楊小虎，薛 萍，張娜娜，鄭永波，楊 程

（平?jīng)鍪袆?dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅 平?jīng)?744000）

平?jīng)鍪俏鞅敝匾男竽翗I(yè)基地和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部劃定的全國(guó)優(yōu)勢(shì)肉牛產(chǎn)區(qū)，平?jīng)黾t牛是當(dāng)?shù)亟?jīng)過(guò)多年雜交選育改良形成的肉牛新類群，自2008年成功注冊(cè)平?jīng)黾t牛活牛商標(biāo)以來(lái)，已成為全市發(fā)展肉牛產(chǎn)業(yè)的核心，在歷屆平?jīng)鍪形⑹姓母叨戎匾暫痛罅Ψ龀窒?，全市牛產(chǎn)業(yè)快速發(fā)展，逐步形成了具有地方特色的平?jīng)黾t牛產(chǎn)業(yè)，日益成為農(nóng)業(yè)增效、農(nóng)民增收、農(nóng)村經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重要支撐。2017年以來(lái)，平?jīng)鍪形⑹姓灾r(nóng)增收、精準(zhǔn)脫貧、共建平?jīng)鲂】禐槟繕?biāo)，平?jīng)黾t牛產(chǎn)業(yè)已成為全市決戰(zhàn)脫貧攻堅(jiān)、決勝全面小康的首要產(chǎn)業(yè)和重要支柱。

口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot-And-Mouth Disease Virus，F(xiàn)MDV）感染引起的偶蹄動(dòng)物共患的急性、熱性、高度接觸性傳染病，牛易感性高，感染后持續(xù)帶毒，被稱為口蹄疫流行的“存儲(chǔ)器”，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織將其列為A類傳染病，我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部將其列為一類動(dòng)物傳染病。研究發(fā)現(xiàn)口蹄疫病毒有O、A、C、Asia1、SAT1、SAT2 和 SAT3 等7個(gè)血清型，血清型間無(wú)交叉免疫現(xiàn)象，目前，在我國(guó)主要流行的有O型和A型。該病防控方法主要包括免疫、撲殺、銷毀病畜及其同群動(dòng)物，歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家主要采用撲殺、銷毀病畜的方法，如歐洲和美洲已經(jīng)消滅該病，我國(guó)主要對(duì)該病實(shí)施免疫和逐步凈化的策略[1]。

為了保障平?jīng)黾t牛產(chǎn)業(yè)良性發(fā)展和高質(zhì)量增長(zhǎng)，結(jié)合省上開展的動(dòng)物疫病定點(diǎn)監(jiān)測(cè)工作，筆者在平?jīng)龅貐^(qū)紅牛養(yǎng)殖密度大、發(fā)生疫情風(fēng)險(xiǎn)較高的地區(qū)選取一個(gè)場(chǎng)點(diǎn)，在2019年5月、8月、11月份分別開展一次口蹄疫血清學(xué)和病原學(xué)定點(diǎn)監(jiān)測(cè)，以期掌握肉?？谔阋卟《久庖呖贵w水平和野毒原感染，為該地區(qū)肉牛主要傳染病防控工作提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 監(jiān)測(cè)點(diǎn)設(shè)置

在平?jīng)龅貐^(qū)肉牛養(yǎng)殖密集、發(fā)生疫情風(fēng)險(xiǎn)較高的地區(qū)選取一個(gè)場(chǎng)點(diǎn)（崇信縣某規(guī)模養(yǎng)牛場(chǎng)），在5月、8月、11月份各開展一次?？谔阋哐鍖W(xué)和病原學(xué)定點(diǎn)監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查工作。

1.2 采樣種類和采樣數(shù)量

據(jù)調(diào)查該養(yǎng)牛場(chǎng)在采樣2月（春季3月份、秋季9月份）前按照免疫程序進(jìn)行了?？谔阋逴型、A型雙價(jià)滅活苗（中牧股份有限公司）免疫接種，在5月、8月、11月份采集牛血清和對(duì)應(yīng)OP液樣品各30份。

1.3 儀器和試劑

口蹄疫病毒通用型實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：FDM20190428P）購(gòu)自哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司；口蹄疫O型液相阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷試劑盒（批號(hào)：20191010101）購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所；口蹄疫A型液相阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)診斷試劑盒（批號(hào)：20190510134）購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所；熒光定量PCR儀（美國(guó)安捷倫）；酶標(biāo)儀（美國(guó)伯樂）；96通道全自動(dòng)洗板機(jī)（美國(guó)伯樂）。

1.4 檢測(cè)方法

牛O型和A型口蹄疫抗體檢測(cè)均按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行；?？谔阋卟《竞怂釞z測(cè)按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果

