陳瑩瑩
(沈陽市蘇家屯區(qū)中心醫(yī)院 遼寧沈陽 110101)
生化分析儀又被稱為生化儀,是一種采用光電比色原理,測量體液中某種特定化學(xué)元素的儀器,因為產(chǎn)品對于特定化學(xué)元素的檢測速度快、準(zhǔn)確率高,以及消耗試劑量小等特點,得到了各大醫(yī)療機構(gòu)的青睞,并被廣泛應(yīng)用于檢測中。 因此,在購買和選取生化儀時,為保證科學(xué)性,充分發(fā)揮生化儀的價值,有必要應(yīng)用專業(yè)的檢測設(shè)備和技術(shù),對生化儀進行嚴(yán)格的質(zhì)量管控和檢測監(jiān)督。
一般來說,生化分析儀的結(jié)構(gòu)組成為:(1)保溫器,為試驗反應(yīng)提供恒定的溫度器皿。(2)樣品器,放置標(biāo)準(zhǔn)品等。
根據(jù)GB 4793.1—2007《測量、控制和實驗室用電氣設(shè)備的安全要求 第1 部分:通用要求》[1]的安全要求和GB/T 2829—2002《周期檢驗計數(shù)抽樣程序及表(適用于對過程穩(wěn)定性的檢驗)》[2]等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn),生化儀生產(chǎn)企業(yè)做出的生化儀產(chǎn)品必須具備以下標(biāo)準(zhǔn):
電源電壓:220 V+22 V,50 Hz+1 Hz;環(huán)境溫度:15℃~30℃;相對濕度:40%~85%;大氣壓力:86.0~106.0 kPa;雜散光不能大于2.3;控制吸光度線性取值在±5%;最大吸光度應(yīng)該≥2.0,吸光度準(zhǔn)確度應(yīng)符合表1 的規(guī)定[3]。
表1 生化儀吸光度準(zhǔn)確度要求
吸光度的穩(wěn)定性:溫度準(zhǔn)確度與波動度設(shè)定值范圍為±0.3,吸光度要小于0.01;溫度值在±0.3℃;波動度變化范圍為0.6%,樣品攜帶污染應(yīng)小于該數(shù)值。開始樣品準(zhǔn)確度可稍小,重復(fù)性操作加大樣量,進行重復(fù)檢測,最后保證誤差不超過6%,變異系數(shù)(CV)不超過2%。 最大加樣之后,對儀器進行檢測,保障加樣準(zhǔn)確度誤差在6%以內(nèi),CV 范圍在3%。 生化儀精密度CV 應(yīng)滿足表2 的要求。
表2 生化儀精密度要求
3.2.1 雜散光檢測
用蒸餾水作參比,在340 nm 處測定50 g/L 的亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液;或以空氣作參比,在340 nm 處測定JB 400 型截止型濾光片的吸光度,應(yīng)符合雜散光吸光度不小于2.3 的要求。
3.2.2 吸光度線性范圍檢測
色素原液體積分配要考慮高出分析儀要求的上限6%左右[4]。 配置方法詳見表3,然后稀釋溶液,稀釋液按0%~100%(0%、10%、20%……100%)的比例稀釋,最終獲得11 個濃度梯度。
表3 色素原液的配制方法
在分析儀上,測定溶液的吸光度,每個濃度5 倍,計算平均值。以相對濃度為水平坐標(biāo),以平均吸光度為垂直坐標(biāo),按照式(1)、式(2)、式(3)計算5~H 點的相對偏倚D,相對偏倚小于5%的吸光度范圍即為吸光度線性范圍。
式(1)中:a—線性截距;Ai—某濃度吸光度平均值;b—線性擬合的斜率;Ci—相對濃度;i—濃度序號,范圍為5~11。 式(2)和式(3)中:Ai—某濃度點實際測定的吸光度的平均值;q—相對濃度;n—選定的濃度個數(shù);z—濃度序號,范圍為1~4。
3.2.3 吸光度準(zhǔn)確度
以重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液在340 nm 處的吸光度為標(biāo)準(zhǔn),測定分析儀在標(biāo)準(zhǔn)重鉻酸鉀溶液的吸光度,數(shù)值為0.5 和1.0 時需要重復(fù)測量3 次(蒸餾水為空白),6%為允許偏差。 最后計算算術(shù)平均值,結(jié)果符合表1 的要求(與標(biāo)準(zhǔn)值的差值)。
3.2.4 吸光度穩(wěn)定性
分析儀的吸光度穩(wěn)定性在350~600 nm 內(nèi),同時測定700 nm 波長范圍。 350 nm 溶液的吸光度為0.5(±6%為可以偏差),在二氨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液下測定,在700~7 500 nm 內(nèi),硫酸銅溶液標(biāo)準(zhǔn)液體下任意吸光度波長為0.5 nm(以偏差±6%、純清水為空白標(biāo)準(zhǔn))。根據(jù)以上條件設(shè)定檢測內(nèi)容,通過最大值與最小值的差,測定溶液的吸光度,計算滿足要求:(1)最大反應(yīng)時間為測定時間。 (2)讀數(shù)間隔時間小于測定時間。
3.2.5 吸光度重復(fù)性
分析儀在350 nm 波長下測定吸光度重復(fù)性具有重要意義。設(shè)定溶液的吸光度在1.0 的情況下(以蒸餾水或者純凈水為空白,允許偏差為±6%),可以設(shè)定以下策略:最小反應(yīng)體積(這里指溶液總量);10 min 或者化學(xué)反應(yīng)時間盡量長,上述溶液的吸光度重復(fù)20 次,按公式(4)計算變化量CV,應(yīng)符合CV 要求,不大于1.5%:
從以上數(shù)據(jù)可以得出,實驗用2 種品牌的生化儀生化檢測結(jié)果都在正常范圍內(nèi),不存在明顯差異,檢測均值和偏差稍有差異,但是總體不影響最終檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性, 故沈陽市蘇家屯區(qū)中心醫(yī)院的2臺生化儀均符合標(biāo)準(zhǔn), 滿足檢測要求和臨床需要,可以作為生化檢測的常規(guī)儀器。
影響生化儀檢測的因素有很多,包括取血方法、溫度、濕度、試紙條批號及保存等,要保證生化儀測定結(jié)果的準(zhǔn)確性,同時保證不同生化儀所測結(jié)果的一致性,就需要加強對生化儀的質(zhì)量管理[5-9]。 (1)制定生化儀監(jiān)測檢測的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和程序步驟,用制度做事、 管理相關(guān)從業(yè)工作人員才是長久之計。(2)建立健全生化儀監(jiān)測系統(tǒng)和質(zhì)量控制體系,從體系建立就作出明確懲罰措施,用科學(xué)的手段不斷完善質(zhì)量控制體系,避免出現(xiàn)監(jiān)測不到位和無人值守等極端情況。(3)科學(xué)完善沈陽市蘇家屯區(qū)中心醫(yī)院生化儀房間質(zhì)量評估體系建設(shè),確保硬件設(shè)施滿足監(jiān)測檢測條件[10-14]。