李愛(ài)民， 馮秋琪，柳 嘉， 吳曉磊， 林 靜， 丁方莉， 夏 凱，苑 鵬， 桑若杰， 萬(wàn) 寧， 段盛林， 高曉冬

（1. 江南大學(xué) 糖化學(xué)與生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 無(wú)錫214122；2. 江南大學(xué) 生物工程學(xué)院，江蘇 無(wú)錫214122；3. 新時(shí)代健康產(chǎn)業(yè)（集團(tuán)）有限公司，北京102206；4. 功能主食創(chuàng)制與慢病營(yíng)養(yǎng)干預(yù)北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京100015；5. 中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)研究院有限公司，北京100015）

經(jīng)濟(jì)發(fā)展使人們的飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生了巨變，以往的粗糧、粗加工、低脂低糖食品逐漸被精細(xì)加工的高糖高脂食品所替代。 長(zhǎng)期攝入高脂高糖食品會(huì)直接導(dǎo)致肥胖，同時(shí)伴隨一系列代謝綜合征，如高血糖、高血脂、胰島素抵抗（insulin resistance，IR）和氧化應(yīng)激等，嚴(yán)重時(shí)可發(fā)展為一系列代謝疾病，如糖尿病（diabetes mellitus，DM）、非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD） 和心腦血管疾病等[1-2]。 其中氧化應(yīng)激和IR 是上述多種代謝疾病共同癥狀，是研究代謝疾病的關(guān)鍵所在。

近年來(lái)， 人們對(duì)藥食同源的天然資源進(jìn)行研究， 發(fā)現(xiàn)一些植物中的活性成分可通過(guò)其抗氧化、清除自由基以及緩解炎癥的作用，來(lái)改善糖脂代謝[3-5]。 瑪咖（Lepidium meyeniiWalp）為十字花科獨(dú)行菜屬一年或兩年生草本植物，原產(chǎn)于秘魯，是當(dāng)?shù)氐囊环N保健食品。 2002 年中國(guó)引種瑪咖，目前已在云南麗江和新疆等地種植。 瑪咖作為新食品資源，在市場(chǎng)上已經(jīng)有各種類型的產(chǎn)品，其功效有抗疲勞、調(diào)節(jié)神經(jīng)、改善性功能、緩解更年期綜合征等[6]。 黃精為百合科黃精屬多年生草本植物的干燥根狀莖，在我國(guó)各省均有廣泛分布，是一種傳統(tǒng)滋補(bǔ)中藥，味甘，性平，歸脾、肺、腎經(jīng)，具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、健脾、潤(rùn)肺、益腎的功效。 黃精的主要活性成分有黃精多糖、皂苷、黃酮和揮發(fā)油等，具有抗腫瘤、抗病毒、抗氧化以及降血糖等功效[7]。 桔梗為桔梗目桔?？贫嗄晟荼局参铮?是我國(guó)藥食同源的傳統(tǒng)中藥，有祛痰止咳、消炎和提高免疫力的作用。 桔梗中主要的藥理活性成分是皂苷類， 此外還含有黃酮、酚類、多糖、甾體等一些活性成分[8]。 研究結(jié)果還表明，瑪咖、黃精和桔梗的水提物均具有一定的抗氧化、調(diào)節(jié)代謝的功效[9-11]。 黃遠(yuǎn)英等[12]通過(guò)建立小鼠疲勞模型，發(fā)現(xiàn)黃精和瑪咖組成的復(fù)方含片可增加小鼠肝糖原的含量，并降低血乳酸水平，具有一定的緩解體力疲勞的作用。 也有相關(guān)的專利報(bào)道，黃精瑪咖組成的復(fù)方食品，可緩解人體疲勞并增強(qiáng)免疫力[13-14]。王瑜玲等[15]公開(kāi)了一種黃精復(fù)合桔梗等藥食同源的植物提取物的配方，具有降血糖的功效，可作為輔助降血糖的食品配方。 作者在以往研究的基礎(chǔ)上，對(duì)瑪咖、 黃精和桔梗的活性成分分別進(jìn)行提取，并采用高糖高脂誘導(dǎo)HepG2 細(xì)胞，建立糖脂代謝紊亂的細(xì)胞模型， 從多個(gè)指標(biāo)評(píng)價(jià)瑪咖和黃精-桔梗提取物復(fù)配對(duì)糖脂代謝的調(diào)節(jié)作用，探究其作用機(jī)制及復(fù)方的最佳配比，以期為瑪咖功能組方干預(yù)代謝疾病提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

