李依然 張明海 曲鳳儀 宋昊卓 田 野

(東北林業(yè)大學(xué)，哈爾濱，150040)

目前我國(guó)人工繁育的野生動(dòng)物沒有專用的飼料添加劑，人工繁育過程中大多使用畜禽專用制劑，雖然在促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育、提高繁殖率等方面起到了很大作用，但也伴隨而來一些負(fù)面影響，如在飼料中長(zhǎng)期或過度使用抗生素，導(dǎo)致動(dòng)物產(chǎn)品中抗生素殘留、超標(biāo)等問題，給動(dòng)物產(chǎn)品和公共衛(wèi)生帶來安全隱患[1-2]。所以科研工作者極力尋求野生動(dòng)物飼養(yǎng)過程中抗生素類飼料添加劑的安全替代品。

中草藥因其具有藥食同源、低殘留等特性，近年來在飼料行業(yè)中作為添加劑應(yīng)用很廣泛。中草藥飼料添加劑在動(dòng)物飼養(yǎng)中能夠起到預(yù)防疾病、提高動(dòng)物機(jī)體對(duì)外界病原體侵害的抵抗能力以及對(duì)機(jī)體損傷的修復(fù)起到重要作用。研究和開發(fā)中草藥飼料添加劑，并應(yīng)用于動(dòng)物養(yǎng)殖，已被飼料行業(yè)普遍認(rèn)同[3]。

動(dòng)物由于各種不同應(yīng)激因素(如飼料改變、低溫、過熱、低氧、使役過度、生活環(huán)境改變、疫苗接種等)的影響，容易引發(fā)全身性的非特異性反應(yīng)，這是生物機(jī)體對(duì)外界以及內(nèi)在應(yīng)激反應(yīng)的一種適應(yīng)性機(jī)制[4]。在動(dòng)物飼養(yǎng)繁育過程中，過強(qiáng)的應(yīng)激反應(yīng)可造成動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育停滯及繁殖障礙，降低產(chǎn)品質(zhì)量，甚至造成死亡。

本實(shí)驗(yàn)采用灌胃的方式對(duì)不同組別的小白鼠直接灌服不同濃度的中草藥飼料添加劑，在不同應(yīng)激條件下與生理鹽水對(duì)照組動(dòng)物進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)，并對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析。本實(shí)驗(yàn)旨在探討項(xiàng)目組所研制的添加劑對(duì)動(dòng)物應(yīng)激反應(yīng)的影響，以期為野生動(dòng)物飼養(yǎng)繁育中利用中草藥制劑提供可靠的參考依據(jù)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

昆明種健康小白鼠200只，體重18—22 g，由黑龍江省中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，飼養(yǎng)觀察3—5 d確定健康后用于實(shí)驗(yàn)。

1.2 飼料

機(jī)制鼠料塊，由哈爾濱市萬方實(shí)驗(yàn)動(dòng)物廠提供。

1.3 藥品

項(xiàng)目組自行研制的中草藥飼料添加劑，主要成分為黃芪多糖、板藍(lán)根、黃芩、甘草等。

1.4 主要儀器

超凈工作臺(tái)(型號(hào)為SW-CZ-2F型)，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司；電熱恒溫水浴鍋，江蘇常熟醫(yī)療器械廠生產(chǎn)；立式自動(dòng)電熱壓力蒸汽滅菌器(型號(hào)為YXQ—LS—50SⅡ)，上海博訊實(shí)業(yè)有限公司生產(chǎn)；真空干燥箱(型號(hào)為DIF-6050)，上海一恒科技有限公司生產(chǎn)。

2 方法

2.1 抗熱應(yīng)激實(shí)驗(yàn)

選取昆明種小白鼠40只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組，每組10只，即中草藥飼料添加劑高、中、低劑量組和生理鹽水對(duì)照組，每組分別灌服0.4%、0.2%、0.1%本添加劑的水溶液和生理鹽水。每日灌服1次，每次灌服劑量為0.2 mL/10 gbw，連續(xù)給藥10 d。給藥結(jié)束后，將小白鼠逐個(gè)放入55 ℃恒溫鼓風(fēng)干燥箱中，觀察并記錄小白鼠死亡時(shí)間。

