周 潔，石納玉，金雪靜，張治芬

(1.杭州市婦產(chǎn)科醫(yī)院生殖內(nèi)分泌中心，浙江 杭州 310008；2.杭州市婦產(chǎn)科醫(yī)院婦科，浙江 杭州 310008)

多囊卵巢綜合征(polycystic ovarian syndrome，PCOS)為女性育齡期常見的疾病之一，在不孕癥女性中所占比例較高[1]，主要表現(xiàn)為稀發(fā)排卵或無排卵、不孕、高雄激素血癥、胰島素抵抗等，高達一半的PCOS患者超重或肥胖[2]，其病因復(fù)雜，發(fā)病機制尚不清楚。胰島素抵抗和高雄激素血癥是PCOS患者的主要代謝紊亂特征，脂肪組織堆積也具有重要提示作用[3]。Apelin是一種由脂肪細胞分泌產(chǎn)生，具有多種生物活性的多肽類物質(zhì)[4]，在子宮、卵巢、心、腦、肺等不同組織中均有分布。研究發(fā)現(xiàn)Apelin可調(diào)節(jié)成骨細胞、內(nèi)皮細胞、肌細胞等細胞的增殖和分化[5]，在胰島素抵抗和能量代謝方面具有改善糖脂代謝的作用，在二型糖尿病、高血壓等病理過程中發(fā)揮“保護因子”的作用[6]。介于PCOS為一類代謝異常綜合征人群，因此推測Apelin可能在PCOS糖脂代謝中發(fā)揮重要作用。本文基于以上假設(shè)，深入探討血清Apelin在PCOS中的意義。

1資料與方法

1.1臨床資料

選擇杭州市婦產(chǎn)科醫(yī)院2016年1月至2018年6月多囊卵巢綜合征患者200例作為PCOS組，同期健康體檢女性200例為對照組。納入標準：①PCOS患者符合2003年修訂的鹿特丹PCOS診斷標準；②對照組月經(jīng)正常；③兩組資料完整；④簽署知情同意書。排除標準：①甲狀腺功能亢進、甲狀腺功能減退、高泌乳素血癥等其它內(nèi)分泌疾病者；②糖尿病等糖代謝異常者；③高脂血癥等脂代謝異常者；④合并炎癥、心、肝、腎、腦、造血系統(tǒng)等疾病者，惡性腫瘤者，精神性疾病者。

1.2研究方法

收集兩組患者的年齡、體重指數(shù)、收縮壓、舒張壓、空腹血糖(fasting plasma glucose，F(xiàn)PG)、空腹胰島素(fasting insulin，F(xiàn)INS)、糖化血紅蛋白(glycated hemoglobin，GHB)、胰島素抵抗指數(shù)(homeostasis model assessment-insulin resistance index，HOMA-IR)、甘油三脂(triglyceride，TG)、總膽固醇(total cholesterol，TC)、低密度脂蛋白(low-density lipoprotein，LDL)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein，HDL)、載脂蛋白B(apolipoprotein B，ApoB)等臨床資料和實驗室檢驗結(jié)果。

PCOS治療方案：200例PCOS患者給予二甲雙胍(體重<60kg給予750mg/d；60～100kg給予1 000mg/d；體重>100kg給予1 500mg/d)，共治療3個月。

血清Apelin水平測定：PCOS患者治療前和治療后、對照組體檢當天采集外周靜脈血4mL，離心(3 000r/min)15min，分離血清，采用酶聯(lián)免疫吸附實驗法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)測定Apelin水平(試劑盒購自武漢優(yōu)爾生公司)，具體方法如下：常溫下在凍干標準品瓶中加入離子水將Apelin濃度調(diào)為250pg/mL，靜置15min，把Apelin全部溶解，將標準品倍比梯度稀釋溶液依次加入檢測孔中(標準品稀釋濃度從0～250pg/mL，標準曲線取7個點)。計算一次實驗需要的板條數(shù)，并取出全部板條放在框架內(nèi)，將標本和不同濃度標準品加入到相應(yīng)孔中，用封板膠紙封住反應(yīng)孔孵育120min，加入洗滌液洗板5次；加入生物素化抗體工作液孵育60min，洗板5次；加入酶結(jié)合物工作液孵育20min，洗板5次；加入顯色劑TMB孵育20min，加入終止液，使用酶標儀測定波長450nm處吸光度值。以標準品濃度吸光度值為坐標，繪制標準曲線，根據(jù)標準曲線計算樣品Apelin濃度。

1.3統(tǒng)計學(xué)分析

2結(jié)果

2.1兩組患者一般資料比較

PCOS組年齡、收縮壓、舒張壓與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，PCOS組體重指數(shù)大于對照組(t=9.770，P<0.05)，見表1。