瑪咖：新時(shí)代健康產(chǎn)業(yè)（集團(tuán)）有限公司產(chǎn)品；黃精和桔梗：北京同仁堂有限責(zé)任公司產(chǎn)品；HepG2細(xì)胞株：中國(guó)食品發(fā)酵工業(yè)研究院提供；Dulbecco’s Modified Eagle Medium（DMEM）培養(yǎng)基、磷酸鹽緩沖液（Phosphate buffered saline，PBS）、 平衡鹽緩沖液（Hank’s balanced salt solution，HBSS）、DMEM 無(wú)糖培養(yǎng)基、 小牛血清： 美國(guó)Gibco 公司產(chǎn)品； 油酸（Oleic acid，OA）、棕櫚酸（Palmitic acid，PA）、2′，7′-二氯熒光黃雙乙酸鹽 （DCFH-DA）、 二甲基亞砜（Dimethyl sulfoxide，DMSO）、 噻 唑 蘭 （3-（4，5-dimethylthiazol -2 -yl） -2，5 -diphenylterazolium bromide，MTT）、胰蛋白酶、二甲雙胍：美國(guó)Sigma 化學(xué)公司產(chǎn)品；無(wú)游離脂肪酸（FFA）、牛血清白蛋白（FFA-free bovine serum albumin，BSA）：日本W(wǎng)AKO公司產(chǎn)品；RIPA 細(xì)胞裂解液、TG 試劑盒、葡萄糖試劑盒、糖原試劑盒、TC 試劑盒：碧云天生物技術(shù)研究所提供；氯仿、正丁醇、碳酸鈉、無(wú)水乙醇：均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

高速多功能粉碎機(jī)： 德清拜杰有限公司產(chǎn)品；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：上海亞榮生化儀器廠制造；真空冷凍干燥機(jī)： 北京松源華興科技發(fā)展有限公司產(chǎn)品；CKX41 倒置生物顯微鏡：日本OLympus 公司產(chǎn)品；生物安全柜：中國(guó)濟(jì)南鑫貝西生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品；MCO-20AIC CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱： 松下健康醫(yī)療器械公司產(chǎn)品；Spectra Max i3 酶標(biāo)儀： 美國(guó)MD 公司產(chǎn)品；電子分析天平：梅特勒-托利多儀器有限公司產(chǎn)品；超聲波清洗儀：昆山超聲儀器有限公司產(chǎn)品；pH 計(jì)：上海雷磁儀器廠制造；GL-20G-Ⅱ型高速冷凍離心機(jī)： 上海安亭科學(xué)儀器廠制造；DK-8D 三溫三控水槽：上海博迅實(shí)業(yè)有限公司產(chǎn)品。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 瑪咖、黃精和桔梗水提物的制備 取一定量的瑪咖、黃精和桔梗干燥后機(jī)械粉碎，過(guò)60 目篩。 3個(gè)樣品各取40 g， 按照料液比1 g∶20 mL 加入到60 ℃蒸餾水中，攪拌均勻，超聲波（功率250 W）輔助提取30 min， 提取液經(jīng)過(guò)4 000 r/min 離心15 min，取上清液，將沉淀再次加入等量蒸餾水超聲輔助提取一次，再次離心15 min，合并上清液后，利用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至每個(gè)樣品體積為200 mL； 加入氯仿-正丁醇（3∶1，體積比）溶液，使樣品液與有機(jī)相溶液體積比為1∶3～1∶4， 振搖30 min 后，3 000 r/min 離心5 min，中間層為變性的游離蛋白層，分離兩相，使蛋白質(zhì)全部去除；水相中再加入其三分之一體積的有機(jī)溶液，重復(fù)2 次，有機(jī)相合并后可加水使得體積比為3∶1～4∶1， 3 000 r/min 離心10 min，上清液與所有水相合并在一起后冷凍干燥，得到3 個(gè)樣品的水提物備用[16-18]。

