蕭銘明 胡一丞 潘榮華 何 前 陳奕彬 李色東
(1.廣東恒興飼料實(shí)業(yè)股份有限公司,廣東 湛江 524073;2.湛江市海洋與漁業(yè)發(fā)展研究中心,廣東 湛江 524039;3.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部南海水產(chǎn)動(dòng)物育種與養(yǎng)殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東 湛江 524073)
我國是南美白對蝦養(yǎng)殖大國,2018年南美白對蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量為111.8萬噸(中國漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒,2019),所以自主選育適合我國氣候、養(yǎng)殖條件的南美白對蝦品種就尤為重要。此次評價(jià)的南美白對蝦品系來源于南美白對蝦新品種“中興1號”?!爸信d1號”是由中山大學(xué)和廣東恒興飼料實(shí)業(yè)股份有限公司合作選育的抗病南美白對蝦新品種,是以白斑綜合征病毒(WSSV)抗性為主要選育目標(biāo),經(jīng)連續(xù)5代家系選育獲得的品種。本實(shí)驗(yàn)通過對兩個(gè)不同選育方向的南美白對蝦品系的生長和抗病性狀進(jìn)行比較、分析,希望能夠?qū)ΜF(xiàn)行選育方法和手段的效果進(jìn)行評價(jià),為今后的工作提供參考依據(jù)。
實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)位于廣東湛江恒興南美白對蝦國家級良種場(恒興863基地),實(shí)驗(yàn)蝦來源于“中興1號”的兩個(gè)不同選育方向品系(A品系和B品系)。A品系和B品系分別于2019年10月31日和11月3日放苗,實(shí)驗(yàn)開始時(shí)體長約為7厘米。
將實(shí)驗(yàn)蝦混養(yǎng)于室內(nèi)6.5米×6.5米×1.4米的正方體水泥池中,具有進(jìn)水和排水功能。光照條件為自然光照,海水經(jīng)三級過濾后方可使用。實(shí)驗(yàn)前將蝦放在水泥池內(nèi)設(shè)置的網(wǎng)箱里暫養(yǎng),24小時(shí)后待蝦穩(wěn)定開始實(shí)驗(yàn)。每個(gè)家系隨機(jī)挑選實(shí)驗(yàn)蝦200尾,注射熒光標(biāo)記來區(qū)分不同家系,每天8:00、12:00、17:00按時(shí)投喂,日投飼率為蝦體重的8%~10%。每隔3天吸污1次,分別在實(shí)驗(yàn)第0天、第60天采樣,每個(gè)家系每次采樣50尾,測量體長、體重。
將實(shí)驗(yàn)蝦養(yǎng)于室內(nèi)玻璃鋼化桶中,每個(gè)鋼化桶容積為300升,設(shè)有排污口和進(jìn)水管道,光照條件為自然光照,海水經(jīng)三級過濾后方可使用。實(shí)驗(yàn)前分別在實(shí)驗(yàn)桶中暫養(yǎng),待實(shí)驗(yàn)蝦穩(wěn)定后開始實(shí)驗(yàn)。每個(gè)品系設(shè)置兩個(gè)平行桶,每桶隨機(jī)放入40尾注射后的實(shí)驗(yàn)蝦。攻毒實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)3組實(shí)驗(yàn),分別給兩個(gè)品系的實(shí)驗(yàn)蝦注射50微升WSSV(106拷貝/微升)、50微升CQIV(106拷貝/微升)和50微升VPA(105拷貝/微升)。注射了WSSV和CQIV的實(shí)驗(yàn)蝦,每隔4小時(shí)記錄每個(gè)品系的實(shí)驗(yàn)蝦死亡數(shù)量;注射VPA的實(shí)驗(yàn)蝦,前12小時(shí)每隔2小時(shí)記錄每個(gè)品系的實(shí)驗(yàn)蝦死亡數(shù)量,12小時(shí)后每隔4小時(shí)記錄1次,實(shí)驗(yàn)時(shí)間為7天。結(jié)束后記錄各品系實(shí)驗(yàn)蝦的存活數(shù)量,統(tǒng)計(jì)平均死亡時(shí)間、死亡率和抗病評價(jià)指數(shù)。每天給每個(gè)實(shí)驗(yàn)桶投喂相等量的飼料,日投喂率為蝦體重8%~10%。每天于9:00、17:30底排污兩次。
式中,W1為時(shí)間t1時(shí)實(shí)驗(yàn)蝦的體重,W2為時(shí)間t2時(shí)實(shí)驗(yàn)蝦的體重。
經(jīng)投喂感染后,以第一尾實(shí)驗(yàn)蝦死亡的時(shí)間為0起點(diǎn),以最后一尾死亡實(shí)驗(yàn)蝦的時(shí)間基點(diǎn)順延24小時(shí)為終點(diǎn),從第一尾實(shí)驗(yàn)蝦死亡的時(shí)間到終點(diǎn)間隔時(shí)間為B,式中,AI為時(shí)段實(shí)驗(yàn)蝦死亡數(shù),F(xiàn)為實(shí)驗(yàn)結(jié)束后實(shí)驗(yàn)蝦的存活數(shù),N為實(shí)驗(yàn)蝦的總數(shù)。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)在Excel 2016中處理,采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 19.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,P<0.05表示差異顯著,并用prism 7.0作圖。
由圖1、圖2可見,兩個(gè)品系在第0天時(shí),體長、體重?zé)o顯著性差異(P>0.05),經(jīng)過60天的養(yǎng)殖,A品系平均體長、體重分別長到(9.82±0.72)厘米、(8.72±2.21)克,體重特定生長率為1.46%/天;B品系平均體長、體重分別長到(11.00±1.14)厘米、(11.81±3.86)克,體重相對生長率為1.82%/天。養(yǎng)殖60天時(shí)B品系的體長、體重均顯著高于A品系(P<0.05)。
圖1 A品系和B品系體長均值變化情況
圖2 A品系和B品系體重均值變化情況
由表1、圖3可見,A品系對WSSV、CQIV和VPA的抗病評價(jià)指數(shù)均比B品系要高,抗病性更強(qiáng),尤其是A品系注射VPA后平均死亡時(shí)間為(93.0±37.3)小時(shí),顯著高于B品系(P<0.05),平均死亡率較B品系低36.5%。綜上所述,A品系相較B品系對WSSV、CQIV和VPA有更強(qiáng)的抗病性狀。
表1 兩個(gè)品系攻毒實(shí)驗(yàn)結(jié)果
圖3 A品系和B品系攻毒過程中蝦的死亡時(shí)間
生長實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,養(yǎng)殖60天后B品系平均體長、體重皆顯著大于A品系(P<0.05),B品系的生長速度顯著高于A品系。攻毒實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,A品系對WSSV、CQIV和VPA的抗病評價(jià)指數(shù)均高于B品系,說明A品系對WSSV、CQIV和VPA的抗病性更強(qiáng)。綜上,對A、B兩個(gè)品系的生長和抗病性狀進(jìn)行分析比較后發(fā)現(xiàn),這兩個(gè)選育的南美白對蝦品系生長和抗病性狀各有優(yōu)劣,A品系生長速度較慢但抗病性較好,B品系則相反。