楊立

【摘? 要】目的：以尿沉渣涂片革蘭染色為標(biāo)準(zhǔn)，比較新型Sysmex UF5000尿沉渣分析儀細(xì)菌革蘭染色分型結(jié)果和尿沉渣涂片革蘭染色鏡檢結(jié)果一致性，為泌尿道感染的快速診斷和指導(dǎo)臨床醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)性用藥提供更快速、精準(zhǔn)的依據(jù)。方法：收集該院2019年11月1日-2019年11月30日的199 例合格中段尿標(biāo)本，各分成2份，分別進(jìn)行UF5000上機(jī)檢測(cè)和尿沉渣涂片革蘭染色鏡檢，結(jié)果以尿沉渣革蘭染色鏡檢作為參考標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果：通過(guò)對(duì)199例標(biāo)本結(jié)果分析，共有164例相符，總符合率為82.4%，其中革蘭陽(yáng)性菌相符的40例，符合率81.6%，革蘭陰性菌相符的112例，符合率83.6%，革蘭陽(yáng)性菌混革蘭陰性菌相符的12例，符合率75%。采用SPSS20.0分析，Kappa值為0.667，一致性良好。剔除混合菌感染的例數(shù)，Kappa值為0.832，一致性良好。結(jié)論：UF5000在細(xì)菌分類上與尿沉渣涂片革蘭染色鏡檢具有良好的一致性，并且快速，經(jīng)濟(jì)，有利于臨床進(jìn)行大規(guī)模開展，可作為一種泌尿道感染的快速篩查方法。

【關(guān)鍵詞】一致性;革蘭染色;尿路感染快速篩查;全自動(dòng)尿沉渣分析儀;顯微鏡人工鏡檢

尿路感染（urinary tract infection，UTI）是指病原體在尿路中生長(zhǎng)繁殖，并侵犯泌尿道黏膜或組織而引起的炎癥，是細(xì)菌感染中最常見(jiàn)的一種感染，其常見(jiàn)于外科手術(shù)術(shù)后并發(fā)癥，尤其是老年人免疫力低下人群。[1]可由細(xì)菌感染引起，易反復(fù)感染，若不及時(shí)醫(yī)治還會(huì)引起慢性感染。

目前在眾多輔助診斷中中段尿細(xì)菌培養(yǎng)是診斷尿路感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但是檢驗(yàn)周期比較長(zhǎng)，通常需要2-4天才能出結(jié)果，不能滿足臨床快速診斷的需求。與之相比，尿沉渣革蘭染色鏡檢能夠直觀地反映細(xì)菌的有無(wú)及革蘭染色特性，簡(jiǎn)單迅速，在尿路感染的快速診斷和經(jīng)驗(yàn)性的抗生素治療上起到了重要的輔助作用[2]。目前日本希森美康公司生產(chǎn)的最新尿沉渣檢測(cè)儀UF5000在原有檢測(cè)項(xiàng)目基礎(chǔ)上增加了細(xì)菌革蘭染色分型及尿路感染提示信息。其原理主要是利用革蘭陰性菌和革蘭陽(yáng)性菌細(xì)胞壁肽聚糖層的厚度不同及可以透過(guò)的熒光色素量的多少來(lái)區(qū)分。本研究將尿沉渣革蘭染色和UF5000對(duì)細(xì)菌革蘭染色分型進(jìn)行比較，研究?jī)烧咴跈z測(cè)細(xì)菌有無(wú)和革蘭染色分型的一致性，為尿路感染的快速鑒別診斷和初步指導(dǎo)臨床經(jīng)驗(yàn)性用藥提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院2019年11月共199例疑似尿路感染患者的中段尿標(biāo)本。按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第四版）》標(biāo)準(zhǔn)[3]，囑咐患者留取無(wú)菌中段尿標(biāo)本，1小時(shí)內(nèi)送檢，將每份標(biāo)本平均分成2份，先在UF5000上完成尿沉渣的檢測(cè)，然后離心棄上清取沉渣涂片革蘭染色并鏡檢。

1.2 儀器與試劑 希森美康尿沉渣檢測(cè)儀UF5000以及原裝配套試劑、質(zhì)控物。萊卡DM750顯微鏡及其配套拍攝系統(tǒng)。 珠海貝索快速革蘭氏染液。中佳低速離心機(jī)。

1.3 方法

1.3.1 尿沉渣細(xì)菌定量計(jì)數(shù)及革蘭染色分型：收集尿標(biāo)本后，用UF5000尿沉渣分析儀檢測(cè)細(xì)菌數(shù)，并記錄其革蘭染色分型。