1.3.2 造模液的配制 稱取一定量BSA，溶于無(wú)糖無(wú)酚紅不完全DMEM 培養(yǎng)基中， 用10 mol/L 的氫氧化鉀調(diào)pH 值至10，并超聲至澄清。 稱取一定量的油酸和棕櫚酸，溶于少量含BSA 相應(yīng)不完全培養(yǎng)基中，使得FFA 溶液中油酸與棕櫚酸的摩爾比例為2∶1， 同 時(shí)FFA 與BSA 的 摩 爾 比 例 為6.6∶1，超聲至澄清。將BSA-FFA 復(fù)合物溶液pH 值調(diào)至7.4，用0.22 μm 過(guò)濾器過(guò)濾除菌。 然后加入稱取的一定量的葡萄糖和果糖，混合均勻，再次進(jìn)行過(guò)濾除菌，即得到所需造模液，于-20 ℃保存?zhèn)溆?，使用前孵育?7 ℃[19-20]。

1.3.3 樣品的配制 MTT 用樣品的配制：將黃精水提物和桔梗水提物按照質(zhì)量比為1∶1 混合得到黃精-桔梗水提混合物， 稱取一定量的瑪咖水提物和黃精-桔梗水提混合物， 分別溶于無(wú)血清的DMEM培養(yǎng)基， 配制成10 mg/mL 的模型組用母液，用0.22 μm 過(guò)濾器過(guò)濾除菌。 將配制的2 個(gè)樣品置于4 ℃冰箱備用。樣品的配制：將黃精水提物和桔梗水提物按照質(zhì)量比為1∶1 混合， 得到黃精-桔梗水提混合物，稱取一定量的瑪咖水提物和黃精-桔梗水提混合物，分別溶于配制好的造模液中， 配制成10 mg/mL 的母液， 用0.22 μm 過(guò)濾器過(guò)濾除菌后置于4 ℃冰箱備用。

1.3.4 MTT 法測(cè)定細(xì)胞存活率 HepG2 細(xì)胞培養(yǎng)于含新生牛血清10%（體積分?jǐn)?shù)）、青霉素100 U/mL和鏈霉素100 μg/mL 的DMEM 培養(yǎng)基中（下文簡(jiǎn)稱DMEM10）， 于溫度為37 ℃、CO2體積分?jǐn)?shù)為5%以及相對(duì)濕度為90%的培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)。 當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)至80%～90%融合時(shí)，移除舊培養(yǎng)液，用PBS 溶液潤(rùn)洗細(xì)胞層后用胰蛋白酶消化細(xì)胞，在顯微鏡下觀察細(xì)胞呈圓形時(shí)，吸出胰酶，加入3 mL DMEM10 終止胰蛋白酶消化反應(yīng)，將細(xì)胞用移液槍吹打成細(xì)胞懸液[21]。 取96 孔培養(yǎng)板，每孔加100 μL 細(xì)胞懸液，HepG2 細(xì)胞濃度為1×105個(gè)/mL，37 ℃培養(yǎng)24 h 后棄去培養(yǎng)液，用PBS 清洗1 次，每孔加入不同濃度的處理液100 μL，以含質(zhì)量分?jǐn)?shù)1% BSA 的DMEM培養(yǎng)基孵育細(xì)胞為對(duì)照。 培養(yǎng)24 h 后除去培養(yǎng)液，加入0.5 mg/mL MTT-DMEM 于37 ℃避光孵育4 h，再加入100 μL DMSO， 震蕩混勻以完全溶解MTT紫色結(jié)晶產(chǎn)物。 用酶標(biāo)儀在490 nm 處測(cè)定吸光度值， 并以對(duì)照組細(xì)胞的細(xì)胞存活率為100%計(jì)算其余組別的細(xì)胞存活率[22]。

1.3.5 細(xì)胞葡萄糖攝取能力的測(cè)定 各組細(xì)胞加樣處理24 h 后，棄去培養(yǎng)液，用PBS 洗1 次，換為葡萄糖濃度為12.5 mmol/L 的DMEM 培養(yǎng)基， 培養(yǎng)12 h 后取5 μL 上清液， 用葡萄糖測(cè)定試劑盒測(cè)定葡萄糖含量，計(jì)算葡萄糖消耗量[20]。

1.3.6 細(xì)胞內(nèi)糖原含量的測(cè)定 各組細(xì)胞加樣處理24 h 后，小心棄去培養(yǎng)液，用PBS 洗1 次，細(xì)胞用RIPA 裂解液裂解， 用糖原試劑盒測(cè)定胞內(nèi)糖原含量。 結(jié)果除以蛋白質(zhì)含量后，換算為與對(duì)照組的百分比為最終表示結(jié)果。

1.3.7 上清液及細(xì)胞內(nèi)TG、TC 含量的測(cè)定 各組細(xì)胞加樣處理24 h 后， 取50 μL 待測(cè)細(xì)胞上清液，用TG 試劑盒測(cè)定TG 含量，結(jié)果以模型組TG 含量的百分比表示（%）。

