高晶晶

[摘要] 目的 討論研究Liss/coombs卡應用于ABO疑難血型檢測中的臨床價值與意義。方法 選擇該院2018年1—6月7例ABO疑難血型患者作為研究對象。將患者1%紅細胞懸液50 μL與50 μL的抗-A、抗-B標準血清在血型鑒定微凝膠柱卡上進行反應，之后將患者血清50 μL與1%ABO試劑細胞A、B細胞液50 μL進行反應并將反應液在Liss/coombs卡上進行檢測并對不同的稀釋濃度標準血清反應進行檢測。 結果 抗-A，抗-B標準血清進行連續(xù)倍比稀釋，分別以鹽水法、柱凝集法及混合實驗法測定各自最大稀釋度的有效反應，鹽水發(fā)最低，滴度僅有128;柱凝集法靈敏度達到512;而混合法測定結果較其余兩種更高，需達到4 096。 結論 鹽水結合柱凝集法對ABO疑難血型進行檢測具有靈敏度及準確率高的特點，尤其對正反定型不一致的疑難血型檢測效果較好，值得臨床廣泛推薦應用。

[關鍵詞] Liss/Coombs卡;鹽水法接合柱凝集法;ABO疑難血型檢測;臨床價值與意義

[中圖分類號] R5 ? ? ? ? ?[文獻標識碼] A ? ? ? ? ?[文章編號] 1674-0742（2020）02（a）-0010-03

Clinical Value Analysis of Liss/coombs Card in ABO Difficult Blood Group Detection

GAO Jing-jing

Department of Blood Transfusion， the First Hospital of Quanzhou， Fujian Medical University， Quanzhou， Fujian Province， 362000 China

[Abstract] Objective To discuss the clinical value and significance of saline conjugate column in ABO difficult blood group detection. Methods Seven ABO patients with difficult blood group in the hospital from January to June 2018 were selected as the study subjects. One percent ofpatients erythrocytesuspension 50 μL was reacted with 50 μL of anti-A and anti-B standard serum， then 50 μL of patients serum was reacted with 50 μL one percentof ABO reagent cell A and B， and the reaction liquid was detected on Liss/coombs card and the standard serum reaction with different dilution concentration was detected. Results The standard serum of anti-A and anti-B was diluted continuously by multiple dilution. The maximum dilution of each standard serum was determined by saline solution method， column agglutination method and mixed experiment respectively. The saline hair was the lowest， and the titer was only 128. The sensitivity of column agglutination method was 512， and the results of mixed method were higher than those of the other two methods， requiring 4 096. Conclusion Saline combined with column agglutination method has the characteristics of high sensitivity and accuracy in detecting ABO difficult blood group， especially for those with inconsistent forward andbackward typing， which is worthy of wide clinical recommendation and application.

[Key words] Liss/Combs card;Brine method of joint column agglutination; ABO difficult blood group detection; Clinical value and significance

紅細胞ABO血型的準確鑒定是輸血相容性檢測最重要的環(huán)節(jié)之一，與患者的用血安全直接相關聯(lián)?；颊咻斞斑M行常規(guī)檢測ABO血型正定型（紅細胞定型）與反定型（血清定型），只有正反定型相一致才可確定ABO血型[1]。ABO血型的鑒定會受到患者年齡、疾病、遺傳及藥物等多種因素的影響，對紅細胞ABO疑難血型進行準確有效的判斷才能達到安全輸血的目的。現(xiàn)臨床多應用柱凝集法進行檢測，但對于疑難血型檢測上無法獲得滿意的檢測結果，可能導致ABO血型檢測過程中出現(xiàn)正反定型結果不一致的情況[2]。鹽水法接合柱凝集法作為一種新的檢測方式具有更加準確、靈敏度高的優(yōu)勢，尤其對于ABO血型抗原弱化或抗體減低而非ABO亞型或抗-H陰性的患者可在較短時間內獲得結果。 該文為探討Liss/coombs卡應用于ABO疑難血型檢測中的臨床價值分析，特選取2018年1—6月7例ABO疑難血型患者臨床資料進行分析，現(xiàn)報道如下。

1 ?資料與方法

1.1 ?一般資料

選擇該院7例輸血前進行ABO血型檢測發(fā)現(xiàn)正反定型不一致的患者作為研究對象，通過檢驗科相關實驗條件對其血液進行對比性試驗檢測。

1.2 ?設備與試劑

該次研究中應用的設備包括恒溫箱、離心機，試劑主要以生理鹽水、1%A、B細胞試劑及抗-A、抗-B血清為主;還包括ABO血型鑒定卡、Liss/coombs結合反應卡。

1.3 ?檢測方法

取ABO疑難血型患者1%50 μL紅細胞液并將其與50 μL抗-A及抗-B標準血清進行混合反應[3];保持實驗溫度4℃，反應時間15 min。若實驗在室溫條件下進行則應將反應時間延長至30 min。之后將充分反應后的反應液結合至Liss/coombs卡上，使用專業(yè)離心機進行離心處理，離心時間為10 min并對所得結果進行判斷[4]。之后將患者50 μL血漿與1%反定A、B紅細胞懸液50 μL，加至Liss/coombs卡[5]，在37℃恒溫箱中進行30 min反應并放至離心機進行10 min離心處理并對結果進行觀察[6]。該次試驗在鹽水試管、柱凝集法及混合實驗法條件下進行，另外還應對不同稀釋濃度的抗-A及抗-B標準血清進行檢測[7]，濃度為每次稀釋2倍并將檢測結果進行對比。

