王英華 ， 王 翠 ， 靳 冬 ， 楊海波 ， 劉 敏 ， 方先珍 ， 閆若潛

(河南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 ， 河南 鄭州 450008)

當(dāng)前重大動(dòng)物疫情形勢(shì)復(fù)雜，基層防疫能力薄弱，通過開展種豬場(chǎng)主要?jiǎng)游镆卟艋ぷ?，可有效減少父母代場(chǎng)、商品場(chǎng)等養(yǎng)殖場(chǎng)的疫病隱患，緩解動(dòng)物疫病防控壓力；可有效改善養(yǎng)殖場(chǎng)的防疫條件、生物安全和管理水平，提高綜合防治能力；可有效保障養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展和公共衛(wèi)生安全。自2013年以來，河南省將豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬病和口蹄疫定為種豬場(chǎng)主要凈化病種，省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心和18個(gè)省轄市、10個(gè)直管縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心等29個(gè)監(jiān)測(cè)單位常年對(duì)種豬場(chǎng)進(jìn)行豬瘟、豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬病和口蹄疫凈化方案指導(dǎo)和監(jiān)測(cè)、淘汰、凈化工作。

1 材料與方法

1.1 主要試劑 豬瘟病毒野毒株實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司；豬繁殖與呼吸綜合征病原檢測(cè)試劑盒(高致病性與經(jīng)典株鑒別熒光RT-PCR)，購(gòu)自洛陽萊普生生物技術(shù)有限公司；豬瘟病毒抗體檢測(cè)試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測(cè)試劑盒、豬偽狂犬病gI抗體檢測(cè)試劑盒和豬偽狂犬病gB抗體檢測(cè)試劑盒，均購(gòu)自美國(guó)艾德士生物技術(shù)有限公司；口蹄疫3ABC抗體檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

1.2 樣品采集及處理 2013-2017年每年度在河南18個(gè)省轄市和10個(gè)直管縣所有種豬場(chǎng)采集育肥豬、經(jīng)產(chǎn)母豬、種公豬的扁桃體或精液及對(duì)應(yīng)的血清樣品30～50份/場(chǎng)，進(jìn)行病原學(xué)(感染抗體)和抗體檢測(cè)。扁桃體樣品用專用采樣器進(jìn)行采樣，樣品裝入無菌離心管，-20 ℃保存。用無菌離心管取種豬精液2～3 mL，-20 ℃保存。用一次性采血器采集豬只前腔靜脈血，溫箱37 ℃放置1～2 h后，以4 000 r/min離心5 min，取上清液轉(zhuǎn)入新的無菌離心管，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 病原學(xué)檢測(cè) 豬瘟病毒檢測(cè)按照豬瘟病毒野毒株實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行；豬繁殖與呼吸綜合征毒按照豬繁殖與呼吸綜合征病病原檢測(cè)試劑盒(高致病性與經(jīng)典株鑒別熒光RT-PCR)說明書進(jìn)行。

1.4 血清學(xué)檢測(cè) 豬瘟抗體按照豬瘟病毒抗體檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行；豬繁殖與呼吸綜合征抗體按照豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行；豬偽狂犬病豬gI、gB抗體分別按照豬偽狂犬病gI抗體檢測(cè)試劑盒和豬偽狂犬病gB抗體檢測(cè)試劑盒說明書進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 病原學(xué)(或感染抗體)檢測(cè)結(jié)果 2013-2017年河南省種豬場(chǎng)豬瘟病原學(xué)個(gè)體陽性率分別為5.07%、1.19%、0.18%、0和0，群體陽性率分別為9.43%、2.13%、0.67%、0和0，自2013年河南全省種豬場(chǎng)開展豬瘟凈化至今，種豬場(chǎng)豬瘟病原的檢出率呈逐年下降趨勢(shì)，2016年和2017年連續(xù)兩年全省種豬場(chǎng)豬瘟病原未檢出。

2013-2017年河南省種豬場(chǎng)豬偽狂犬病gE抗體個(gè)體陽性率分別為45.39%、44.97%、37.65%、24.92%和25.19%，自2013年河南全省種豬場(chǎng)開展豬偽狂犬病凈化工作，至2016年種豬場(chǎng)豬偽狂犬病gE抗體陽性率呈逐年下降趨勢(shì)，2017年豬偽狂犬病gE抗體陽性率比2016年稍高。