各組細(xì)胞加樣處理24 h 后， 小心棄去培養(yǎng)液，將板內(nèi)待測(cè)定細(xì)胞用PBS 潤(rùn)洗2 次后， 加入RIPA裂解液。 充分裂解后，用TG 試劑盒和TC 試劑盒測(cè)定TG 和TC 的含量， 結(jié)果以模型組TG 和TC 含量的百分比表示（%）[19]。

1.3.8 細(xì)胞內(nèi)ROS 水平測(cè)定 將處理的細(xì)胞用含有25 μmol/L DCFH-DA 的HBSS 在37 ℃條件下培養(yǎng)30 min， 然后用HBSS 清洗2 次后加入100 μL的HBSS。 用酶標(biāo)儀測(cè)定96 孔黑板中熒光物質(zhì)的發(fā)射光，結(jié)果以模型組ROS 水平的百分比表示（%）[23]。

1.3.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Origin 8.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差（±SD）表示。 并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行單因素顯著性分析，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 瑪咖、黃精和桔梗水提物的提取率

分別稱取瑪咖、黃精和桔梗各40 g，水提后，得到瑪咖、 黃精和桔梗的水提物的干質(zhì)量分別為12.12、18.4、16.36 g。 計(jì)算可得，瑪咖，黃精以及桔梗水提物均有較高的提取率， 分別為30.3%、46.0%、40.9%。

2.2 瑪咖復(fù)合黃精和桔梗對(duì)細(xì)胞增殖的影響

采用不同質(zhì)量濃度的瑪咖和黃精-桔?；旌衔锾幚砑?xì)胞24 h， 由圖1 可知， 瑪咖在質(zhì)量濃度為1 mg/mL 時(shí)， 細(xì)胞存活率與對(duì)照組相比沒(méi)有顯著差異；2 mg/mL 時(shí)，細(xì)胞存活率與對(duì)照組相比顯著降低（P＜0.05）。 因此，在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中，瑪咖的上樣質(zhì)量濃度不得超過(guò)1 mg/mL。 同理，黃精-桔?；旌衔锏暮罄m(xù)最大上樣質(zhì)量濃度也應(yīng)為1 mg/mL。 瑪咖和黃精-桔?；旌衔镆泽w積比1∶1 復(fù)配后，質(zhì)量濃度為0～2 mg/mL 時(shí)， 細(xì)胞存活率與對(duì)照組相比無(wú)顯著差異，而當(dāng)質(zhì)量濃度大于2 mg/mL 時(shí)，細(xì)胞存活率顯著下降。 因此得出，2 mg/mL 應(yīng)為瑪咖和黃精-桔?；旌衔镆泽w積比1∶1 復(fù)配后上樣的最大質(zhì)量濃度。

圖1 瑪咖和黃精-桔梗提取物處理24 h 對(duì)細(xì)胞增殖的影響Fig. 1 Effects of maca and HJJG extract on cell proliferation after 24 h treatment

