張進(jìn)兵 沈春修 王舸泓 廖建平 卻志群

關(guān)鍵詞：東鄉(xiāng)野生稻;耐冷;數(shù)量性狀座位（Quantitative trait locus，QTL）;轉(zhuǎn)錄組分析;半定量RT-PCR

中圖分類號：S511.01文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：1000-4440（2020）06-1612-05

Key words：Dongxiang wild rice;cold tolerance;quantitative trait locus （QTL）;transcriptome analysis;semi-quantitative RT-PCR

低溫寒害是影響水稻生產(chǎn)的主要不利因素之一，特別是苗期對低溫脅迫尤為敏感，早春時期的水稻秧苗暴露于低溫脅迫下，幼苗發(fā)育變緩、變黃、枯萎，最終導(dǎo)致水稻產(chǎn)量下降[1]。受低溫逆境脅迫的影響，東南亞和南亞共約有7.00×106 hm2土地?zé)o法種植水稻[2]。在中國，除了緯度較高的東北水稻耕作區(qū)易受低溫影響外，長江中下游地區(qū)早春時期的“倒春寒”常導(dǎo)致水稻爛根、爛秧，對水稻產(chǎn)量產(chǎn)生了嚴(yán)重影響。據(jù)統(tǒng)計，每年中國稻作區(qū)均有低溫冷害發(fā)生，平均4～5年發(fā)生1次嚴(yán)重冷害，造成水稻災(zāi)年年均減產(chǎn)5.0×109～1.0×1010 kg[3]。挖掘水稻自身的耐冷相關(guān)基因，培育強(qiáng)耐冷性水稻品種是解決當(dāng)前生產(chǎn)上這一突出問題的重要途徑。

據(jù)國家水稻數(shù)據(jù)中心（http：//www.ricedata.cn/）統(tǒng)計，截至2020年2月1日，水稻中已被克隆的耐冷相關(guān)基因共計81個，其中占比最大的一類是轉(zhuǎn)錄因子基因，約占50%，當(dāng)遭遇冷脅迫時，植物轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)被啟動，然后激活下游一系列抗寒功能性基因的表達(dá)，從而提高了植物的抗寒性[4-5]。由此可見，耐冷相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子基因在未來水稻抗寒育種中有著廣闊的應(yīng)用前景。MYB（V-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog）轉(zhuǎn)錄因子基因家族是目前植物中已知基因數(shù)最為龐大的轉(zhuǎn)錄因子基因家族之一。MYB轉(zhuǎn)錄因子由其N端保守的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域而得名，根據(jù)結(jié)構(gòu)域中不完全重復(fù)的R結(jié)構(gòu)的數(shù)量，可將MYB轉(zhuǎn)錄因子分為4個亞類：單一R結(jié)構(gòu)的MYB、R2R3型MYB、3R-MYB及4R-MYB。此外，有較多研究發(fā)現(xiàn)MYB轉(zhuǎn)錄因子廣泛參與了植株耐低溫脅迫的基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[6-8]。自東鄉(xiāng)野生稻被發(fā)現(xiàn)以來，一直以耐冷性強(qiáng)而著稱，然而目前在東鄉(xiāng)野生稻中還未見關(guān)于MYB轉(zhuǎn)錄因子在低溫逆境脅迫中發(fā)揮作用的報道。

筆者所在課題組前期通過對耐冷東鄉(xiāng)野生稻、茶陵野生稻、東鄉(xiāng)野生稻與冷敏感水稻93-11雜交所得F2代越冬群體（OOP，由20個典型的可越冬存活的F2代個體組成）及冷敏感水稻93-11苗期冷處理（4 ℃ 3 d）前后的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)進(jìn)行比較分析，獲得了462個與水稻苗期耐冷性相關(guān)的差異表達(dá)基因（Different expressed genes， DEG）[9]，結(jié)合Mao等公布的13個東鄉(xiāng)野生稻苗期耐冷數(shù)量性狀QTL信息[10]，發(fā)現(xiàn)有1個差異表達(dá)基因LOC_Os11g35390剛好落于QTL的qCTS11.2位點(diǎn)區(qū)域。本研究將東鄉(xiāng)野生稻中該差異表達(dá)的基因暫命名為LOC_Os11g35390-DX，并將該基因視為耐冷QTL的qCTS11.2基因的候選基因，擬通過半定量RT-PCR技術(shù)驗(yàn)證該基因在東鄉(xiāng)野生稻冷脅迫前后表達(dá)量的變化，克隆以該基因?yàn)橹行牡纳舷掠胃餮由旒s1.2 kb的基因片段，并預(yù)測分析該基因的上游潛在功能順式元件，最后借助農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)化冷敏感水稻受體品種明恢86。本研究結(jié)果可為后續(xù)東鄉(xiāng)野生稻耐冷基因在耐低溫脅迫功能中的研究奠定基礎(chǔ)。