表1 兩組患者一般資料比較

2.2兩組血清Apelin水平比較

PCOS組血清Apelin水平高于對照組(t=19.320，P<0.05)，見表2。

表2 兩組血清Apelin水平比較

2.3 PCOS患者治療前后血清Apelin水平比較

PCOS患者治療后血清Apelin水平低于治療前(t=39.616，P<0.05)，見表3。

表3 PCOS患者治療前后血清Apelin水平比較

2.4兩組糖代謝比較

PCOS組FPG、FINS、GHB、HOMA-IR均高于對照組(t=7.453、20.935、9.588、10.295，均P<0.05)，見表4。

表4 兩組患者糖代謝比較

2.5兩組脂代謝比較

PCOS組TG、LDL、ApoB水平高于對照組(t=7.544、5.115、4.992，均P<0.05)，TC、HDL水平和對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表5。

表5 兩組脂代謝比較

2.6 PCOS患者血清Apelin與其它指標相關(guān)性

PCOS患者血清Apelin與體重指數(shù)、FPG、FINS、GHB、HOMA-IR呈正相關(guān)(r=0.597、0.524、0.546、0.495、0.471，均P<0.05)，與TG、TC、LDL、HDL、ApoB無相關(guān)性(P>0.05)，見表6。

表6 PCOS患者血清Apelin與其它指標相關(guān)性

3討論

3.1 PCOS患者存在糖脂代謝紊亂

PCOS是由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用的一種內(nèi)分泌代謝紊亂綜合征，以肥胖、不孕、胰島素抵抗為主要臨床特征[7]。PCOS和胰島素抵抗關(guān)系密切，肥胖是胰島素抵抗發(fā)生最常見的危險因素，肥胖是一部分PCOS不孕或生殖功能下降女性首先出現(xiàn)的臨床特征[8]。無排卵或稀發(fā)排卵的PCOS患者經(jīng)過改善生活方式，可恢復(fù)正常排卵，研究表明PCOS患者恢復(fù)排卵和內(nèi)臟脂肪持續(xù)減少關(guān)系密切[9-10]，胰島素抵抗相關(guān)脂肪因子和肥胖均影響PCOS患者卵泡發(fā)育[11]。因此與肥胖、胰島素抵抗、代謝紊亂關(guān)系密切的指標在探討PCOS病因?qū)W研究中具有重要價值。本文發(fā)現(xiàn)與健康體檢者比較，PCOS患者體重指數(shù)、FPG、FINS、GHB、HOMA-IR、TG、LDL、ApoB升高，表明PCOS患者存在糖脂代謝紊亂。

3.2 Apelin在PCOS糖脂代謝中的作用

Apelin參與內(nèi)分泌調(diào)節(jié)、心血管功能調(diào)節(jié)、細胞增殖、免疫調(diào)節(jié)、體液平衡等過程，可通過旁分泌或自分泌方式作用于不同組織，在肥胖、動脈粥樣硬化、高血壓等疾病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用[12-14]。Apelin在糖代謝、脂代謝和肥胖等方面作用比較活躍，參與多種疾病的糖脂代謝過程[15-17]，Apelin作為有益的脂肪因子，對胰島素分泌有一定調(diào)控作用，可通過不同信號通路調(diào)控糖脂代謝[18]；在糖尿病并發(fā)視網(wǎng)膜病變患者血清中Apelin水平升高，血清Apelin水平隨著視網(wǎng)膜病變病程加重而增加，提示血清Apelin水平和糖尿病并發(fā)視網(wǎng)膜病變患者的糖脂代謝關(guān)系密切[19]。本文對PCOS患者血清Apelin水平進行研究，發(fā)現(xiàn)與健康體檢者比較，PCOS患者血清Apelin水平升高，治療后血清Apelin水平低于治療前，PCOS患者血清Apelin與體重指數(shù)、FPG、FINS、GHB、HOMA-IR呈正相關(guān)，與TG、TC、LDL、HDL、ApoB無相關(guān)性，提示血清Apelin水平可用于評價PCOS患者的治療效果。另外，Apelin通過發(fā)揮旁分泌、自分泌效應(yīng)參與PCOS代謝紊亂過程，可作為“保護因子”應(yīng)激性增高以對抗糖代謝異常。血清Apelin和脂代謝指標關(guān)系不大，分析可能與研究例數(shù)偏少有關(guān)，需進行大樣本量研究探討血清Apelin與PCOS患者脂代謝指標的關(guān)系。

綜上所述，PCOS患者血清Apelin水平升高，Apelin參與PCOS的糖代謝過程，監(jiān)測血清Apelin水平在評價PCOS療效中具有潛在價值。