可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1、肺炎支原體及肺炎衣原體聯(lián)合檢測對早期肺炎的診斷價值分析

楊群芳，楊秀清，溫遠(yuǎn)生，張海林

廣東省惠州市中醫(yī)醫(yī)院檢驗科，廣東惠州 516003

肺炎是指由細(xì)菌、病毒、真菌和非典型病原體等致病微生物所致的終末氣道、肺泡和肺間質(zhì)的炎癥，或者因放射線、吸入性異物等理化因素引起[1]；臨床多表現(xiàn)為突然寒戰(zhàn)、高熱伴有頭痛、全身肌肉酸軟、食欲減退、胸痛、咳嗽和呼吸困難等典型癥狀，早期肺炎為刺激性干咳，繼而咳出白色黏液痰或帶血絲痰，后1～2 d可咳出黏液血性痰、膿性痰，消散期痰量增多，痰黃且稀薄，重癥肺炎可出現(xiàn)神志模糊、煩躁、嗜睡和昏迷等[2]。由于癥狀和體征的相似，肺炎難以與心力衰竭、肺不張、肺栓塞和肺出血等進(jìn)行鑒別，且由于漏診、誤診的發(fā)生和抗菌藥物耐藥性的提高，避免早期肺炎發(fā)展成重癥，以及準(zhǔn)確診斷肺部感染是否為細(xì)菌感染對肺炎患者具有重要的意義[3]。可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)是一種免疫球蛋白，主要在人體感染過程中釋放到體液，研究發(fā)現(xiàn)其可能與降鈣素原和C反應(yīng)蛋白等相似，可幫助判斷是否為細(xì)菌感染。肺炎支原體(MP)和肺炎衣原體(CP)是引起呼吸道感染的常見病原體，大小介于細(xì)菌和病毒微生物之間，其在入侵人體后主要通過黏附呼吸道上皮細(xì)胞表面的受體來致使肺部感染，容易造成家庭和社區(qū)的流行[4-5]。因此，sTREM-1、MP及CP聯(lián)合檢測對早期肺炎的診治具有良好的應(yīng)用前景。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月至2019年5月到本院就診并被診斷為肺炎的患者160例(觀察組)，根據(jù)患者血清sTREM-1水平進(jìn)一步分為觀察1組(3.8～<5.7 pg/mL)、觀察2組(5.7～<6.9 pg/mL)、觀察3組(6.9～<8.9 pg/mL)、觀察4組(8.9～<12.0 pg/mL)。另選取同期入院且sTREM-1水平正常的40例患者作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)自愿參加調(diào)查；(2)無語言交流障礙；(3)無其他內(nèi)科或外科并發(fā)癥者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)入院后重大手術(shù)類患者；(2)認(rèn)知功能障礙者；(3)腫瘤患者。各組研究對象性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。所有研究對象已簽署知情同意，本研究已獲得本院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2診斷標(biāo)準(zhǔn) 目前尚無單純的肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，診斷以社區(qū)性獲得性肺炎為準(zhǔn)：(1)新出現(xiàn)或進(jìn)展性的肺部浸潤性病變；(2)發(fā)熱大于38 ℃；(3)新出現(xiàn)的咳嗽、咳痰或原有呼吸道癥狀加重，并出現(xiàn)膿性痰，伴或不伴胸痛；(4)肺實變體征或濕性啰音；(5)白細(xì)胞增高或減低，伴或不伴核左移。一般有癥狀(1)及癥狀(2)～(5)中任何一個，肺炎診斷即可確立。

1.3方法 分別在患者入院的第1、4、7天抽取各組研究對象靜脈血4 mL，在30 min內(nèi)離心(4 000 r/min，10 min)留血樣，放至-70 ℃的環(huán)境中保存，其后使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定血清sTREM-1的水平。MP和CP抗體檢測使用奧林巴斯BX51熒光顯微鏡，選擇西班牙Vircell-S.I公司生產(chǎn)的九項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒，陽性結(jié)果以在熒光顯微鏡下觀察到細(xì)胞出現(xiàn)蘋果綠色熒光為準(zhǔn)。

2 結(jié) 果

2.15組sTREM-1檢測結(jié)果的比較 觀察1組(4.7±0.6)pg/mL、觀察2組(6.4±0.5)pg/mL、觀察3組(8.1±0.7)pg/mL、觀察4組(10.5±1.3)pg/mL的sTREM-1表達(dá)水平均顯著高于對照組(3.6±0.7)pg/mL，且觀察2組顯著高于觀察1組，觀察3組顯著高于觀察2組，觀察4組顯著高于觀察1、2、3組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.2肺炎患者M(jìn)P-IgM、CP-IgM檢出率的比較 對照組MP和CP檢出率最低，分別是0和2.5%(1/40)；觀察組MP檢出率為68.1%(109/160)，CP檢出率為56.9%(91/160)；觀察組MP和CP檢出率與對照組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.3肺炎發(fā)生相關(guān)因素的logistic回歸分析 以是否診斷為肺炎為因變量，以年齡、性別、sTREM-1、MP-IgM和CP-IgM為應(yīng)變量，建立二元logistic回歸模型，結(jié)果顯示sTREM-1、MP-IgM和CP-IgM與肺炎發(fā)生相關(guān)。見表2。

表1 5組患者M(jìn)P-IgM、CP-IgM檢出率比較[n(%)]