1材料與方法

1.1材料

供試植物材料為東鄉(xiāng)野生稻，受體材料為冷敏感水稻品種明恢86，2種水稻材料均由筆者所在實(shí)驗(yàn)室保存。大腸桿菌菌株DH5α、農(nóng)桿菌菌株EHA105均購自北京全式金生物技術(shù)有限公司。植物表達(dá)載體pCAMBIA1300由筆者所在實(shí)驗(yàn)室保存。

RNA抽提試劑盒，購自成都福際生物技術(shù)有限公司;高保真DNA聚合酶、Fast Pfu DNA聚合酶、RT-PCR試劑盒，均購自TransGen公司;質(zhì)粒抽提試劑盒，購自O(shè)MEGA公司;限制性內(nèi)切酶BamHⅠ、Kpn Ⅰ，購自Thermo公司;rTaq DNA聚合酶，購自TaKaRa公司。其余試劑均為國產(chǎn)或進(jìn)口分析純級別。

1.2方法

1.2.1引物的設(shè)計根據(jù)Rice Genome Annotation Project（http：//rice.plantbiology.msu.edu/）中公布的水稻LOC_Os11g35390基因及其上游序列信息，使用Primer 5.0軟件設(shè)計基因擴(kuò)增引物35390-DX-F、35390-DX-R，參照外顯子序列設(shè)計半定量RT-PCR引物SQU-35390-F、SQU-35390-R，Tubulin-F、Tubulin-R為內(nèi)參基因Tubulin的擴(kuò)增引物，Hpt-F、Hpt-R為潮霉素抗性標(biāo)記基因的擴(kuò)增引物。

1.2.2熒光定量表達(dá)分析參照TIANGEN公司的Super Real PerMix Plus（SYBR Green）試劑盒操作方法說明，以SQU-35390-F、SQU-35390-R為引物，在StepOne PlusTM熒光定量PCR儀中進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增，用△△Ct分析方法評估基因的表達(dá)水平。將東鄉(xiāng)野生稻幼苗在常溫條件（28 ℃左右）下培養(yǎng)至4周左右后置于4 ℃冷藏柜中進(jìn)行冷處理，以處理前的東鄉(xiāng)野生稻葉片樣本作為對照組，將東鄉(xiāng)野生稻于4 ℃冷處理1 d、2 d、3 d后的葉片樣本作為試驗(yàn)組，以微管蛋白（Tublin）編碼基因作為內(nèi)參基因，設(shè)置3次生物學(xué)重復(fù)和3次技術(shù)重復(fù)。

1.2.3遺傳轉(zhuǎn)化用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法將構(gòu)建好的植物表達(dá)載體pCAMBIA1300-35390-DX導(dǎo)入轉(zhuǎn)基因受體水稻品種明恢86中，在轉(zhuǎn)基因過程中，培養(yǎng)基的配制參照魏林艷[11]的方法。