1.3.2 尿沉渣涂片革蘭染色鏡檢：將檢測(cè)完的尿沉渣標(biāo)本以1500r/min離心5min，棄上清液取沉渣涂片進(jìn)行革蘭染色并鏡檢。然后比較與機(jī)測(cè)革蘭染色分型的一致性。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法：采用SPSS20.0分析，利用Kappa值評(píng)價(jià)兩種檢驗(yàn)方法的一致性。

2 結(jié)果

UF5000革蘭染色分型與尿沉渣革蘭染色鏡檢比較 199例標(biāo)本中，共有164例相符，總符合率為82.4%，其中革蘭陽(yáng)性菌相符的40例，符合率81.6%，革蘭陰性菌相符的112例，符合率83.6%，革蘭陽(yáng)性菌混革蘭陰性菌相符的12例，符合率75%。與相關(guān)學(xué)者的研究報(bào)道結(jié)果相近[4]。采用SPSS20.0分析，Kappa值0.667，一致性良好。鑒于查閱相關(guān)文獻(xiàn)，報(bào)道泌尿系細(xì)菌混合感染的文獻(xiàn)比較少的情況，剔除該數(shù)據(jù)中混合菌感染的例數(shù)，只針對(duì)于革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌的分型的一致性求Kappa值，采用SPSS20.0分析，Kappa值0.832，一致性良好。相關(guān)數(shù)據(jù)見(jiàn)表1。由此可見(jiàn)UF5000對(duì)泌尿系的混合菌感染分型的一致性略差。

3 討論

目前針對(duì)于臨床泌尿系的感染，診斷的時(shí)效性也是越來(lái)越備受重視。雖然無(wú)菌中段尿培養(yǎng)是金標(biāo)準(zhǔn)，但是培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)使其不能在早期的快速篩查診斷中發(fā)揮重要作用。而尿沉渣革蘭染色作為最直觀的一種鑒定有無(wú)細(xì)菌感染的快速方法，不論在大型三甲醫(yī)院臨床面對(duì)不斷增多的泌尿道感染患者，還是基層醫(yī)院缺乏相應(yīng)培養(yǎng)的配套設(shè)施和技術(shù)的現(xiàn)狀，都不失為泌尿系感染的一種快速而相對(duì)準(zhǔn)確的篩查方法[5]，同時(shí)也有助于指導(dǎo)臨床醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)性用藥，在一定程度上避免了細(xì)菌耐藥性的發(fā)展。本文中將其與新型的尿沉渣分析儀UF5000對(duì)細(xì)菌革蘭染色分型的一致性比較得出一致性良好的結(jié)論，所以UF5000也可成為快速篩查尿路感染的一種新方法。

針對(duì)于UF5000的經(jīng)濟(jì)時(shí)效性而言，此前也有學(xué)者在論述菌尿的即時(shí)篩選技術(shù)中也提到過(guò)很多技術(shù)，如熒光原位雜交、MS質(zhì)譜技術(shù)、微流控芯片及分子生物學(xué)技術(shù)等[6]，雖然時(shí)效性及準(zhǔn)確性能得到保證，但是操作過(guò)程相對(duì)UF5000均比較繁瑣，而且試驗(yàn)成本高，不利于臨床大規(guī)模開展。

就UF5000與尿沉渣革蘭染色鏡檢的良好一致性而言，UF5000在檢測(cè)原理上有了很大提升，其中細(xì)菌革蘭氏染色性信息是利用前向散射光和側(cè)向熒光，根據(jù)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁的構(gòu)成差異來(lái)分析的。前向散射光強(qiáng)度反映了菌體的肽聚糖層等細(xì)胞壁的構(gòu)成成分的差異，肽聚糖層厚的革蘭氏陽(yáng)性菌與革蘭氏陰性菌的相比，前向散射光強(qiáng)度呈現(xiàn)居高的傾向。側(cè)向熒光強(qiáng)度反映了滲透至菌體內(nèi)的色素量，細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)不同對(duì)其會(huì)產(chǎn)生影響。革蘭氏陽(yáng)性菌的情況下，由于細(xì)胞壁的肽聚糖層厚，滲透至菌體內(nèi)的色素量下降，所以側(cè)向熒光強(qiáng)度變低。另一方面，革蘭氏陰性菌的情況下，由于滲透至菌體內(nèi)的色素量變多，所以側(cè)向熒光強(qiáng)度變高。

通過(guò)上述分析，UF5000尿沉渣分析儀可以作為一種新型的快速篩查尿路感染的方法，不過(guò)需要注意在尿液標(biāo)本的留取方面，嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)留取合格中段尿很有必要，以防止不合格的污染標(biāo)本影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性[7]。同時(shí)泌尿系感染除了細(xì)菌感染常見(jiàn)以外，近年來(lái)真菌感染也越來(lái)越不容忽視，所以UF5000對(duì)真菌的鑒別能力如何也有待于進(jìn)一步考證。

參考文獻(xiàn)

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