2.3 瑪咖復(fù)合黃精和桔梗對(duì)糖脂代謝紊亂細(xì)胞糖吸收和胞內(nèi)糖原含量的影響

由圖2（a）可知，與模型組相比，瑪咖單獨(dú)作用時(shí)，僅在高劑量質(zhì)量濃度1 mg/mL 時(shí)能夠顯著降低細(xì)胞上清液葡萄糖含量（P＜0.05），而黃精-桔梗混合物在中（0.5 mg/mL）、高劑量（1 mg/mL）時(shí)均能夠顯著降低細(xì)胞上清葡萄糖含量（P＜0.05）。此外，瑪咖和黃精-桔?；旌衔锊煌壤龔?fù)配后的上清液葡萄糖含量均低于單獨(dú)作用時(shí)的含量， 當(dāng)瑪咖和黃精-桔梗混合物以1 mg/mL 質(zhì)量濃度復(fù)配時(shí)，上清液葡萄糖含量降低最顯著，下降約30%（P＜0.05）。 從圖中還可看出， 瑪咖和黃精-桔?；旌衔锔哔|(zhì)量濃度復(fù)配時(shí)， 其促進(jìn)細(xì)胞糖吸收的活性與陽(yáng)性對(duì)照MET相當(dāng)。 由圖2（b）可知，瑪咖單獨(dú)作用時(shí)在低、中、高質(zhì)量濃度時(shí)對(duì)細(xì)胞內(nèi)糖原水平均無(wú)顯著影響，黃精-桔?；旌衔飪H在高劑量質(zhì)量濃度1 mg/mL 時(shí)能夠顯著提高胞內(nèi)糖原相對(duì)含量（P＜0.05），而復(fù)配后的結(jié)果顯示， 高質(zhì)量濃度黃精-桔?；旌衔锱c低、中、高質(zhì)量濃度瑪咖分別復(fù)配時(shí)，其細(xì)胞內(nèi)糖原相對(duì)含量均高于單獨(dú)作用的相對(duì)含量；中、高質(zhì)量濃度的瑪咖與中質(zhì)量濃度的黃精-桔?；旌衔?， 高質(zhì)量濃度的瑪咖與低質(zhì)量濃度的黃精-桔梗混合物雖在單獨(dú)作用時(shí)對(duì)細(xì)胞內(nèi)糖原無(wú)顯著影響，但復(fù)配后均能顯著提高細(xì)胞內(nèi)糖原相對(duì)含量（P＜0.05），且高質(zhì)量濃度的瑪咖和高質(zhì)量濃度的黃精-桔梗復(fù)配混合，細(xì)胞內(nèi)糖原相對(duì)含量最高。 由以上可以得出，瑪咖和黃精-桔?；旌衔飶?fù)配后能夠顯著促進(jìn)細(xì)胞葡萄糖吸收及胞內(nèi)糖原轉(zhuǎn)化，具有調(diào)節(jié)糖代謝紊亂的作用，且當(dāng)1 mg/mL 的瑪咖和1 mg/mL 的黃精-桔梗混合物復(fù)配時(shí)，調(diào)節(jié)細(xì)胞糖代謝紊亂的效果最佳。

圖2 瑪咖和黃精-桔?；旌衔飳?duì)糖脂代謝紊亂細(xì)胞上清液葡萄糖和胞內(nèi)糖原的影響Fig. 2 Effects of maca and HJJG on supernatant glucose and intracellular glycogen with glucose-lipid metabolism disorder

2.4 瑪咖復(fù)合黃精和桔梗對(duì)糖脂代謝紊亂細(xì)胞胞內(nèi)TG、TC 和上清液TG 的影響

由圖3（a）可知，加樣處理24 h 后，與模型組相比， 瑪咖和黃精-桔?；旌衔飭为?dú)和復(fù)配后的樣品處理細(xì)胞，其胞內(nèi)TG 水平無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。由圖3（b）可知，瑪咖單獨(dú)作用時(shí)，在中、高質(zhì)量濃度均能顯著提高上清液TG 相對(duì)含量（P＜0.05），黃精-桔梗混合物在高質(zhì)量濃度時(shí)，能夠顯著提高上清液TG 相對(duì)含量（P＜0.05）。 而復(fù)配結(jié)果顯示，瑪咖和黃精-桔梗混合物在低質(zhì)量濃度復(fù)配時(shí)對(duì)細(xì)胞上清液TG 相對(duì)含量無(wú)顯著影響，在中、高質(zhì)量濃度復(fù)配時(shí)均可顯著提高細(xì)胞上清液TG 相對(duì)含量（P＜0.05）。胞外TG 含量升高的原因是由于細(xì)胞糖吸收增加，促進(jìn)了TG 的合成以及胞內(nèi)TG 的排出[22]。由圖3（c）可以看出， 中質(zhì)量濃度瑪咖復(fù)配高質(zhì)量濃度黃精-桔?；旌衔镆约案哔|(zhì)量濃度瑪咖復(fù)配高質(zhì)量濃度黃精-桔梗混合物均能夠顯著降低細(xì)胞內(nèi)TC 相對(duì)含量（P＜0.05），其中高質(zhì)量濃度瑪咖和高質(zhì)量濃度黃精-桔?；旌衔飶?fù)配效果最好，細(xì)胞內(nèi)TC 含量下降了約11%。 其可能是通過(guò)抑制TC 的合成或促進(jìn)TC 的分解，實(shí)現(xiàn)降低TC 水平[19，23]。 綜上可知，瑪咖和黃精-桔?；旌衔飶?fù)配分別為MH+HJM、MM+HJH、MH+HJH 組合時(shí)， 可顯著提高胞外TG 水平，并顯著抑制胞內(nèi)TC 含量，TC 是引起血脂異常的一個(gè)重要指標(biāo)，因此，瑪咖和黃精-桔?；旌衔飶?fù)配分別為MH+HJM、MM+HJH、MH+HJH 組合時(shí)，可顯著調(diào)節(jié)細(xì)胞脂代謝， 其中瑪咖與黃精-桔?；旌衔镔|(zhì)量濃度分別為1 mg/mL 進(jìn)行復(fù)配時(shí)，調(diào)節(jié)脂代謝的效果最佳。

