劉皓涵，梁琪琪，王國良，潘建龍，張潤光，張有林

(1.陜西師范大學 食品工程與營養(yǎng)科學學院，西安 710119； 2.安康市瀛天生態(tài)農林開發(fā)有限公司，陜西 安康 725000)

我國核桃種植歷史悠久且種植面積廣泛，目前核桃加工主要集中在油脂的榨取和核桃仁加工小食品方面。核桃仁中油脂含量高達60%～70%，油脂中不飽和脂肪酸含量高達90%[1-2]，其中亞麻酸為人體必需脂肪酸，對防治心腦血管疾病、降低動脈粥樣硬化發(fā)病率及控制血糖指數(shù)均有顯著作用，被譽為“21世紀綠色營養(yǎng)保健食品”[3-5]。有文獻報道，通過飲食攝取適量亞麻酸可以降低因心血管疾病導致的死亡率[6-7]，降低2型糖尿病(T2DM)的發(fā)生率，改善T2DM受試者對胰島素的反應能力[8]。目前對于核桃油中分離純化亞麻酸的研究較少，對核桃油亞麻酸營養(yǎng)功能的研究更少。本文采用本實驗室已有方法制備的核桃油亞麻酸，將其灌胃高脂小鼠，測定小鼠血脂和肝臟指標，以核桃油和花生油作對照，研究核桃油亞麻酸對小鼠血脂和肝功能的影響。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

核桃：香玲核桃，購自西安市朱雀農產品市場。花生油：魯花5S壓榨一級油(非轉基因)，購自永輝超市。昆明小鼠：雄性，體重(22.0±2.0)g，空軍軍醫(yī)大學實驗動物中心提供?；A飼料(亞麻酸含 量≤ 0.4%)，空軍軍醫(yī)大學實驗動物中心提供；高脂飼料，用80%基礎飼料、13.5%豬油、4.0%膽固醇、0.5%膽酸鈉配制而成；甲醇、乙醇、硫酸、無水硫酸鈉、尿素、丙酮、鹽酸、石油醚、氫氧化鉀等均為分析純；異辛烷為色譜純；混合脂肪酸甲酯標準品(純度>99.8%)，購于美國Sigma公司；甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、總膽固醇(TC)測定試劑盒，購于西安晶博生物技術有限公司。

RE-52型旋轉蒸儀；TRACE2000型氣相色譜儀，美國熱電公司；PHS-3C型精密pH計；TDL80-2B型離心沉淀機；JB-3型定時恒溫磁力攪拌器。

1.2 實驗方法

1.2.1 核桃油亞麻酸制備

將香玲核桃液壓壓榨得到核桃油，采用本實驗室方法制備核桃油亞麻酸[9]。

1.2.2 小鼠飼喂實驗設計

參考文獻[10]中的方法略有修改。選取健康雄性昆明小鼠110只，基礎飼料適應性喂養(yǎng)3 d，隨機分為11個小組(見表1)，空白對照組(G1)飼喂基礎飼料，高脂模型組(G2)飼喂高脂飼料，實驗組(G3～G11)在飼喂高脂飼料的同時，每天上午8點分別以不同劑量的核桃油、亞麻酸及花生油灌胃。各組自由飲水，自然光照，30 d后各組小鼠均禁食12 h并稱重。

表1 實驗小鼠劑量設計及分組

1.2.3 小鼠血脂指標測定及動脈硬化指數(shù)計算

小鼠禁食12 h后摘除眼球，眼眶采血，血液于3 000 r/min離心5 min得到血清，當天用試劑盒法測定TG、TC、HDL-C、LDL-C含量。按下式計算動脈硬化指數(shù)。

1.2.4 小鼠肝臟系數(shù)測定

小鼠取血后，隨即引頸處死，立即取出肝臟，用生理鹽水清洗，濾紙吸去多余水分并稱重，按下式計算肝臟系數(shù)。

1.2.5 數(shù)據(jù)處理

2 結果與分析

2.1 核桃油亞麻酸純度

經(jīng)測定，采用本實驗室分離純化方法得到的核桃油亞麻酸含量較高，由9.8%提高到97.2%。

2.2 核桃油亞麻酸對小鼠體重的影響(見圖1)

