劉寧毅　藍莉

【摘要】 目的：調(diào)查欽州地區(qū)人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染的人群分布特征，以明確HPV感染與宮頸疾病的關(guān)聯(lián)。方法：選擇欽州地區(qū)14 335例疑似感染HPV患者為研究對象，采用核酸擴增和反向點雜交技術(shù)行HPV基因檢測，統(tǒng)計檢測結(jié)果。結(jié)果：HPV陽性患者

3 239例，陽性檢出率為22.60%;共檢出23種HPV基因分型，其中低危型有6種，高危型有17種。慢性宮頸炎患者HPV陽性檢出率為32.8%，低度鱗狀上皮內(nèi)病變患者HPV陽性檢出率為83.4%，高度鱗狀上皮內(nèi)病變患者HPV陽性檢出率為95.6%，宮頸癌患者HPV陽性檢出率為100%。在LSIL、HSIL和宮頸癌患者中，以HPV16、HPV18、HPV52和HPV58四種高危型HPV較常見，其中HPV16和HPV52最常見。HPV陽性高峰年齡段為25～34、35～44、45～54歲，以35～44歲HPV陽性檢出率最高。結(jié)論：欽州地區(qū)HPV感染型別以HPV52、HPV16、HPV58、HPV18為主，多發(fā)于35～44歲人群，不同宮頸病變HPV陽性檢出率具有明顯差異，說明根據(jù)HPV感染情況可鑒別各類宮頸疾病。

【關(guān)鍵詞】 人乳頭瘤病毒感染 宮頸疾病 組織學 檢測

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2020.15.030 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805（2020）15-00-04

Investigation of Human Papillomavirus Infection in Qinzhou Area and Its Association with Cervical Diseases/LIU Ningyi， LAN Li. //Chinese and Foreign Medical Research， 2020， 18（15）： -74

[Abstract] Objective： To investigate the population distribution characteristics of human papillomavirus （HPV） infection in Qinzhou area to clarify the association between HPV infection and cervical disease. Method： A total of 14 335 patients suspected of being infected with HPV in Qinzhou were selected as the research subjects. HPV gene detection was performed by nucleic acid amplification and reverse dot hybridization， and the results were counted. Result： There were 3 239 patients with HPV-positive， and the positive detection rate was 22.60%. A total of 23 HPV genotypes were detected， including 6 types for low-risk types and 17 types for high-risk types. The positive detection rate of HPV in patients with chronic cervicitis was 32.8%. The positive detection rate of HPV in patients with low-grade squamous intraepithelial lesions was 83.4%. The positive detection rate of HPV in patients with high-grade squamous intraepithelial lesions was 95.6%. The positive detection rate of HPV in patients with cervical cancer was 100%. Among LSIL， HSIL and cervical cancer patients， four high-risk types of HPV were more common， including HPV16， HPV18， HPV52 and HPV58， among which HPV16 and HPV52 were the most common. The peak age of HPV-positive was 25 to 34， 35 to 44 and 45 to 54 years old， and the highest positive detection rate of HPV was 35 to 44 years old. Conclusion： The types of HPV infection in Qinzhou area are mainly HPV52， HPV16， HPV58， HPV18， and they are more common in people aged 35 to 44. The positive detection rate of HPV in different cervical lesions are significantly different， indicating that various types of cervical diseases can be identified based on HPV infection.

[Key words] Human papillomavirus infection Cervical disease Histology Detection

First-authors address： The Second Peoples Hospital of Qinzhou， Qinzhou 535000， China

人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）屬于乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒A屬，包含低危型HPV和高危型HPV兩種，其中低危型HPV感染可引發(fā)良性腫瘤和疣，如生長在黏膜上的乳頭狀瘤、疣等，而持續(xù)性高危型HPV感染則可致癌[1]。流行病學調(diào)查結(jié)果顯示，HPV感染可發(fā)生于各年齡段，且HPV感染年齡特異性曲線為雙峰U型[2]。還有數(shù)據(jù)表明，95.0%～99.7%的宮頸癌中存在高危型HPV感染，說明高危型HPV感染是引發(fā)宮頸癌的危險因素[3]。本文主要調(diào)查欽州地區(qū)HPV感染的人群分布特征，并分析HPV不同型別感染與宮頸疾病的相關(guān)性，以期能為該地區(qū)宮頸癌防治工作提供有效的參考，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年1月-2019年6月欽州地區(qū)14 335例疑似感染HPV患者作為研究對象。納入標準：（1）均為女性且月經(jīng)正常;（2）依從性良好。排除標準：（1）標本細胞量過少或標本不合格;（2）資料不全影響統(tǒng)計。年齡17～60歲，平均（40.18±2.05）歲?；颊呔栽讣尤氡狙芯?。

