劉龍?jiān)疲螘悦?，方麗波，劉修樹，何曉?/p>

(1 合肥職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程學(xué)院，安徽 合肥 230000；2 皖西學(xué)院生物與制藥工程學(xué)院，安徽 六安 237012)

隨著醫(yī)藥行業(yè)的發(fā)展，藥物劑型越來越多種多樣。經(jīng)皮給藥系統(tǒng)逐漸被廣泛應(yīng)用，越來越多藥物的研究方向開始轉(zhuǎn)向經(jīng)皮給藥系統(tǒng)。巴布劑是用水溶性的高分子聚合物作為基質(zhì)骨架材料的外用貼劑，由于具有載藥量大、給藥方便、無刺激、可以隨時(shí)終止給藥、反復(fù)揭貼、劑量準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，在醫(yī)藥行業(yè)也得了快速發(fā)展[1]。

丹皮酚是從毛茛科牡丹花的根皮中提取出來的一種中藥材，具有催眠、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、解熱、抗炎、抗菌等藥理作用[2]。除此之外，丹皮酚還廣泛應(yīng)用于日化用品，這是由于丹皮酚還能有效抑制細(xì)胞內(nèi)O2·自由基的產(chǎn)生，有使皮膚增白的作用，可將皮膚中沉積得色素還原，使其退色，具因此有消淤淡斑、消炎、消腫、止痛、抗過敏、抗病毒的作用[3]。目前市場(chǎng)上有丹皮酚片劑和丹皮酚軟膏劑。片劑順應(yīng)性差，有首過效應(yīng)；軟膏劑使用方便，但劑量不易控制。丹皮酚巴布劑屬于中藥的新型改良劑型，能夠改善機(jī)體的耐受性，易吸收，劑量易于控制，穩(wěn)定性好，能夠彌補(bǔ)目前市售劑型的缺點(diǎn)，提高丹皮酚的用藥安全性和使用順應(yīng)性[4]。

本文通過單因素和正交實(shí)驗(yàn)研究丹皮酚巴布劑基質(zhì)的處方配比，希望為丹皮酚巴布劑的研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與儀器

1.1 主要試劑

甘油、丙二醇、聚乙烯醇、三乙醇胺、檸檬酸、檸檬酸鈉等試劑均為分析純;高嶺土、明膠、羧甲基纖維素鈉、卡波姆940等藥品均為藥用級(jí);蒸餾水(娃哈哈集團(tuán));丹皮酚提取物。

1.2 主要儀器

電子天平，上海實(shí)驗(yàn)儀器廠；ZK-82A真空干燥箱，上海實(shí)驗(yàn)儀器廠；DF-1集熱式磁力攪拌器，江蘇金城國(guó)勝實(shí)驗(yàn)儀器廠；BC-W201恒溫水浴鍋，上海貝凱生物化工設(shè)備有限公司；初黏力測(cè)定儀，持黏力測(cè)定裝置，測(cè)試用鋼球。

2 方法與評(píng)價(jià)

2.1 工藝流程

首先將蒸餾水、甘油、丙二醇混合成均勻溶液，取適量卡波姆940加入混合溶液過夜充分溶脹后，用三乙醇胺調(diào)pH至8.0。另娶等量明膠、聚乙烯醇、CMCNa加混合溶液，攪拌溶脹。再取高嶺土加混合溶液后混合成均勻的懸濁液。最后將溶脹后的卡波姆940溶液，明膠、聚乙烯醇、CMCNa混合溶液，高嶺土混懸液和檸檬酸及檸檬酸鈉混合，水浴攪拌，涂布。用該法制作成的巴布劑形性比較好，工藝方法簡(jiǎn)單，操作方便[6]。本處方中高嶺土為賦形劑 ；明膠，CMCNa，聚乙烯醇為增粘劑；甘油，丙二醇，卡波姆940為保濕劑；檸檬酸，檸檬酸鈉為交聯(lián)劑。

2.2 評(píng)價(jià)指標(biāo)

以各組分不同配比形成巴布劑基質(zhì)的初黏力、持黏力和感官綜合評(píng)價(jià)得分作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，進(jìn)行綜合評(píng)分[7-9]。感官指標(biāo)測(cè)試人員由五人組成，結(jié)果取平均值，三項(xiàng)之和記為感官綜合評(píng)分，最高總分是25分。

初黏力測(cè)定方法：把初粘性測(cè)試儀中的傾斜板調(diào)整角度，至與水平面成30度角，將供試品巴布貼劑的粘性面向上，固定在初粘性測(cè)試儀的傾斜板上。用不銹鋼球置于傾斜板上的鋼球放置區(qū)，調(diào)整好初始位置后釋放鋼球，球會(huì)滾動(dòng)并經(jīng)過巴布貼劑的黏性面，能夠粘住的最大球號(hào)鋼球，記為初黏力評(píng)價(jià)指標(biāo)。

