誘導(dǎo)物）或褪黑激素是否可以作為阿爾茨海默病的治療靶點(diǎn)，這些問題還有待相應(yīng)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)甚至臨床試驗(yàn)等來進(jìn)一步驗(yàn)證。