表1 牛O型和A型口蹄疫免疫抗體檢測(cè)結(jié)果

血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果（見表1）顯示，該養(yǎng)牛場(chǎng)2019年5月、8月、11月份牛O型口蹄疫免疫抗體合格率均保持在60%以上，平均為81.1%，抗體水平較高，只有8月份未達(dá)到免疫抗體合格率70%的要求標(biāo)準(zhǔn)；A型口蹄疫5月、8月、11月份免疫抗體合格率較低，平均為58.8%，均未達(dá)到免疫抗體合格率70%的要求標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果

病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果（見表2）顯示，2019年5月、8月、11月份該養(yǎng)牛場(chǎng)?？谔阋卟《竞怂釞z測(cè)結(jié)果均為陰性。

表2 ?？谔阋卟《竞怂釞z測(cè)結(jié)果

3 討論

牛口蹄疫免疫抗體檢測(cè)結(jié)果表明，該養(yǎng)牛場(chǎng)2019年5月、8月、11月份?？谔阋逴型免疫抗體水平較高，除8月份O型口蹄疫免疫抗體合格率低于70%的標(biāo)準(zhǔn)出現(xiàn)免疫空檔期，5月和11月份處于有效保護(hù)狀態(tài)；A型口蹄疫免疫抗體在5月、8月、11月份合格率均低于70%，無(wú)法給該牛群提供有效保護(hù)，說(shuō)明該牛群口蹄疫疫苗免疫失敗，存在感染A型口蹄疫的風(fēng)險(xiǎn)較大。據(jù)任章章研究報(bào)道[2]：用口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活苗免疫后21 d，試驗(yàn)牛未見不良反應(yīng)，O型、A型免疫抗體合格率分別為85.0%、77.5%。由此可見，只要疫苗保存得當(dāng)，免疫方法正確，畜群處于健康狀態(tài)，O型、A型二價(jià)滅活苗免疫21 d后畜群能夠產(chǎn)生有效保護(hù)抗體水平。本研究A型抗體較低，該次免疫無(wú)法提供A型口蹄疫疫苗對(duì)畜群侵襲的有效保護(hù)，可能與該場(chǎng)飼養(yǎng)管理、疫苗保存和免疫注射方法有關(guān)。據(jù)調(diào)查，該養(yǎng)牛場(chǎng)牛口蹄疫免疫未采用程序化免疫，只簡(jiǎn)單進(jìn)行春秋兩季免疫，從而導(dǎo)致該牛場(chǎng)出現(xiàn)了8月份O型和5月、8月、11月份A型口蹄疫免疫抗體水平均低于抗體合格率為70%的標(biāo)準(zhǔn)（空檔期）。王雅媛等研究表明[3]，陜西省榆林市2017年?？谔阋卟捎么呵飪煞烂庖撸?0 d后O型和A型抗體合格率均低于70%，但在2018年對(duì)部分場(chǎng)采取首免30 d后二免，二免30 d后O型和A型抗體合格率均超過(guò)了80%。為此，根據(jù)本次抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果，該場(chǎng)應(yīng)重新調(diào)整免疫方式，根據(jù)抗體監(jiān)測(cè)結(jié)果制定科學(xué)免疫程序，確保牛群口蹄疫免疫抗體水平常年處于有效保護(hù)狀態(tài)。

病原學(xué)監(jiān)測(cè)結(jié)果表明，2019年該養(yǎng)牛場(chǎng)3次口蹄疫病毒核酸檢測(cè)結(jié)果均為陰性，該場(chǎng)處于口蹄疫免疫無(wú)疫狀態(tài)。據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部官網(wǎng)通報(bào)，2019年國(guó)內(nèi)共發(fā)生5起?？谔阋咭咔?，均為O型，其中4起為輸入性疫情且均發(fā)生在新疆，一起發(fā)生在內(nèi)蒙古，全年未發(fā)生A型口蹄疫疫情。與往年相比，2019年發(fā)生口蹄疫疫情大幅減少，可能與傳染源減少，外加養(yǎng)殖場(chǎng)戶更加注重提高場(chǎng)區(qū)生物安全防護(hù)水平，從而疫情發(fā)生減少。為此，提高平?jīng)黾t牛規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)生物安全防護(hù)水平，嚴(yán)格落實(shí)從非疫區(qū)引入動(dòng)物、落地檢疫、隔離觀察等措施，方能嚴(yán)密防范口蹄疫等重大動(dòng)物疫情輸入，保障該市紅牛產(chǎn)業(yè)健康持續(xù)發(fā)展。

4 結(jié)論

研究表明：平?jīng)黾t牛規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)5月、11月份O型口蹄疫免疫抗體水平高于70%，8月份低于70%，而5月、8月、11月份A型口蹄疫免疫抗體水平均低于70%，A型口蹄疫免疫效果較差，達(dá)不到保護(hù)效果，應(yīng)重新調(diào)整免疫程序加強(qiáng)免疫；2019年3次監(jiān)測(cè)該場(chǎng)無(wú)口蹄疫野毒感染。本研究為平?jīng)黾t牛規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)口蹄疫免疫程序的制定和防控工作提供了依據(jù)。