1.2.4耐冷性的鑒定待來源于T0代轉(zhuǎn)基因株系的T1代水稻種子發(fā)芽后，將其置于盛有50 mg/L潮霉素溶液的培養(yǎng)皿（直徑為90 mm）中，進(jìn)行約10 d的篩選培養(yǎng)，選擇生長不受抑制的T1代轉(zhuǎn)基因植株與同時進(jìn)行發(fā)芽處理的受體明恢86植株（在盛有滅菌水的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)）移栽到同1個盛有泥土的塑料培養(yǎng)容器中（19 cm×13 cm×12 cm）。采用自然光照射，平均晝夜溫度為28 ℃至22 ℃，每天對幼苗澆水直至3～4葉期，而后將幼苗移栽至4 ℃的環(huán)境中，進(jìn)行2～3 d的冷處理。復(fù)活10 d后分別統(tǒng)計野生型植株、轉(zhuǎn)基因植株的復(fù)活率（復(fù)活率=處理后復(fù)活幼苗數(shù)/幼苗總數(shù)×100%），試驗(yàn)設(shè)3次重復(fù)。

1.2.5生物信息學(xué)分析用生物信息學(xué)軟件PlantCARE分析啟動子序列，預(yù)測其中存在的順式元件;用在線分析軟件SMART對基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)域進(jìn)行預(yù)測分析;用DNAMAN進(jìn)行氨基酸序列的多重比對和系統(tǒng)進(jìn)化樹的構(gòu)建。

2結(jié)果與分析

2.1QTL qCTS11.2位點(diǎn)候選基因LOC_Os11g35390-DX的確定

根據(jù)Mao等[10]公開的東鄉(xiāng)野生稻苗期耐冷QTL qCTS11.2位點(diǎn)最鄰近側(cè)翼標(biāo)記的序列信息，在公共數(shù)據(jù)網(wǎng)站gramene（http：//ensembl.gramene.org/Tools/Blast）上對兩端側(cè)翼標(biāo)記序列進(jìn)行BLAST，以確認(rèn)其在水稻染色體上的確切位置。隨后在Rice Genome Annotation Project網(wǎng)站（http：//rice.plantbiology.msu.edu/cgi-bin/gbrowse/rice）上輸入這2個側(cè)翼標(biāo)記序列的物理位置信息，并查閱該區(qū)段中的所有基因，與筆者所在課題組前期通過RNA-seq測序統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)的462個東鄉(xiāng)野生稻和OOP共有的與耐冷相關(guān)的差異表達(dá)基因進(jìn)行比對，最終發(fā)現(xiàn)在462個低溫誘導(dǎo)的差異表達(dá)基因中有2個基因（LOC_Os11g31190-DX、LOC_Os11g35390-DX）位于qCTS11.2位點(diǎn)所處的染色體區(qū)段中，本研究選取的候選基因LOC_Os11g35390-DX正是其中之一。

2.2低溫脅迫下東鄉(xiāng)野生稻LOC_Os11g35390-DX基因的表達(dá)

在前期的研究中，筆者用RNA-seq技術(shù)對耐冷東鄉(xiāng)野生稻苗期冷處理前后的轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，東鄉(xiāng)野生稻LOC_Os11g35390-DX基因的表達(dá)量在冷處理后顯著下調(diào)，僅為冷處理前表達(dá)量的13.4%。這一結(jié)果顯示，在東鄉(xiāng)野生稻中，低溫脅迫會誘導(dǎo)LOC_Os11g35390-DX基因表達(dá)量的下調(diào)。為了驗(yàn)證這一結(jié)論，用實(shí)時熒光定量PCR對東鄉(xiāng)野生稻中的LOC_Os11g35390-DX基因在冷脅迫處理條件下的相對表達(dá)量進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，在連續(xù)冷脅迫處理3 d的過程中，東鄉(xiāng)野生稻中LOC_Os11g35390-DX基因的表達(dá)量表現(xiàn)出逐漸下調(diào)的趨勢;冷處理3 d后，該基因的表達(dá)量下降至冷處理前表達(dá)量的7.8%。

2.3東鄉(xiāng)野生稻LOC_Os11g35390-DX基因的克隆

對包含LOC_Os11g35390-DX基因及其上游、下游序列在內(nèi)的共計4.5 kb的DNA片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增結(jié)果顯示，擴(kuò)增出的特異性條帶與目的片段大小相符，約為4.5 kb。隨后用BamH I、Kpn I限制性內(nèi)切酶雙酶切PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，用0.8%瓊脂糖凝膠電泳后回收目的條帶，與同樣用BamH I、Kpn I限制性內(nèi)切酶雙酶切后的表達(dá)載體pCAMBIA1300進(jìn)行連接。通過Bam H I、Kpn I雙酶切鑒定重組克隆pCAMBIA1300-35390-DX，結(jié)果顯示，本研究獲得了1個陽性克隆，電泳所得大小約為9.0 kb的條帶是pCAMBIA1300載體片段，大小約為4.5 kb的條帶是目的基因片段。

