豌豆蚜危害對(duì)四種苜蓿品種（系）可溶性蛋白和單寧含量變化的影響

王明春

（甘肅省武山縣城關(guān)鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣與綜合服務(wù)中心，甘肅 武山 741300）

豌豆蚜是苜蓿上重要害蟲之一，在世界各地均有分布（包括中國）[1]。苜蓿對(duì)苜蓿斑蚜、苜蓿蚜、薊馬危害的生理變化均有研究，但苜蓿對(duì)豌豆蚜危害的生理變化未見報(bào)道，因此本試驗(yàn)針對(duì)不同抗性苜蓿品種（系）受豌豆蚜危害前后體內(nèi)可溶性蛋白、單寧的變化進(jìn)行比較研究, 為抗蟲育種提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試苜蓿材料

供試苜蓿品種（系）為HA-3、甘農(nóng)3號(hào)（G3）、金皇后(Golden Empress)、獵人河（Hunter river）, 其抗性于 2009 年 6月在室內(nèi)采用大量蚜蟲幼苗侵染法鑒定結(jié)果見表1。

表1 苜蓿品種（系）來源及抗性

1.1.2 供試蟲源

試驗(yàn)供試蟲源采自甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)試驗(yàn)田苜蓿植株上自然發(fā)生的蚜蟲，經(jīng)鑒定為豌豆蚜。在養(yǎng)蟲室內(nèi)飼養(yǎng)繁殖, 溫度(20±3)℃，相對(duì)濕度50±10%，光照16L:8D，其后代供實(shí)驗(yàn)使用。

1.2 實(shí)驗(yàn)處理

1.2.1 可溶性蛋白含量的測(cè)定

從苜蓿植株剪下葉片，稱取0.2g葉片組織，用蒸餾水洗2次后，用濾紙吸干表面水分，加0.1mol/L的0.1mol/LpH8.0的Tris-HCL緩沖液、約0.4g石英砂充分研磨后，5000rpm/min離心5min，收集上清液，用緩沖液定容至10ml,以0.1mol/LpH8.0的Tris-Hcl緩充液調(diào)零，測(cè)定260nm和280nm處的光密值，利用經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算出蛋白質(zhì)濃度和每克鮮葉中的蛋白質(zhì)含量。

1.2.2 單寧的測(cè)定方法

將新采的苜蓿葉片在烘箱中烘干、研碎，稱取苜蓿干粉0.3g,加醇溶液30ml置70℃水浴中浸提30分鐘，過濾殘?jiān)么家合礈?，重?fù)浸提1～2次，用5% FeCl3false溶液檢查不產(chǎn)生蘭色或綠色為止，收集浸提液和洗滌液于250毫升容量瓶中，定容。在100毫升容量瓶中盛約70毫升水，加10毫升浸提液，5毫升F—D試劑，10毫升飽和碳酸鈉溶液，加水定容，搖勻，30分鐘后，在760nm下，測(cè)定吸光度A。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel2003統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理、作圖，使用SPSS進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 蚜蟲危害脅迫對(duì)可溶性蛋白含量的影響

紫花苜蓿不同抗性品種（系）與蚜蟲互作中可溶性蛋白含量的變化結(jié)果表明：蚜蟲危害脅迫前HA-3和HR的可溶性蛋白含量高于G3和JH，經(jīng)方差分析表明感蟲品種、抗蟲品種和低抗品種的可溶性蛋白含量差異極顯著（F=34.86，P=0.0001＜0.01）；蚜蟲危害脅迫后，各抗性品種（系）的可溶性蛋白含量均隨危害脅迫的加劇有不同程度的下降，在接蚜后第三天的含量最低，低抗品種G3下降最快，其次是感蟲品種獵人河，HA-3和金皇后下降的最慢；在接蚜后的1-3天，獵人河的可溶性蛋白含量均較低（除第3天G3）。

2.2 蚜蟲危害脅迫對(duì)單寧含量的影響

紫花苜蓿不同抗性品種（系）與蚜蟲互作中單寧含量的變化結(jié)果（圖1）表明：蚜蟲危害脅迫前HA-3和HR的單寧含量高于G3和JH，經(jīng)方差分析表明感蟲品種、抗蟲品種和低抗品種的單寧含量差異極顯著（F=11.22，P=0.0031＜0.01＝；蚜蟲危害脅迫后，各抗性品種（系）的單寧含量均隨危害脅迫的加劇有不同程度的上升，在接蚜后第三天的含量最高，抗蟲品系和感蟲品種上升較快，而低抗品種上升較慢；在蚜蟲危害脅迫的過程中內(nèi)，抗蟲品系HA-3的單寧含量始終高于低抗品種和感蟲品種。

3 討論

3.1 單寧含量變化與抗蚜性的關(guān)系

本實(shí)驗(yàn)中抗蟲品種的單寧含量在整個(gè)危害脅迫的過程中始終高于低抗品種、感蟲品種，表明單寧含量與苜蓿的抗性密切相關(guān)。

3.2 可溶性蛋白含量變化與抗蚜性的關(guān)系

本實(shí)驗(yàn)中，接蚜前感蟲品種和抗蟲品種的可溶性蛋白含量低于低抗品種；在蚜蟲危害脅迫過程中，感蟲品種、低抗品種和抗蟲品種的SOD活性均有所下降。可溶性蛋白含量變化與抗蚜性的關(guān)系不明顯，有待于進(jìn)一步研究。