2.2 小鼠負(fù)荷游泳實(shí)驗(yàn)

選取雄性昆明種小白鼠40只，隨機(jī)分為4個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組10只，即中草藥飼料添加劑高、中、低劑量組和生理鹽水對(duì)照組，每組分別灌服0.4%、0.2%、0.1%本添加劑的水溶液和生理鹽水。每日灌胃1次，每次灌藥體積為0.1 mL/10 kg，連續(xù)灌藥30 d。于末次灌胃30 min后，將小白鼠尾根部負(fù)荷5%體重的鉛塊，然后將其放入水深30 cm、水溫25 ℃的游泳箱中，觀察并記錄小白鼠開始游泳至死亡的時(shí)間。

2.3 小白鼠常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)

選取雄性昆明種小白鼠40只，隨機(jī)分為4個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組10只，即中草藥飼料添加劑高、中、低劑量組和生理鹽水對(duì)照組，每組分別灌服0.4%、0.2%、0.1%本添加劑的水溶液和生理鹽水。每日灌胃1次，每次灌藥體積為0.1 mL/10 kg，連續(xù)灌藥10 d。末次灌胃1 h后，取250 mL廣口瓶，加入鈉石灰30 g，每瓶放入1只小白鼠，將其蓋用凡士林密封，觀察并記錄每只小白鼠的死亡時(shí)間。

3 結(jié)果與分析

3.1 抗熱應(yīng)激實(shí)驗(yàn)

結(jié)果見表1。

表1 抗熱應(yīng)激實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.1 Experimental results of heat stress resistance

由表1可見，與生理鹽水對(duì)照組相比較，中草藥飼料添加劑高、中劑量組差異極顯著(P<0.01)，中草藥飼料添加劑低劑量組差異顯著(P<0.05)，說明本項(xiàng)目所研制的中草藥飼料添加劑具有良好的抗熱應(yīng)激作用。

3.2 小鼠負(fù)荷游泳實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 小白鼠負(fù)荷游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.2 Results of load swimming experiment on mice

由表2可見，與生理鹽水對(duì)照組相比較，中草藥飼料添加劑高劑量組差異極顯著(P<0.01)；中劑量組差異顯著(P<0.05)；低劑量組差異不顯著，中草藥高、中、低劑量組都能延長(zhǎng)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，說明本項(xiàng)目所研制的中草藥飼料添加劑具有抗疲勞作用。

3.3 小白鼠常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。

表3 小白鼠常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.3 Results of hypoxia tolerance under normal pressure in mice

由表3可見，添加劑各劑量組與生理鹽水對(duì)照組相比，可明顯延長(zhǎng)小白鼠在窒息性缺氧環(huán)境下的存活時(shí)間(P<0.05)，表明本項(xiàng)目所研制的中草藥飼料添加劑具有良好的耐缺氧能力。

4 討論

中草藥飼料添加劑具有促進(jìn)動(dòng)物機(jī)體生長(zhǎng)、抗病防疫、增強(qiáng)抵抗力、改善肉質(zhì)等多種功效[5-6]。復(fù)方制劑作為多藥劑的聯(lián)合用藥形式，能發(fā)揮不同成分的藥性，副作用極小，每種成分相互協(xié)同，部分中草藥如藍(lán)樹(Wrightialaevis)、馬齒莧(Portulacaoleracea)、青羊參(Cynanchumotophyllum)、山楂(Crataeguspinnatifida)等具有補(bǔ)氣健胃，祛風(fēng)除濕，涼血解毒等功效。以板藍(lán)根為主的復(fù)方制劑能提高肉仔雞料肉比、繁殖率等生產(chǎn)性能，同時(shí)有效增強(qiáng)法氏囊、胸腺等器官的免疫能力[7]。

5 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)研究表明項(xiàng)目組所研制的中草藥飼料添加劑能夠顯著提高小白鼠抗應(yīng)激能力，在野生動(dòng)物人工繁育中可完全或部分替代抗生素類飼料添加劑，為中草藥飼料添加劑在野生動(dòng)物人工繁育的臨床應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。