2.4LOC_Os11g35390-DX蛋白結(jié)構(gòu)域的分析及多重比對

通過對陽性克隆測序結(jié)果與公共數(shù)據(jù)庫中水稻品種日本晴測序結(jié)果對應(yīng)位點(diǎn)的全長cDNA序列進(jìn)行比對，推測該基因全長cDNA大小為993 bp，編碼330個氨基酸，使用生物信息學(xué)工具SMART對LOC_Os11g35390-DX蛋白氨基酸序列的保守結(jié)構(gòu)域進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，東鄉(xiāng)野生稻LOC_Os11g35390-DX蛋白的N端有2個保守結(jié)構(gòu)域SANT （SWI3， ADA2， N-CoR and TFIIIB DNA-binding domains），分別位于氨基酸序列第14～64號位點(diǎn)及第67～155號位點(diǎn)之間的區(qū)段，這一結(jié)構(gòu)域是MYB轉(zhuǎn)錄因子典型的R2R3型保守結(jié)構(gòu)域，表明東鄉(xiāng)野生稻的LOC_Os11g35390-DX基因?qū)儆赗2R3型MYB轉(zhuǎn)錄因子基因。從國家水稻數(shù)據(jù)中心網(wǎng)站（www.ricedata.com）上獲取其他已克隆的水稻R2R3型MYB轉(zhuǎn)錄因子的氨基酸序列，使用DNAMAN將東鄉(xiāng)野生稻LOC_Os11g35390-DX基因編碼的蛋白質(zhì)氨基酸序列與其進(jìn)行多重比較，結(jié)果顯示，東鄉(xiāng)野生稻LOC_Os11g35390-DX基因編碼的蛋白質(zhì)氨基酸序列與OsJAMyb[12]、OsMYB2P-1[13]、OsMYB91[14]、OsMYB2[15]及OsMYB103[16]等R2R3型MYB轉(zhuǎn)錄因子基因編碼的蛋白質(zhì)氨基酸序列存在30.98%的一致性。

2.5水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子基因分子進(jìn)化樹的構(gòu)建

為了對東鄉(xiāng)野生稻LOC_Os11g35390-DX基因的功能進(jìn)行初步預(yù)測，用DNAMAN軟件將該基因與19個已克隆的水稻MYB轉(zhuǎn)錄因子基因進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析并構(gòu)建進(jìn)化樹。結(jié)果表明，LOC_Os11g35390-DX基因與Osmyb4基因[17]、OsMYB30基因[18]同源性最高，親緣關(guān)系最近;與水稻MYB1基因[19]、OsMYB6基因[20]的同源性最低，親緣關(guān)系最遠(yuǎn)。