1.2 方法

1.2.1 HPV基因分型檢測 所有患者均行HPV基因分型檢測。為達到最佳檢查效果，檢測人員需指導患者于月經(jīng)來潮后10～18 d到院進行檢測，并叮囑患者在檢查前3 d內(nèi)不可沖洗陰道，不要使用避孕藥等陰道內(nèi)用藥物，檢查前24 h內(nèi)不應(yīng)有性行為，檢查前不進行醋酸或碘液涂抹。采用專用宮頸脫落細胞采集器進行采樣，采樣前先以陰道擴張器或窺陰鏡暴露宮頸，再用棉拭子將宮頸口過多的分泌物擦除，取出宮頸刷置于宮頸口，單方向旋轉(zhuǎn)4～5周以獲得足量的上皮細胞樣本。將宮頸刷頭部放入洗脫管中，沿刷柄折線處將宮頸刷柄折斷，旋緊洗脫管蓋，做好樣本標識，并保持洗脫管直立放置。采集標本后需盡快送檢，先進行HPV DNA提取，方法為：將宮頸刷充分洗脫，并在管壁上擠干，再將洗脫液轉(zhuǎn)移至1.5 ml離心管中進行離心，棄去上清液，保留細胞沉淀，加入50 μl裂解液懸浮沉淀，沸水浴加熱10 min，再次做離心處理，保留上清液待用;再進行PCR擴增、雜交，采用亞能生物技術(shù)（深圳）有限公司提供的基因擴增儀、YN-H16恒溫雜交儀進行檢測，具體方法為：提取5 μl DNA加入HPV基因陣列分型檢測試劑盒提供的

24 μl PCR反應(yīng)體系中，振蕩混勻后置于基因擴增儀進行擴增，擴增條件為72 ℃、30 s，55 ℃、30 s，95 ℃、20 s，95 ℃、9 min，

72 ℃、5 min，共40個循環(huán)，應(yīng)用儀器及配套試劑盒進行導流雜交得出擴增產(chǎn)物[3]。

1.2.2 細胞學檢查 對HPV陽性患者行細胞學檢查。采集宮頸脫落細胞樣本，通過TCT制作細胞薄片。根據(jù)TBS分類標準，報告細胞學結(jié)果。細胞學診斷分正常范圍（WNL）、非典型鱗狀細胞（ASCUS）、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）、非典型鱗狀上皮細胞不能排除高等鱗狀上皮內(nèi)病變（ASCH）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）、宮頸癌。

1.2.3 陰道鏡檢查 對HPV陽性和異常細胞學（ASCUS級別以上）患者均進行陰道鏡檢查。在陰道鏡檢查過程中，對出現(xiàn)異常的子宮頸病變位置進行活檢。陰道鏡檢查和活檢均由本院經(jīng)驗豐富的醫(yī)師進行。詳細記錄陰道鏡和活檢檢查結(jié)果，記錄確診為宮頸病變的患者的診療過程，便于治療后跟蹤回訪。按照病理檢查劃分為宮頸炎、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）和宮頸癌[4]。

1.3 觀察指標及評價標準

（1）統(tǒng)計HPV陽性檢出率和不同型別HPV陽性檢出率。HPV陽性判定標準：HPV基因型位點及IC位點出現(xiàn)顯色信號;HPV陰性判定標準：雜交膜條除IC位點有藍色斑點外，其他位點均不顯色[5]。（2）不同宮頸病變中HPV陽性檢出率。（3）不同年齡段HPV感染情況。（4）不同HPV型別在不同宮頸病變中的分布情況。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 20.0軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV陽性檢出率和不同型別HPV陽性檢出率

14 335例疑似感染HPV患者中有3 239例HPV陽性患者，陽性檢出率為22.60%（3 239/14 335）;共檢出23種HPV基因分型，其中低危型有6種，包含HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV81、HPV83，高危型有17種，包含HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV73、HPV82;低危型以HPV6陽性檢出率最高為5.99%，高危型以HPV52、HPV16和HPV58陽性檢出率最高，分別為20.10%、14.30%和9.30%，見表1。單一型別陽性檢出率為85.00%（2 771/3 239），兩種及以上型別陽性檢出率為15.00%（468/3 239）。

2.2 3 239例不同年齡段HPV感染情況

HPV陽性高峰年齡段為25～34、35～44、45～54歲，以35～44歲HPV陽性檢出率最高，見表2。