劉雯 李峰 覃潔萍 馮旭

摘要：通過離子交換色譜法，建立不同廠家阿膠及動物皮膠中Ccr、S042-、NO，-、P043-4種陰離子的測定方法。結(jié)果表明，4種陰離子分離效果良好，C1-、SO4-、NO3-、PO4分別在0.000 922-0.023 l、0.001 09-0.027 3、0.000 167-0.004 18、0.000 314-0.007 86 mg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，平均加樣回收率在98.7% -101.0%。該測定方法結(jié)果準(zhǔn)確、靈敏、可靠，重現(xiàn)性較好，可用于阿膠及動物皮膠中4種陰離子含量的測定。

關(guān)鍵詞：阿膠;陰離子;離子交換色譜;含量;測定

中圖分類號：065

文獻標(biāo)識碼：A

文章編號：0439-8114（ 2020） 08-0134-04

DOI：IO.14088/j.cnki.issn0439- 8114.2020.08.030

阿膠為馬科動物驢的干燥皮或鮮皮配以冰糖、紹酒、豆油等十幾種輔料經(jīng)煎煮、濃縮制成的固體膠，具有補血止血、滋陰潤燥的功效…?，F(xiàn)代研究表明，其主要由蛋白質(zhì)、多肽、氨基酸和微量元素等構(gòu)成，對阿膠質(zhì)量控制的研究主要針對以上這幾種物質(zhì)，而對于阿膠中陰離子含量的測定尚未見有關(guān)報道。很多學(xué)者認(rèn)為中藥的作用機制不同于西藥，較為復(fù)雜，具有多成分、多靶點的特征作用模式，中藥發(fā)揮藥效是多種成分共同作用的結(jié)果，不僅包括有機物質(zhì)，也包括無機物質(zhì)。因此，對于中藥中無機物質(zhì)的研究也具有重要意義，許多學(xué)者已開始展開了研究[2-4]。為了更全面地控制阿膠的質(zhì)量，對不同廠家阿膠及不同動物皮膠中的陰離子進行了測定，以期找出不同廠家阿膠及不同動物皮膠在陰離子含量上的差異。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品與試劑選取10批福牌阿膠、4批東阿阿膠、2批宏濟堂阿膠、3批馬皮膠、3批新阿膠、3批黃明膠作為供試品。NaF、KCI、Na2S04、KN03、Na2HPO4和NaOH均為分析純，水為高純水。

1.1.2 儀器 DIONEX ICS-1100型離子色譜儀;Suppressed Conductivity電導(dǎo)檢測器;DIONEXAS-DV型自動進樣器;MS205DU型電子天平;KQ5200B型超聲波清洗器。

1.2方法

1.2.1 色譜條件 采用DIONEX IonPacTM ASlI-HC Analytical（4μm×250 mm）離子交換色譜柱，柱溫30℃;流動相為30 mmol/L NaOH溶液，抑制電流為76mA，流速為1.0mL/min，進樣量為10 μL。1.2.2樣品制備

1）對照品溶液的制備。精密稱取NaF 17.5 mg、KCI 16.2 mg.Na2S04 77.0mg.KN03 79.0mg.Na2HP04177.7 mg，置于100 mL容量瓶中，加30mmol/LNaOH溶液溶解并定容，精密量取上述溶液10 μL，置于10 mL容量瓶中，加30 mmol/L NaOH溶液溶解并定容至刻度，用0.45μm微孔濾膜濾過，取濾液即得。

2）供試品溶液的制備。精密稱取本品粗粉0.06 g，置于10 mL容量瓶中，加適量30 mmol/LNaOH溶液超聲使溶解后，再加30 mmol/L NaOH溶液并定容至刻度，用0.45 μm微孔濾膜濾過，取濾液即得。

2 結(jié)果與分析

2.1 樣品及對照品離子交換色譜

5種陰離子混合對照品和樣品的離子交換色譜圖見圖1。

2.2 線性關(guān)系考察

精密稱取KCl 76.0 mg、Na2SO4 80.9 mg、KNO313.6 mg、Na2HPO423.5 mg，置于100 mL容量瓶中，加30 mmol/L NaOH溶液溶解并定容至刻度，分別精密量取上述溶液20、50、100、200、500 μL置于10mL容量瓶中，加30 mmol/L NaOH溶液溶解并定容至刻度，用0.45 μm微孔濾膜濾過，取濾液即得5個系列濃度的對照品混合溶液。將上述溶液分別精密吸取10 μL進樣分析，測定目標(biāo)峰的峰面積值，并以峰面積值（y）對濃度（x）進行回歸分析，分別計算標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，線性關(guān)系見表1。