2.6重組質(zhì)粒 pCAMBIA1300-35390-DX的遺傳轉(zhuǎn)化及T1代轉(zhuǎn)基因植株耐冷表型的鑒定

將轉(zhuǎn)入植物表達(dá)載體pCAMBIA1300-35390-DX的農(nóng)桿菌菌株接種在含有50 mg/L卡那霉素、50 mg/L利福平的LB固體平板上，培養(yǎng)2～3 d后侵染預(yù)備好的冷敏感水稻明恢86的愈傷組織，愈傷組織經(jīng)與農(nóng)桿菌克隆共培養(yǎng)，潮霉素篩選培養(yǎng)，分化培養(yǎng)基上的光照分化培養(yǎng)及幼苗生根壯苗后，最終獲得24株轉(zhuǎn)入重組載體pCAMBIA1300-35390-DX的轉(zhuǎn)基因植株（圖1）。用潮霉素抗性標(biāo)記基因部分序列的特異性引物Hpt-F、Hpt-R對經(jīng)潮霉素抗性篩選獲得的T0代轉(zhuǎn)基因水稻幼苗進(jìn)行PCR擴(kuò)增檢測。結(jié)果顯示，24個被檢測植株中都檢測到了目標(biāo)條帶，陽性率為100%，說明本研究已經(jīng)獲得轉(zhuǎn)LOC_Os11g35390-DX基因的陽性株系。部分潮霉素抗性標(biāo)記基因特異性引物的PCR檢測結(jié)果顯示，陽性樣本在900 bp左右有目標(biāo)條帶，而野生型陰性對照無條帶。本研究同時對來源于T0代轉(zhuǎn)基因株系的T1代轉(zhuǎn)基因植株與野生型水稻植株進(jìn)行了耐冷表型的比較鑒定，然而未發(fā)現(xiàn)T1代轉(zhuǎn)基因植株的耐冷性與野生型植株之間的耐冷性有明顯差異。

2.7LOC_Os11g35390-DX基因上游啟動子主要順式作用元件的分析預(yù)測

本研究用啟動子分析工具PlantCARE預(yù)測了LOC_Os11g3539-DX基因起始密碼子上游約1.2 kb啟動子序列中的主要順式作用功能元件。結(jié)果表明，該順式作用元件包含一些啟動子的基本元件，包括3個轉(zhuǎn)錄起始核心順式作用元件TATA-box位點(diǎn)、3個啟動子結(jié)構(gòu)以及增強(qiáng)子結(jié)構(gòu)中常見的順式作用元件CAAT-box位點(diǎn)。除了這些啟動子的基本元件外，上游啟動子序列還包含與非生物逆境脅迫有關(guān)的4個MYC轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合順式作用元件和1個MYB轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合順式作用元件，另外還攜帶一些與激素調(diào)控相關(guān)的作用元件，包括與茉莉酸信號通路相關(guān)的順式作用元件GGTCA-motif、TGACG-motif，與脫落酸響應(yīng)信號通路相關(guān)的順式作用元件ABRE以及與生長素響應(yīng)相關(guān)的順式作用元件TGA-element。

3討論

植物在生長發(fā)育過程中常受到各種逆境脅迫的影響，經(jīng)過漫長的進(jìn)化過程，植物受到逆境脅迫后，通過自身基因轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控，形成了完整的抗逆境脅迫體系[21]。由此可見，與植物抗逆境脅迫相關(guān)的基因常為脅迫誘導(dǎo)表達(dá)基因，通過自身轉(zhuǎn)錄或翻譯的變化，參與到植物抗逆境脅迫響應(yīng)的機(jī)制中。通過QTL定位方法獲得的QTL在染色體上的長度范圍動輒達(dá)kb級，其中包含的基因數(shù)量巨大，無法實(shí)現(xiàn)基因的單獨(dú)克隆鑒定、表型分析等工作，而縮小QTL定位范圍又面臨找尋分子標(biāo)記難度逐步加大、工作量繁雜等問題。本研究結(jié)合Mao等[10]公開的東鄉(xiāng)野生稻苗期耐冷QTL染色體位置信息，將低溫處理（4 ℃處理3 d）后在東鄉(xiāng)野生稻和OOP中都出現(xiàn)下調(diào)表達(dá)且同時落在QTL qCTS11.2位點(diǎn)所在區(qū)段的差異表達(dá)基因LOC_Os11g35390-DX作為東鄉(xiāng)野生稻qCTS11.2位點(diǎn)中的1個候選基因，由于水稻耐冷相關(guān)基因往往是冷誘導(dǎo)表達(dá)基因，這種將水稻耐冷基因QTL定位與冷脅迫處理前后轉(zhuǎn)錄組分析獲得的差異表達(dá)基因結(jié)合的基因克隆研究思路在很大程度上為耐冷QTL所在染色體區(qū)段候選基因的篩選提供了便利，有助于加快水稻耐冷基因的挖掘進(jìn)程。