持黏力測(cè)定方法：把貼有供試品巴布劑的實(shí)驗(yàn)板垂直吊掛在持黏力測(cè)定儀的實(shí)驗(yàn)架上，按照標(biāo)準(zhǔn)操作，下端懸掛上規(guī)定重量的砝碼，供試品巴布劑完全脫離實(shí)驗(yàn)架的時(shí)間記為巴布劑的持黏力評(píng)價(jià)指標(biāo)。

感官綜合評(píng)價(jià)：考慮到涂展性和均勻性是可以通過涂布機(jī)的參數(shù)控制的，所以選擇圖展性、皮膚追隨性、基質(zhì)殘留度和反復(fù)揭帖性為供試品巴布劑的性能評(píng)價(jià)指標(biāo)。每一項(xiàng)的檢測(cè)的具體方式如下：圖展性采用粘基力判別方法，涂布時(shí)膏體不斷條為10分，段條嚴(yán)重以至于無法涂布為0分，其余對(duì)比滿分和零分，酌情給分；皮膚追隨性是日本評(píng)價(jià)巴布劑的常用方法，將供試品巴布劑貼于成年男性手腕背部，用大力甩10下，不脫落者為10分，甩8下脫落為8分，依次為6分、4分、2分；基質(zhì)殘留度根據(jù)每次揭帖后均留住皮膚的基質(zhì)殘留的多少，完全無基質(zhì)殘留在皮膚者為10分，根據(jù)由少到多依次遞減8分、6分、4分、2分；反復(fù)揭帖性是將成型巴布劑反復(fù)揭開、黏貼于手腕背部，重復(fù)3次，揭開或黏貼的間隔為5 min。第三次黏貼于背部后大力甩10下不脫落者為10分，甩8下脫落為8分，如此遞減依次為6分、4分、2分。

2.3 基質(zhì)配方比例研究

在丹皮酚巴布劑的制作過程中，輔料分為兩種，第一種輔料如甘油、丙二醇等，在同類實(shí)驗(yàn)中常被用到，已有較理想的配方范圍[10]，且他們不是重要的影響因素，故預(yù)先通過單因素實(shí)驗(yàn)確定用量，不納入正交實(shí)驗(yàn)考察范圍。第二種輔料是影響重大的，他們的用量會(huì)影響丹皮酚巴布劑的各項(xiàng)評(píng)價(jià)指標(biāo)，如卡波姆940、CMC-Na、高嶺土和明膠。

2.4 單因素實(shí)驗(yàn)

根據(jù)輔料的不同作用，設(shè)計(jì)不同輔料的評(píng)價(jià)指標(biāo)。高嶺土為賦形劑(骨架材料)，明膠、CMCNa、聚乙烯醇為增粘劑，甘油、丙二醇、卡波姆940為保濕劑，以圖展性、皮膚追隨性、反復(fù)粘貼性、膜殘留量為考察指標(biāo)。依據(jù)“2.1”巴布劑基質(zhì)的制作工藝流程，除考察因素外，其他因素固定不變，根據(jù)評(píng)價(jià)指標(biāo)，確定各種輔料的用量范圍，單因素考察結(jié)果如表1所示。

表1 單因素考察結(jié)果Table 1 Results of single factor investigation

結(jié)果確定各基質(zhì)的用量分別為高嶺土23～29 g，明膠1.5～3.5 g，卡波姆1.5～4.5 g，甘油30～40 g，丙二醇30～40 g。

2.5 正交實(shí)驗(yàn)

2.5.1 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

故本實(shí)驗(yàn)定甘油、丙二醇、水、聚乙烯醇、檸檬酸和檸檬酸鈉的用量分別為35.0 g、35.0 g、40.0 g、1.0 g、0.5 g、0.5 g。將卡波姆940、CMC-Na、高嶺土和明膠定為考察因素，以初黏力、持黏力以及感官綜合評(píng)價(jià)綜合評(píng)分為考察指標(biāo)，根據(jù)上述工藝流程，在單因素考察的基礎(chǔ)上，各設(shè)定三個(gè)實(shí)驗(yàn)水平，采用L9(34)設(shè)計(jì)方案進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)(表2)，以確定巴布劑基質(zhì)中各組分的最佳處方[11-13]。