注：與對照組比較，χ2=25.042，*P<0.001；與對照組比較，χ2=38.089，#P<0.001。

表2 肺炎發(fā)生相關(guān)因素的logistic回歸分析結(jié)果

2.4sTREM-1、MP-IgM和CP-IgM聯(lián)合檢測診斷效能比較 sTREM-1、MP-IgM、CP-IgM、sTREM-1+MP-IgM、sTREM-1+CP-IgM、CP-IgM+MP-IgM和三者聯(lián)合檢測診斷肺炎的線下面積(AUC)分別為 0.655、0.556、0.671、0.719、0.808、0.830、0.922。見表3、圖1。

表3 sTREM-1、MP-IgM和CP-IgM聯(lián)合檢測的診斷效能

圖1 sTREM-1、MP-IgM和CP-IgM檢測的診斷效能圖

3 討 論

肺炎是一種嚴(yán)重的呼吸道疾病，以彌漫性肺部病變和不典型的臨床癥狀為主要表現(xiàn)，若沒有及時控制容易出現(xiàn)呼吸衰竭、心力衰竭和敗血癥等嚴(yán)重并發(fā)癥，更有甚者可致死亡，因此早期對肺炎患者進(jìn)行診斷和治療可避免引發(fā)重癥的可能[7-8]。MP是廣泛且獨立存在于自然界的一種介于病毒和細(xì)菌之間的最小微生物，主要通過呼吸道飛沫進(jìn)行傳播[9]，其中又以肺炎MP最具致病性，是呼吸道感染的常見病原體，也是咳嗽變異性哮喘發(fā)生的危險因素之一，可使用熒光定量PCR法檢測其DNA[10]。人體在感染肺炎CP后極其容易引發(fā)支氣管炎和肺炎，值得強(qiáng)調(diào)的是，肺炎CP感染是一個持續(xù)、反復(fù)和隱形的感染[11]，這是因為機(jī)體感染肺炎CP后會產(chǎn)生非特異性免疫、特異性細(xì)胞免疫和體液免疫，因其獲得性免疫非常弱而且難以持續(xù)較長時間所致。因為CP感染沒有特異性癥狀和體征，所以實驗室檢查凸顯其重要性[12-13]。sTREM-1自2000年被發(fā)現(xiàn)以來，作為免疫球蛋白超家族受體而特異性表達(dá)中性粒細(xì)胞和單核巨噬細(xì)胞而得名[14]，sTREM-1廣泛表達(dá)于真菌和病毒感染部位，但是在銀屑病、潰瘍性結(jié)腸炎和血管炎等中極少表達(dá)，說明其表達(dá)具有明顯的特異性[15]，sTREM-1作用機(jī)制主要在與配體結(jié)合后通過介導(dǎo)單核細(xì)胞及中性粒細(xì)胞表面的接頭蛋白，并最終通過多條下游途徑協(xié)同作用促使釋放炎癥因子和炎性反應(yīng)遞質(zhì)，從而增強(qiáng)感染導(dǎo)致的炎性反應(yīng)[16]。

肺炎MP和肺炎CP在臨床常被用來輔助診斷肺炎，由于研究目的、人群和樣本量的差異通常難以成為診斷和治療過程中的醫(yī)學(xué)證據(jù)[17]，并且隨著抗菌藥物的濫用，肺炎造成的病死率并沒有隨著抗菌藥物的發(fā)展而有所下降，臨床在廣泛治療細(xì)菌感染的過程中容易造成患者療程延長、二重感染和超級細(xì)菌的出現(xiàn)，因此早期準(zhǔn)確地判斷肺炎是保證治療成功的關(guān)鍵，也是防止抗菌藥物濫用和預(yù)后加重的重要措施[18-19]。MP和CP在感染機(jī)體后，可刺激產(chǎn)生抗體MP-IgM和CP-IgM，其在發(fā)病1周就可檢出，并在3周后達(dá)到頂峰，可持續(xù)3～6個月，因此對病程小于1周的患者可能無法檢出，另外由于個體的差異，可能存在部分免疫低下的患者也同樣無法檢出，存在一定程度上的局限性。本研究結(jié)果顯示，對照組MP和CP檢出率最低，分別是0和2.5%(1/40)；觀察組總計檢出率MP為68.1%(109/160)，CP為56.9%(91/160)，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；ROC曲線分析顯示，sTREM-1、MP-IgM和CP-IgM兩兩聯(lián)合和三者聯(lián)合早期診斷的靈敏度和特異度均在75.00%以上，而聯(lián)合三種指標(biāo)可將靈敏度和特異度提高至95.00%以上，表明三者聯(lián)合檢測對肺炎具有高度的輔助診斷價值。

一般認(rèn)為，炎癥標(biāo)志物的表達(dá)與細(xì)菌感染等存在一定程度的相關(guān)，漸漸成為判斷細(xì)菌感染的指標(biāo)[20]。在本研究結(jié)果中，觀察1、2、3、4組sTREM-1表達(dá)水平的比較均顯著大于對照組，且觀察2組顯著大于觀察1組，觀察3組顯著大于觀察2組，觀察4組顯著大于觀察1、2、3組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；且logistic回歸結(jié)果顯示，sTREM-1、MP-IgM和CP-IgM與肺炎診斷相關(guān)，說明sTREM-1對于早期診斷肺炎具有臨床意義，sTREM-1可作為一種診斷細(xì)菌性肺炎的判定指標(biāo)。

綜上所述，sTREM-1、肺炎MP和肺炎CP聯(lián)合檢測對肺炎早期診斷具有較高的臨床價值，可提高肺炎的早期檢出率。本研究的局限性在于選擇的研究對象均為本院就診患者，可能存在選擇性偏移，研究廣度存在差異性，另外，本次研究的樣本量僅160例，且為回顧性分析，可能也缺乏準(zhǔn)確性[15]。