SMART在線分析軟件預(yù)測結(jié)果表明，東鄉(xiāng)野生稻LOC_Os11g35390-DX基因?qū)儆诘湫偷腞2R3型MYB轉(zhuǎn)錄因子基因，MYB轉(zhuǎn)錄因子是植物中一類重要的轉(zhuǎn)錄因子，因其結(jié)構(gòu)中存在高度保守的DNA結(jié)合區(qū)域（myb結(jié)構(gòu)域）而得名。MYB轉(zhuǎn)錄因子家族具有廣譜作用，廣泛參與植物組織的形態(tài)建成、次生代謝、激素調(diào)控及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程[22]。此外，在植物遭受非生物逆境脅迫時，MYB轉(zhuǎn)錄因子也通過調(diào)控下游基因的表達(dá)而參與生物應(yīng)答。Liao等[23]將大豆GmMYB177基因轉(zhuǎn)入擬南芥，提高了擬南芥的耐旱性;Zhai等[24]報道，MYBC1轉(zhuǎn)錄因子可獨(dú)立于CBF通路負(fù)調(diào)控擬南芥的耐寒性。LOC_Os11g35390-DX基因編碼的氨基酸序列與其他已克隆的水稻R2R3型MYB轉(zhuǎn)錄因子氨基酸序列的比對結(jié)果表明，它們之間的氨基酸序列同源性較低，表明水稻R2R3型MYB轉(zhuǎn)錄因子之間差異較大，推測存在多個進(jìn)化分支。通過構(gòu)建分子進(jìn)化樹發(fā)現(xiàn)，LOC_Os11g35390-DX基因與水稻R2R3型MYB基因Osmyb4、OsMYB30的親緣關(guān)系最近。有研究發(fā)現(xiàn)，過表達(dá)水稻Osmyb4基因顯著增強(qiáng)了擬南芥植株的抗寒性，同時，轉(zhuǎn)基因植株中部分參與低溫脅迫響應(yīng)的基因表達(dá)量也發(fā)生了變化，表明水稻Osmyb4基因在植物響應(yīng)低溫脅迫的信號傳導(dǎo)通路中起著開關(guān)作用[17]，而過表達(dá)OsMYB30基因的轉(zhuǎn)基因水稻植株卻呈現(xiàn)低溫脅迫敏感的表型[18]。以上結(jié)果表明，與LOC_Os11g35390-DX基因親緣關(guān)系較近的R2R3型MYB轉(zhuǎn)錄因子基因Osmyb4、OsMYB30在水稻應(yīng)答低溫脅迫的正負(fù)調(diào)控中發(fā)揮了重要的調(diào)節(jié)作用。結(jié)合LOC_Os11g35390-DX基因受低溫誘導(dǎo)后表達(dá)量降低這一特性，推測LOC_Os11g35390-DX基因可能參與東鄉(xiāng)野生稻低溫脅迫應(yīng)答的負(fù)調(diào)控過程。

通過在線分析軟件PlantCARE分析東鄉(xiāng)野生稻轉(zhuǎn)錄因子基因LOC_Os11g35390-DX的上游啟動子序列，結(jié)果顯示，在LOC_Os11g35390-DX基因的啟動子序列中，除了包含一些常見功能順式作用元件外，還存在MYB、MYC等兩類被廣泛報道參與植物非生物脅迫響應(yīng)的基因表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)。由此推測，在東鄉(xiāng)野生稻中，LOC_Os11g35390-DX基因作為1種MYB轉(zhuǎn)錄因子基因調(diào)節(jié)下游基因表達(dá)的同時，自身的表達(dá)也可能被上游MYB或MYC轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控，推測其在東鄉(xiāng)野生稻低溫脅迫響應(yīng)的基因表達(dá)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中起到中間信號傳遞的作用。另外，預(yù)測分析結(jié)果表明，在LOC_Os11g35390-DX基因啟動子上還分布著與脫落酸、茉莉酸及生長素等在植物響應(yīng)逆境脅迫時發(fā)揮重要作用的植物激素信號通路相關(guān)聯(lián)的順式作用元件，表明該基因可能也參與了植物激素響應(yīng)逆境脅迫的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的基因表達(dá)調(diào)控。

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（責(zé)任編輯：徐艷）