高效液相色譜法測定復(fù)方林可霉素滴耳液中鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉的含量

摘 要：本文基于高效液相色譜檢測技術(shù)，建立了一種同時檢測方林可霉素滴耳液中鹽酸林克霉素和地塞米松磷酸鈉含量的方法，并對方法的精密度、結(jié)果重現(xiàn)性、回收率等進行考察。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜;鹽酸林可霉素;地塞米松磷酸鈉;精密度

一、前言

復(fù)方林可霉素滴耳液是一種藥品市場上常見的西藥，在治療由敏感型細菌所引起的外耳炎和急慢性中耳炎癥狀上有非常好的療效，其所含有的有效成分主要為鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉。復(fù)方鹽酸林可霉素治療中耳炎疾病中主要起到療效的化學(xué)物質(zhì)為鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉。本文基于現(xiàn)有高效液相色譜儀器平臺，建立一種能夠同時檢測復(fù)方林可霉素滴耳液中鹽酸林克霉素和地塞米松磷酸鈉含量的方法。

二、實驗過程

（一）儀器與試劑

實驗使用的鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)均采購于中國食品藥品檢定研究院;實驗使用的復(fù)方林可霉素滴耳液（規(guī)格25mL/支）采購于魯銀藥業(yè)公司;實驗室用的甲醇、乙腈、四硼酸鈉等試劑均為色譜純，采購于阿拉丁公司。

實驗使用的高效液相色譜儀由安捷倫公司提供，型號為Agilent 1100，配套的脫氣機型號為G1322A、流量泵為G1311A四元泵、自動進樣儀為G1313A、柱溫箱為G1316A、檢測器為G1314A紫外檢測器。實驗使用的高精密電子天平采購于瑞士METTER TOLEDO 公司，型號為AE100;實驗使用的超純水儀采購于法國Millipore公司，型號為MER-300B。

（二）實驗方法

（1）色譜儀器工作條件

色譜使用的色譜柱為Diamonsil C18色譜柱;流動相：甲醇-乙腈-0.06mol/L四硼酸鈉溶液;檢測器：紫外光檢測器;檢測方法：變換波長法，214nm波長下，保留時間在0-10min，241nm波長下，保留時間在10-16min;色譜柱溫度：35℃;流動相流速：1.0mL/min;進樣：每次自動進樣10μL。

（2）溶液配置

使用天平準(zhǔn)確稱取100mg鹽酸林可霉素標(biāo)準(zhǔn)樣品，使用去離子水稀釋，定容到100mL容量瓶中，此標(biāo)準(zhǔn)溶液記做A溶液;使用天平準(zhǔn)確稱取5mg地塞米松磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)樣品，使用去離子水稀釋，定容到500mL容量瓶中，此標(biāo)準(zhǔn)溶液記做B溶液;使用移液槍移取10mL復(fù)方林可霉素滴耳液樣品，定容到50mL容量瓶中，記做供試品溶液。

三、結(jié)果與討論

（一）回歸方程現(xiàn)行關(guān)系考察

使用移液槍分別移取不同體積的A、B溶液，并稀釋定容，配置一系列濃度梯度的鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，對每個溶液按照2.2（1）所描述的儀器工作條件進行檢測，以兩種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的特征峰峰面積為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的濃度為橫坐標(biāo)，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，并使用軟件計算線性回歸方程和相關(guān)系數(shù)。計算的到的鹽酸林可霉素標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：Y=2028X-24181（R=0.9998），地塞米松磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為：Y=17234X-23999（R=0.9997）。根據(jù)配置的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度梯度參數(shù)，可以表明，鹽酸林美素樣品在1220-12200mg/L、地塞米松磷酸鈉在9.90-99.00mg/L濃度范圍內(nèi)，表現(xiàn)出了良好的現(xiàn)行關(guān)系。

（二）精密度考察

按照2.2（1）所屬的色譜工作條件，對固定濃度的鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液進行平行檢測7次，根據(jù)檢測結(jié)果計算RSD，考察建立的方法的精密度。結(jié)果表明，鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉的色譜峰峰面積RSD分別為2.1%和1.5%，兩種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的檢測RSD控制在1.0%以下，說明建立的檢測方法精密度很好。

（三）樣品穩(wěn)定性考察

使用樣品溶液為檢測對象，以完成制備樣品溶液制備開始計時，分別保存樣品0、24、48、72h，按照2.2（1）所述的色譜工作條件，對不同保存時間的樣品進行高效液相色譜檢測，計算檢測結(jié)果RSD，考察樣品的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定性。結(jié)果表明，鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉的色譜峰峰面積RSD分別為1.2%和1.8%，說明制備的樣品在72h內(nèi)都能保持良好的化學(xué)穩(wěn)定性。

（四）樣品檢測結(jié)果重現(xiàn)性考察

按照2.2（2）所述的供試品溶液配制方法配制樣品，準(zhǔn)確移取10μL溶液樣品按照2.2（1）所述的色譜工作條件，對樣品進行5次平行檢測。根據(jù)檢測結(jié)果和回歸方程計算樣品中鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉平均含量和RSD。結(jié)果表明，樣品中鹽酸林可霉素平均含量為101242mg/L，地塞米松磷酸鈉平均含量為652mg/L。鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉檢測RSD分別為1.58%和1.27%，檢測結(jié)果重現(xiàn)性好。

（五）樣品回收率考察

按照2.2（2）所述的供試品溶液配制方法配制5份復(fù)方鹽酸林可霉素滴耳液樣品，根據(jù)樣品中鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉的含量加入一定體積鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液進行混合定容。按照2.2（1）所述的色譜工作條件，對混合樣品進行檢測，計算鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉物質(zhì)的回收率。結(jié)果如表1所示。從表1可知，鹽酸林可霉素的回收率在96.01%-101.61%之間，地塞米松磷酸鈉的回收率在96.42%-99.70%之間，RSD分別為2.14%和1.26%。

四、結(jié)論

采用變換檢測波長的儀器檢測器，在高效液相色譜儀器上建立了建立了復(fù)方林可霉素滴耳液中鹽酸林可霉素和地塞米松磷酸鈉的含量測定方法，通過實驗考察，建立的方法具有標(biāo)準(zhǔn)曲線現(xiàn)行關(guān)系好、方法精密度高、樣品回收率好、樣品檢測結(jié)果重現(xiàn)性好的技術(shù)特點。

參考文獻：

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作者簡介：

劉翠（1984-）;性別：女，民族：漢 籍貫：遼寧省營口市，學(xué)歷：碩士，畢業(yè)于新疆大學(xué);現(xiàn)有職稱：中級工程師;研究方向：分析化學(xué)。