1.4 ?統(tǒng)計方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料用[n（%）]表示，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 ?結果

2.1 ?3種方法檢測抗原減弱或抗體減低結果

3種方法測定抗原減弱或抗體減低結果顯示，鹽水法接合柱凝集法進行血型鑒定效果較好并與其他兩種方法存在較大差異，且差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 ?血清連續(xù)倍比稀釋結果

抗-A，抗-B標準血清進行連續(xù)倍比稀釋，分別以鹽水法、柱凝集法及混合實驗法測定各自最大稀釋度的有效反應，鹽水法最低，滴度僅有128;柱凝集法靈敏度達到512;而混合法測定結果較其余兩種更高，需達到4 096。見表2。

表2 ? 3種方法抗-A、抗-B標準血清連續(xù)倍比稀釋比較

3 ?討論

目前臨床用于檢測ABO血型的方法較多，但在對血型測定過程中存在正反定型不符的疑難血型缺乏統(tǒng)一的鑒定流程，這也在一定程度上增加了該部分患者輸血的難度與風險[8-9]。微柱凝集法的血型反應卡與交叉配血反應卡通常都只進行單一檢測的目的，缺乏進一步的聯(lián)合與拓展應用。單一的血型測定柱凝集法主要是通過紅細胞抗原及對應的抗體IgM結合后通過離心使凝集的紅細胞懸浮在凝膠表面或中層而呈現(xiàn)陽性反應，未與抗體結合的紅細胞通過凝膠沉于凝膠底部表現(xiàn)為陰性反應[10-11]。部分研究人員[12]認為將CAT法應用于ABO血型檢測所得結果的準確性不如手工試管法檢測準確。隨著研究的進一步深入，研究人員均認為，血庫通過CAT法對ABO血性進行檢測時仍存在正反定型不一致的情況[13-14]。該次研究中參與研究的患者疑難血型均為抗體減低，應用鹽水法接合柱凝集法進行血型鑒定效果較好并與其他兩種方法存在較大差異（P<0.05），此結果與梁漢彰[15]研究所得結果相似，而抗原減弱的情況待后續(xù)實驗進一步驗證該方法的可行性。另外，研究中還發(fā)現(xiàn)抗-A，抗-B標準血清進行連續(xù)倍比稀釋，分別以鹽水法、柱凝集法及混合實驗法測定各自最大稀釋度的有效反應，鹽水法最低，滴度僅有128;柱凝集法靈敏度達到512;而混合法測定結果較其余兩種更高，需達到4 096（P<0.05），此結果與王顯榮等[16]文章中提出的鹽水試管法最大稀釋度有效反應最低，滴度僅為128，而鹽水接合柱凝集法較其余兩種方法更高，達到4 096相似。

鹽水法接合柱凝集法是交叉配血反應卡的進一步拓展并作為該次研究的結合反應卡[17]。主要是指將鹽水法反應陽性（肉眼無法看見或非常微弱）的反應液（IgG型或IgM型抗原抗體結合物）接合至Liss/Coombs卡上進行抗球蛋白試驗，將抗原抗體特異性反應與抗球蛋白試驗超敏感性進行結合[18];之后根據(jù)反應卡分子篩的物理作用及LISS促進抗原抗體反應的特性顯著提升實驗的敏感度[19]。實驗發(fā)現(xiàn)[20-21]，單一的柱凝集法對ABO血型的測定盡管也具有一定的靈敏度，但對于由于疾病或者生理因素造成的抗原減弱或抗體減低的患者仍較難確定其準確的ABO血型。該文應用3種檢測方式對抗-A、抗-B標準血清進行連續(xù)倍比稀釋并測定反應結果后發(fā)現(xiàn)，鹽水法接合柱凝集法進行標準抗血清測定其靈敏度顯著高于其余兩種方法。綜上所述，鹽水法接合柱凝集具有靈敏度較高且效率更高的優(yōu)勢，對于抗原減弱或抗體減低的ABO疑難血型患者具有較高的檢測價值。

[參考文獻]

[1] ?王麗.采用鹽水法接合柱凝集法檢測ABO疑難血型的臨床分析[J].中國藥物經濟學，2018，10（S1）：70-71.

[2] ?步曉筠，劉建成，邵峰，等.寧夏地區(qū)回族無償獻血者ABO和Rh血型基因頻率分布的研究[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2019， 16（9）：1222-1224.

[3] ?李嬋婷.臨床輸血前血型鑒定及抗體篩查對輸血安全的重要作用[J].基層醫(yī)學論壇，2019（17）：2462-2463.

[4] ?屈林，李景和，劉鳳霞. ABO血型抗原減弱所致疑難血型的原因分析及鑒定方法[J].中國輸血雜志，2017，11（9）：706-708.

[5] ?S chenk-Brunner H .ABO（H ）sy stem .In ：Schenk-Brunn er H .Human blood group s chemical and biochemical basis of antigens pecificity[M].2nd ed，New York ：S pringer，2016，18（11）118～161