2.3 精密度試驗

精密吸取第3個濃度對照品溶液10 μL進行離子交換色譜分析，重復(fù)進樣6次，測得Cl、S042-、N03-、P043-峰面積值的RSD （n=6）分別為0.26%、0.24%、0.91%、1.1%，表明該方法精密度良好。

2.4 重復(fù)性試驗

取6份豬皮膠3樣品進行離子交換色譜分析，測定4種陰離子的含量。該批次Cl、S042-、N03-、P043-扣水后的平均含量分別為0.76%、0.10%、0.024%、0.031%，其RSD（n=6）分別為1.2%、3.1%、3.0%、2.7%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.5穩(wěn)定性試驗

取同一份供試品溶液，在0、2、4、8、12、24 h不同時間間隔點進行離子交換色譜分析。結(jié)果表明，Cl、S042-、N03-、P043-峰面積RSD分別為0.071%、0.37%、1.1%、2.1%，表明樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 加樣回收率試驗

精密稱取KCl 308.9 mg、Na2SO440.8 mg、KN0310.6 mg、Na2HPO411.5 mg，置于100 mL容量瓶中，加30 mmol/L NaOH溶液溶解并定容，精密量取上述溶液1 mL，置于50 mL容量瓶中，加30 mmol/LNaOH溶液溶解并定容至刻度。精密稱定6份0.03 9豬皮膠3樣品，置于10 mL容量瓶中，分別精密加入上述對照品儲備溶液5 mL，測定4種陰離子回收率。結(jié)果表明，Cl、S042-、N03-、P043-的平均回收率分另0為98.9%、101.0%、99.4%、98.7%，RSD（n=6）分別為1.5%、2.9%、2.3%、2.0%，表明該方法準(zhǔn)確度良好（表2）。

2.7樣品測定

取阿的膠及其他皮制膠樣品分別進行離子交換色譜分析，計算CI-、S042-、N03-、P043-的含量，含量（按干燥品計）測定結(jié)果見表3。

3 小結(jié)

不同廠家阿膠以及不同動物皮膠中Cl、S042-、N03-、P043-4種陰離子含量有差異，其中豬皮膠含有P043-，而其他動物皮膠未檢出，所有供試品均檢出Cl-、S 042-、N03-3種陰離子。不同動物皮膠中，豬皮膠中Cl-含量較高，達到0.577 6-0.759 5 mg/mL，阿膠含量在0.057 5-0.309 7 mg/mL，牛皮膠含量在0.068 6-0.152 0 mg/mL，馬皮膠含量在0.067 0-0.313 5 mg/mL。宏濟堂阿膠SO4含量最高，其他品牌阿膠及其他動物皮膠均是Cl含量最高[5]。由于豬皮膠、牛皮膠和馬皮膠為同一實驗室、同一組試驗人員熬制，其與其他樣品的差異性推測是原料豬皮與牛皮、馬皮、驢皮之間的差異引起的[6，7]。不同廠家阿膠之間的陰離子含量差異不僅跟原料驢皮有關(guān)，還與生產(chǎn)設(shè)備、生產(chǎn)用水、生產(chǎn)工藝等有關(guān)。

參考文獻：

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[2]郭俊國，畢宏生.離子色譜法測定梔子中Cl，Br_，S042，N03，PO3-5種陰離子的含量[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2013，19（23）：90-93.

[3]謝玉惠，龍興浩.離子色譜法同時測定附子理中丸中6種無機陰離子含量[J].安徽醫(yī)藥，2016，20（8）：1490-1494.

[4]張元，李偉青，周偉娥，等.離子色譜法同時測定丹參注射劑中6種無機陰離子[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2015，21（17）：24-27.

[5]宋玉國，申玉華離子色譜法測定苦碟子注射液中硫酸鹽和亞硫酸鹽[J].藥物分析雜志，2012，32（5）：857-860.

[6]包雪英，劉艷秦.離子色譜法測定金蓮花中多種陰離子研究[J].中草藥，2012（ 23）：168-169

[7]劉冬蓮，石洪凌，劉會媛，等.離子色譜法測定中藥當(dāng)歸中的無機陰離子成分研究[J].唐山師范學(xué)院學(xué)報，2007，29（2）：26.

作者簡介：劉雯（1984-），女，山東平邑人，T程師，博士，主要從事中藥質(zhì)量控制及資源研究，（電話）15163900639（電子信箱）123745789@qq.com，通信作者，李峰（1957-），男，山東安丘人，教授，博士，主要從事中藥質(zhì)量控制及資源研究T作，（電子信箱）842212526@qq.com。