表2 正交實(shí)驗(yàn)因素水平表Table 2 Orthogonal test factor level table

2.5.2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析

正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。采取綜合平衡法進(jìn)行分析：對(duì)于巴布劑初黏力，最優(yōu)水平組合為A1B2C3D3，而根據(jù)極差R可知，各因素對(duì)初黏力的影響順序依次為：卡波姆940(A)>高嶺土(C)>CMC-Na(B)>明膠(D)，A因素即卡波姆是影響初黏力最主要因素，隨著卡波姆用量的增加，巴布劑的初黏力也不斷增加；對(duì)于持黏力，最優(yōu)水平組合為A2B2C3D2，而根據(jù)極差R可知，各因素對(duì)持黏力的影響順序依次為：CMC-Na(B)>卡波姆94(A)>高嶺土(C)>明膠(D)，B因素是影響持黏力的主要因素；對(duì)于感官綜合評(píng)價(jià)，最優(yōu)水平組合A2B1C3D1，而根據(jù)極差R可知，各因素對(duì)感官綜合評(píng)價(jià)的影響順序依次為：高嶺土(C)>卡波姆940(A)>CMC-Na(B)>明膠(D)，C因素即高嶺土是影響巴布劑感官綜合評(píng)價(jià)的主要因素[14]。綜合考慮初黏力、持黏力以及感官綜合評(píng)價(jià)確定最優(yōu)處方為A2B2C3D1，即確定最優(yōu)處方中卡波姆940 3.0 g，CMC-Na 3.5 g，高嶺土29.0 g，明膠1.5 g。

表3 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析Table 3 Orthogonal test results and analysis

2.5.3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

表4 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table 4 Verification test results

用最佳處方制備4批樣品，在制備成型后分別進(jìn)行初黏力、持黏力以及感官綜合評(píng)分測(cè)定，結(jié)果如表4所示，綜合考慮初黏力、持黏力以及感官綜合評(píng)價(jià)確定最佳配方應(yīng)為A2B2C3D1，即卡波姆3 g，CMC-Na 3.5 g，高嶺土29 g，明膠1.5 g時(shí)制備的巴布劑基質(zhì)效果最好，按優(yōu)化配方制備出來的巴布劑，無論是初黏力、持黏力還是感官綜合評(píng)價(jià)均很好，符合巴布劑制備要求。

3 結(jié) 論

巴布劑基質(zhì)最優(yōu)配方為：甘油35.0 g、丙二醇35.0 g、水40.0 g、聚乙烯醇1.0 g、檸檬酸0.5 g，檸檬酸鈉0.5 g，卡波姆940 3.0 g，CMC-Na 3.5 g，高嶺土29.0 g，明膠1.5 g，此配方具有良好的初黏力、持黏力，感官綜合評(píng)價(jià)得分較高。本實(shí)驗(yàn)考察巴布劑基質(zhì)中幾種主要輔料的的用量對(duì)酚巴布劑的初黏力、持黏力和感官綜合評(píng)價(jià)的影響，從中篩選較優(yōu)處方，是丹皮酚巴布劑能夠達(dá)到較高的質(zhì)量水平，同時(shí)使巴布劑使用舒適，保濕性，成型性，反復(fù)結(jié)貼性等較強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)設(shè)備簡(jiǎn)單，方法易操作，可驗(yàn)證性強(qiáng)。

3.1 卡波姆和明膠的溶脹問題

卡波姆940，明膠的溶脹時(shí)間和加入混合溶液的量對(duì)實(shí)驗(yàn)有顯著影響，溶脹時(shí)間過短或加入混合溶液的量不足，會(huì)導(dǎo)致巴布劑成形性較差，有流膏的現(xiàn)象，通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，卡波姆940 3.0 g加混合溶液45 mL，溶脹24 h，明膠2.5 g混合溶液15 mg溶脹12 h，制得的丹皮酚巴布劑初黏力、持黏力、和感官綜合評(píng)價(jià)均較佳。本實(shí)驗(yàn)初期，在卡波姆的溶脹時(shí)間方面把握不準(zhǔn)確，當(dāng)溶脹時(shí)間不足，會(huì)出現(xiàn)卡波姆濃度不均勻，直接影響主藥丹皮酚的含量均勻度。造成在含量分析的時(shí)候，所取的樣品含量差異較大。加長(zhǎng)溶脹時(shí)間至24 h后，此問題沒有再出現(xiàn)。

3.2 關(guān)于處方中丹皮酚的問題

由于本實(shí)驗(yàn)是丹皮酚巴布劑系列實(shí)驗(yàn)中的一部分，僅研究承載丹皮酚的巴布劑的處方。另已通過方法學(xué)實(shí)驗(yàn)證明將丹皮酚提取物加入巴布劑基質(zhì)處方中，涂布制成巴布劑后，經(jīng)含量檢測(cè)，丹皮酚含量不變，穩(wěn)定性較好[5]。說明基質(zhì)處方中的輔料與丹皮酚份相容性較好，所得的處方能夠滿足丹皮酚巴布劑的承載需求。