孫 敏 田中偉

(新鄉(xiāng)醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院皮膚科，新鄉(xiāng)453003)

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IL-33/ST2/NF-κB在銀屑病中作用的研究進展①

孫 敏 田中偉

(新鄉(xiāng)醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院皮膚科，新鄉(xiāng)453003)

銀屑病是一種常見的炎癥性皮膚疾病。近年來的研究發(fā)現(xiàn)多種細胞因子在其發(fā)病過程中發(fā)揮著重要的作用。IL-33是新發(fā)現(xiàn)的IL-1家族的炎癥性細胞因子，通過與其受體ST2結(jié)合轉(zhuǎn)導信號于細胞內(nèi)，其后通過下游的NF-κB轉(zhuǎn)錄因子在細胞的增殖和分化中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。IL-33與銀屑病的發(fā)生和發(fā)展具有密切的相關性，本文主要綜述IL-33/ST2/NF-κB在銀屑病發(fā)生發(fā)展中作用的最新研究進展。

1 銀屑病，一種免疫介導的皮膚疾病

銀屑病是一種常見的炎癥性皮膚疾病，其發(fā)病率占全世界人口的2%～3%[1，2]。目前，銀屑病被認為是一種以免疫介導為主的炎癥性疾病，由固有免疫和適應性免疫的細胞和分子所介導[3]。銀屑病的皮損特征是紅斑、鱗屑及表皮增厚,組織學揭示了炎性浸潤及毛細血管的增生，其發(fā)病機制仍未被完全弄清楚，遺傳學研究表明一些易感基因與銀屑病相關，但是它的發(fā)病是由遺傳易感個體的免疫細胞及環(huán)境因素相互作用引起的[4]。T細胞、DC細胞及角質(zhì)形成細胞等參與了免疫調(diào)節(jié)過程，角質(zhì)形成細胞在應激狀態(tài)下釋放促炎因子如IL-6、IL-1β、TNF-α，這些細胞因子引起漿細胞樣DC細胞產(chǎn)生和分泌IFN-α，IFN-α能夠活化真皮層中的髓樣樹突狀細胞，這些髓樣樹突狀細胞能遷移到局部淋巴結(jié)及分泌IL-12和IL-23，IL-12和IL-23反過來活化初始輔助性T細胞(Th1、Th17、Th22)，Th1的活化引起了IFN-γ的增加，誘導趨化因子(CXCL9、 CXCL10、CXCL11)的合成，這些趨化因子募集更多的Th1細胞；類似地，Th17的活化導致IL-17的產(chǎn)生增加，誘導CCL20、CXCL1、CXCL2、CXCL8及IL-8的合成，進而募集更多的Th17細胞；活化的Th22細胞引起IL-22的增加。最終這些因素共同導致不可控制的炎癥發(fā)生和角質(zhì)形成細胞的增生[3]。IL-33是新發(fā)現(xiàn)的炎癥因子，NF-κB是免疫細胞中重要的轉(zhuǎn)錄因子[5]，新的研究提示它們在銀屑病的皮損中存在異常的表達[6，7]。本論文闡述IL-33和NF-κB在銀屑病中的最新進展。

2 IL-33/ST2/NF-κB在銀屑病中的作用

2.1 IL-33/ST2/NF-κB 信號通路 IL-33是2005年新發(fā)現(xiàn)的IL-1家族的細胞因子[8]，組成性的表達于多種人類的組織和細胞上，在皮膚組織細胞上呈現(xiàn)高表達。IL-33的異常與多種疾病發(fā)生發(fā)展相關，包括特應性皮炎，哮喘、類風濕關節(jié)炎，腫瘤，乳糜瀉等[9]。IL-33的受體是ST2，主要有二種亞型，即跨膜型(ST2L)和可溶型(sST2)。經(jīng)典的IL-33/ST2信號通路是IL-33結(jié)合到細胞膜上的ST2L和IL-1RAcP (Interleukin 1 receptor accessory protein)組成的異源二聚體將信號轉(zhuǎn)導到細胞內(nèi)，通過募集胞漿中的MyD88 (Myeloid differentiation factor 88)激活下游的IRAK1/4(Interleukin 1 receptor-associated kinase)和TRAF6(Tumor necrosis factor receptor-associated factor 6)，活化后的TRAF6可以誘導下游的MAPK(Mitogen-activated protein kinase)和IKK的活化，最后導致NF-κB和 AP-1轉(zhuǎn)位到細胞核內(nèi)而發(fā)揮調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄和表達的作用[10]。另外，在不同的細胞類型上，IL-33也可以激活JAK2和mTOR通路[11,12]。

IL-33/ST2信號通路可受到多種機制的調(diào)節(jié)，其中研究比較清楚的是來自于胞漿中可溶性的sST2的調(diào)節(jié)。sST2直接和IL-33結(jié)合，作為一個誘餌受體和ST2L相競爭，從而阻斷或封閉體內(nèi)外IL-33誘導的炎癥性細胞因子的表達。在變應原誘導的小鼠炎癥性模型血清中有高水平的sST2的表達，用sST2預處理小鼠則可減輕炎癥程度[10]。