2013-2017年河南省種豬場(chǎng)豬繁殖與呼吸綜合征病原學(xué)個(gè)體陽性率分別為3.9%、0.85%、1.87%、2.48%和0.78%，群體陽性率分別為7.02%、4.35%、7.86%、11.64%和4.94%，自2013年河南全省種豬場(chǎng)開展豬繁殖與呼吸綜合征凈化至今，種豬場(chǎng)豬繁殖與呼吸綜合征病原陽性率先下降又升高又下降的趨勢(shì)，具有反復(fù)性。

2013-2017年河南省種豬場(chǎng)口蹄疫3ABC個(gè)體陽性率分別為0、1.68%、26.85%、12.85%和3.73%，群體陽性率分別為0、14.41%、35.35%、42.37%和27.98%(見表1、2)。

表1 2013-2017年種豬場(chǎng)主要凈化豬病病原學(xué)(或感染抗體)監(jiān)測(cè)情況統(tǒng)計(jì)

表2 2014-2017年種豬場(chǎng)主要凈化豬病病原學(xué)(或感染抗體)陽性率 (%)

2.2 血清學(xué)(免疫效果)檢測(cè)結(jié)果 2013-2017年豬瘟免疫抗體合格率分別為85.76%、85.85%、87.84%、87.55%和87.99%，呈逐年小幅上升趨勢(shì)；豬繁殖與呼吸綜合征抗體陽性率分別為88.63%、85.89%、86.13%、86.49%和85.37%，5年來均保持在85%以上；豬偽狂犬病免疫抗體合格率分別為85.24%、90.21%、87.74%和94.19%，免疫抗體合格率不穩(wěn)定，呈升升降降趨勢(shì)；口蹄疫免疫抗體合格率分別為86.08%、84.45%、86.76%、84.14%和85.82%，5年來維持在84%以上(見表3、4)。

表3 2014-2017年種豬場(chǎng)主要凈化豬病免疫效果監(jiān)測(cè)情況統(tǒng)計(jì)

表4 2013-2017年種豬場(chǎng)主要凈化豬病平均免疫抗體合格率

3 討論

3.1 2013-2017年河南省種豬場(chǎng)豬瘟、豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸綜合征和口蹄疫平均抗體合格率均保持在84%以上，超過了國(guó)家規(guī)定的70%的標(biāo)準(zhǔn)。

3.2 自2013年開展種豬場(chǎng)主要疫病凈化工作5年來，豬瘟免疫抗體合格率呈逐年升高趨勢(shì)，2017年種豬場(chǎng)豬瘟平均免疫抗體合格率上升至87.99%，豬瘟病原連續(xù)2年檢測(cè)陰性，基本達(dá)到了免疫凈化階段，河南種豬場(chǎng)豬瘟凈化取得了一定成效。豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸綜合征和口蹄疫由于病毒自身的特點(diǎn)，易變異，病原陽性率和免疫抗體合格率時(shí)高時(shí)低，使得凈化難度加大。這與中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心主任陳偉生的觀點(diǎn)契合：動(dòng)物疫病凈化具有長(zhǎng)期性、反復(fù)性[1]。

3.3 自2013年河南省對(duì)全省種豬場(chǎng)主要疫病開展進(jìn)化工作以來，除了種豬場(chǎng)外，河南省其他豬場(chǎng)(包括散養(yǎng)戶)，豬瘟病原個(gè)體陽性率呈逐年下降趨勢(shì)，群體陽性率也呈逐年下降趨勢(shì)。2013年河南所有監(jiān)測(cè)豬群豬瘟病原個(gè)體陽性率為0.86%，2017年降至0.15%，比2013年下降0.71個(gè)百分點(diǎn)；群體陽性率2013年為3.01%，2017年降至0.92%，比2013年下降2.09個(gè)百分點(diǎn)。由此可見種豬場(chǎng)的豬瘟凈化減少了下游豬場(chǎng)的疫病隱患，緩解了動(dòng)物疫病防控壓力。種畜禽疫病凈化是凈化工作的重中之重[2-3]。

3.4 河南種豬場(chǎng)主要疫病凈化工作雖然取得了一定成效，但是疫病復(fù)雜，比如豬繁殖與呼吸綜合征、豬偽狂犬病和口蹄疫病毒變異較快，因此疫病凈化工作任重而道遠(yuǎn)，我們需要繼續(xù)探索更加有效的動(dòng)物疫病凈化的長(zhǎng)效機(jī)制[4]。