圖3 瑪咖和黃精-桔梗混合物對(duì)糖脂代謝紊亂細(xì)胞內(nèi)TG，TC 和細(xì)胞上清液TG 的影響Fig. 3 Effects of maca and HJJG on intracellular TG，TC and supernatant TG with glucolipid-lipid metabolism disorders

2.5 瑪咖復(fù)合黃精和桔梗對(duì)細(xì)胞內(nèi)ROS 的影響

由圖4 可知，與模型組相比，高質(zhì)量濃度的瑪咖和中、 高質(zhì)量濃度的黃精-桔?；旌衔镌趩为?dú)作用時(shí)，均可不同程度降低胞內(nèi)熒光值。 除了低質(zhì)量濃度的瑪咖和低質(zhì)量濃度黃精-桔?；旌衔飶?fù)配時(shí)對(duì)胞內(nèi)熒光值無(wú)顯著影響外，其他復(fù)配組合均能夠顯著降低胞內(nèi)熒光值（P＜0.05）。 當(dāng)高質(zhì)量濃度的瑪咖和黃精-桔梗混合物復(fù)配時(shí)， 胞內(nèi)熒光值降低最顯著（P＜0.05），約為25%，也即高質(zhì)量濃度的瑪咖和黃精-桔?；旌衔飶?fù)配時(shí)與陽(yáng)性對(duì)照二甲雙胍具有相當(dāng)?shù)那宄齊OS 的能力[16]。

由以上結(jié)果可知， 瑪咖與黃精-桔?；旌衔锓謩e以高質(zhì)量濃度進(jìn)行復(fù)配時(shí)，能夠顯著促進(jìn)細(xì)胞糖吸收和糖原的合成和胞內(nèi)TG 的合成和排出， 同時(shí)降低細(xì)胞內(nèi)TC 含量和ROS 水平。 此外，質(zhì)量濃度分別為1 mg/mL 的瑪咖與黃精-桔梗混合物復(fù)配時(shí)調(diào)節(jié)糖脂代謝的效果最為顯著。

3 結(jié) 語(yǔ)

本實(shí)驗(yàn)得到瑪咖水提物的得率為30.3%， 黃精水提物的得率為46.0%， 桔梗水提物的得率為40.9%。 瑪咖和黃精-桔?；旌衔锓謩e單獨(dú)作用時(shí)，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)明顯影響的最大作用質(zhì)量濃度為1 mg/mL（P＞0.05）。 瑪咖和黃精-桔?；旌衔矬w積比1∶1 復(fù)配后， 對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)無(wú)明顯影響的最大作用質(zhì)量濃度為2 mg/mL（P＞0.05）。 瑪咖和黃精-桔?；旌衔锓謩e以質(zhì)量濃度1 mg/mL 復(fù)配時(shí)，能夠顯著促進(jìn)糖吸收和細(xì)胞內(nèi)糖原的合成， 同時(shí)降低細(xì)胞內(nèi)TC含量和ROS 水平。因此，高質(zhì)量濃度的瑪咖和黃精-桔?；旌衔飶?fù)配可顯著調(diào)節(jié)HepG2 模型細(xì)胞的糖脂代謝紊亂（P＜0.05）。

綜上所述，瑪咖、黃精和桔梗三者復(fù)配后能夠更有效地通過(guò)促進(jìn)糖吸收和細(xì)胞內(nèi)糖原合成，降低細(xì)胞內(nèi)膽固醇和ROS 水平，最終達(dá)到調(diào)節(jié)糖脂代謝的效果。 本文中提供了一種安全且無(wú)副作用的具有改善糖脂代謝紊亂的瑪咖和黃精-桔?；旌衔飶?fù)方，為瑪咖功能組方的研發(fā)提供理論參考，也可為糖尿病等慢性疾病患者飲食提供更多選擇。

圖4 瑪咖和黃精桔?；旌衔飳?duì)糖脂代謝紊亂細(xì)胞內(nèi)ROS 水平的影響Fig. 4 Effects of maca and HJJG on intracellular ROS levels with glucose and lipid metabolism disorders