2.2 IL-33/ST2在銀屑病的作用 最新研究顯示在不同類型的銀屑病患者如尋常型銀屑病、銀屑病型關節(jié)炎、膿皰型銀屑病患者血清中IL-33含量均較健康對照組明顯升高，并與血清中TNF-α水平呈正相關，用抗TNF-α治療后IL-33的水平也下降[6]。Hueber等[13]通過活組織檢測發(fā)現(xiàn)，與銀屑病患者非病灶區(qū)皮膚組織相比，病灶區(qū)和病灶周圍皮膚組織標本IL-33和ST2的表達均顯著增加。Balato等[14]也發(fā)現(xiàn)銀屑病患者皮損區(qū)IL-33和ST2的表達顯著增多，但不同的是血清中沒有檢測到IL-33。進一步的研究發(fā)現(xiàn)IL-33主要由表皮的角質(zhì)形成細胞產(chǎn)生，IL-17A、TNF-α和IFN-γ均可以時間和劑量依賴性誘導表皮角質(zhì)形成細胞IL-33的表達，其機制是通過EGFR、ERK、p38和STAT1的磷酸化等[13，15，16]。將IL-33注射到小鼠耳朵皮內(nèi)，結(jié)果顯示與PBS注射組相比較，IL-33注射組耳朵厚度增厚，血清中含有更多的Th2型細胞因子(IL-5、IL-13)，這表明IL-33能誘導炎癥性皮損的形成。這些研究提示 IL-33 在銀屑病的發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用，炎癥的刺激可以促進皮膚角質(zhì)細胞產(chǎn)生IL-33,IL-33反過來可以促進炎癥的進一步發(fā)展，IL-33與其他促炎和抗炎細胞因子之間存在著復雜的網(wǎng)絡調(diào)節(jié)，但其具體調(diào)節(jié)機制還有待進一步研究，這將為靶向IL-33及其信號通路的治療提供基礎。

2.3 NF-κB在銀屑病的作用 NF-κB是細胞內(nèi)一個重要的轉(zhuǎn)錄因子，屬于Rel家族一員。NF-κB由5種相關的蛋白質(zhì)構(gòu)成，包括p50(NF-κB)、52(NF-κB)、p65(RelA)、RelB和c-Rel(Rel)，這些蛋白都具有一個長氮末端Rel同源結(jié)構(gòu)域(RHD)，Rel同源結(jié)構(gòu)域由大約300氨基酸構(gòu)成。NF-κB蛋白質(zhì)以二聚體的形式(同源二聚體或者異源二聚體)存在于細胞內(nèi)，NF-κB蛋白質(zhì)能與DNA結(jié)合。Rel同源結(jié)構(gòu)域能直接和DNA結(jié)合，而其他不同的蛋白結(jié)構(gòu)域則相對應地通過募集活化因子或輔阻遏物對靶基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生正向或負向作用。NF-κB蛋白p65 (RelA)、RelB、c-Rel(Rel)具有轉(zhuǎn)錄活化結(jié)構(gòu)域，能啟動轉(zhuǎn)錄。而p50和p52沒有轉(zhuǎn)錄活化結(jié)構(gòu)域，能通過與p65、RelB、c-Rel形成異源二聚體或者與結(jié)合κB區(qū)域或者與非Rel轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合影響轉(zhuǎn)錄[17]。NF-κB通路是由轉(zhuǎn)錄因子NF-κB、NF-κB的抑制劑(IκB)、IκB激酶(IKK)構(gòu)成，活化的IκB激酶能使IκB磷酸化，從而導致IκB降解，活化的NF-κB進入細胞核增加或降低靶基因的表達[18]。

NF-κB不僅參與調(diào)控致炎因子基因的表達也參與細胞的增殖、分化、凋亡。Hong等[19]的研究表明與銀屑病無皮損區(qū)相比，銀屑病皮損區(qū)磷酸化的IkBα顯著增加。Hiroko等為了研究IL-33/ST2L信號通路能夠活化NF-κB，使用EMSA實驗(Electrop-horetic mobility shift assay,EMSA)分析NF-κB和DNA結(jié)合活性；使用免疫印跡分析IkBα的降解情況。IL-33與ST2L結(jié)合能誘導NF-κB的活化，rIL-33及rIL-1β共刺激EL-4細胞，然后提取細胞漿和細胞核，通過EMSA清晰地表明了細胞內(nèi)IL-33及IL-1β信號通路反應和ST2L、IL-1βL的表達是相符合的，用rIL-33刺激能特定地誘導EL-4細胞中NF-κB和DNA結(jié)合[5]。與健康人皮膚相比，銀屑病皮損及病灶周圍的皮膚中磷酸化的NF-κB水平增加。NF-κB不僅在炎癥信號通路、細胞增生、分化和凋亡起非常重要的作用，在銀屑病發(fā)生和發(fā)展中也是一個重要的調(diào)控者[20]。銀屑病的患者機體功能紊亂不僅發(fā)生在皮膚角質(zhì)層細胞水平，也發(fā)生在固有免疫和適應性免疫方面，尤其是與T細胞相關的過程。NF-κB通過它具有的效應(調(diào)控細胞增殖及分化、凋亡、細胞因子和趨化因子的產(chǎn)生)將變化的角質(zhì)層細胞和免疫細胞聯(lián)系在一起。表皮角質(zhì)形成細胞層中凋亡信號減弱導致了程序性細胞死亡速率的改變，表皮細胞更新周期縮短(正常皮膚311 h,而銀屑病皮損區(qū)細胞36 h)[7]。NF-κB信號通路活化導致了凋亡信號比如bclxL及細胞周期蛋白之間的不平衡[21]。

3 干預NF-κB能改善銀屑病的中草藥

中草藥對銀屑病的治療有著悠久的歷史，臨床上治療銀屑病除遵循中醫(yī)藥學辯證施治原則外，可辯證選用中藥或提取中藥的主要有效成分來對銀屑病進行治療。目前推薦主要通過使用免疫調(diào)節(jié)物質(zhì)(如轉(zhuǎn)移因子)和維A酸類藥物、中藥來治療銀屑病，而慎用免疫抑制劑(甲氨蝶呤)及糖皮質(zhì)激素。

葫蘆素是從葫蘆科植物中分離出來的，屬于三萜類化合物家族一員，具有廣泛的生物學和藥理學作用。葫蘆素B作為葫蘆素中的一個成員已經(jīng)被應用于臨床，如治療細菌性痢疾、腸炎和急性扁桃炎等[22]。葫蘆素B具有抗癌和抗炎的作用，葫蘆素B能通過調(diào)控TNF-α、IFN-γ、IL-6及NF-κB等發(fā)揮抗炎作用[23,24]。Jun等[25]從細胞水平和動物水平檢測葫蘆素B能否影響咪喹莫特誘導的角質(zhì)形成細胞的免疫反應，結(jié)果提示咪喹莫特能誘導SV-HEKs釋放炎癥細胞因子CCL-20和IL-8，而預先24 h給予葫蘆素B能顯著地抑制咪喹莫特誘導的炎癥細胞因子的蛋白表達水平，其機制與NF-κB相關。

甘草酸是三萜類化合物，是從傳統(tǒng)中藥甘草植物的根部提取出來的，甘草酸具有抗過敏、抗氧化、抗?jié)兗翱寡苌伞８什菟峒捌溲苌镉捎诰哂械投拘杂糜谥委熝装Y性皮膚疾病。Xiong等[26]的研究結(jié)果表明甘草酸能顯著地使HaCaT細胞分泌的ICAM-1減少，抑制單核細胞黏附到角質(zhì)形成細胞，抑制p65核轉(zhuǎn)位和ERK/p38 MAPK的磷酸化，延緩小鼠銀屑病樣皮損的發(fā)展及改善發(fā)展期的銀屑病樣皮損。

植物鞘氨醇是一種天然鞘氨醇類堿，對維持皮膚健康是非常重要的。研究顯示植物鞘氨醇能誘導人類角質(zhì)形成細胞的分化及抑制TPA誘導的無毛小鼠炎癥性角質(zhì)增生及炎癥反應，抑制IL-23注射組的小鼠耳朵腫脹及銀屑病樣皮損的形成，這些作用是通過抑制NF-κB、JAK/STAT、MAPKs信號通路而實現(xiàn)[27,28]。

杜鵑素一直以來被當做古老的中藥草用于治療炎癥性皮膚疾病。杜鵑素能通過抑制NF-κB、IκB及IKKα/β的磷酸化來抑制NF-κB的核移位；杜鵑素能夠抑制MAPK(包括ERK1/2，p38)，降低JNK及PI3K/Akt信號通路，減少用TNF-α及IFN-γ刺激的角質(zhì)形成細胞分泌的致炎介導物，如COX-2、ICAM-1、IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、IFN-γ、CLCX-1和CCL-17；局部應用杜鵑素能夠改善TNCB誘導的小鼠耳朵皮膚炎癥[29]。

4 結(jié)語與展望

綜上所述，銀屑病是一種常見的免疫介導的炎癥性皮膚疾病。IL-33、NF-κB在銀屑病發(fā)病過程中起著非常重要的作用，IL-33與受體ST2結(jié)合活化下游通路NF-κB從而引起炎癥反應。探索中草藥有效成分來抑制IL-33/ST2/NF-κB信號通路可能為臨床治療銀屑病提供新的干預措施。

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[收稿2015-11-02 修回2016-04-25]

(編輯 許四平)

10.3969/j.issn.1000-484X.2016.11.033

孫 敏(1988年-)，女，在讀碩士，主要從事銀屑病發(fā)病機制免疫相關性研究，E-mail:346889686@qq.com。

及指導教師：田中偉(1971年-)，男，博士，教授，主任醫(yī)師，碩士導師，主要從事增殖性皮膚病發(fā)病機制免疫相關性研究，E-mail:zhonwt@163.com。

R392

A

1000-484X(2016)11-1718-04

①本文為河南省教育廳科學技術研究重點項目(13A320852)。