實驗開始時各組間小鼠體重無顯著差異(p>0.05)。由圖1可以看出，在給小鼠連續(xù)灌胃30 d不同劑量的花生油、核桃油、亞麻酸后，與高脂模型組相比，小鼠的體重均顯著降低(p<0.05)。高脂模型組小鼠體重顯著高于空白對照組(p<0.05)。在不同劑量花生油與核桃油中，高劑量組小鼠體重高于中、低劑量組的(p<0.05)。不同劑量亞麻酸組中，高劑量組小鼠體重則顯著低于中、低劑量組的(p<0.05)。亞麻酸組降低小鼠體重更為顯著。

注：圖中不同小寫字母表示組間存在顯著性差異(p<0.05),下同。

2.3 核桃油亞麻酸對小鼠血脂的影響

2.3.1 對血清中TC及TG的影響(見圖2)

注：圖中不同大寫字母表示組間存在顯著性差異(p<0.05)，下同。

由圖2可以看出，高脂模型組與空白對照組相比，小鼠血清TC、TG水平顯著升高(p<0.05)。在灌胃30 d后，不同劑量組小鼠體內血清TC、TG水平均顯著低于高脂模型組(p<0.05)。且高劑量組的核桃油、花生油與中、低劑量組差異顯著(p<0.05)。亞麻酸降低小鼠血清TC、TG水平能力更高，亞麻酸高劑量組與對應的中、低劑量組相比差異顯著(p<0.05)。說明不同劑量的核桃油、花生油、亞麻酸均可有效降低小鼠血清TC、TG水平，以亞麻酸降低能力更優(yōu)。

2.3.2 對血清中HDL-C和LDL-C的影響(見圖3)

由圖3可以看出，與空白對照組比較，小鼠灌胃30 d后，高脂模型組小鼠HDL-C顯著降低(p<0.05)，LDL-C顯著升高(p<0.05)。花生油、核桃油、亞麻酸組小鼠血清HDL-C水平均高于高脂模型組，而LDL-C水平低于高脂模型組，以亞麻酸最好，核桃油次之。在亞麻酸組中，隨著灌胃劑量的增加，HDL-C水平呈顯著升高趨勢，LDL-C水平呈顯著降低趨勢。

圖3 不同劑量花生油、核桃油、亞麻酸對HDL-C和LDL-C的影響

2.3.3 對動脈硬化指數(shù)的影響(見圖4)

圖4 不同劑量花生油、核桃油、亞麻酸對動脈硬化指數(shù)的影響

由圖4可以看出，小鼠灌胃30 d后，高脂模型組和空白對照組相比小鼠動脈硬化指數(shù)顯著升高(p<0.05)，表明模型建造成功。不同劑量組與高脂模型組相比差異顯著(p<0.05)，說明不同劑量的花生油、核桃油、亞麻酸均顯著降低小鼠患高脂血癥的可能性。不同劑量的亞麻酸組，小鼠動脈硬化指數(shù)比花生油、核桃油下降更顯著。結果表明，核桃油亞麻酸具有降低高脂小鼠動脈粥樣硬化危險性的作用。

2.4 核桃油亞麻酸對小鼠肝臟的影響(見圖5)

圖5 不同劑量花生油、核桃油、亞麻酸對小鼠肝臟質量與肝臟系數(shù)的影響

由圖5可以看出，灌胃30 d與空白對照組相比，高脂模型組及不同劑量組的花生油、核桃油、亞麻酸組小鼠肝臟質量和肝臟系數(shù)均有顯著差異(p<0.05)。與高脂模型組比較，不同花生油、核桃油、亞麻酸劑量組的小鼠肝臟質量與肝臟系數(shù)均顯著降低(p<0.05)，且中、低劑量組的花生油與核桃油對于降低小鼠肝臟質量和肝臟系數(shù)的影響顯著高于高劑量組。隨著亞麻酸劑量的增加，小鼠肝臟質量和肝臟系數(shù)呈顯著降低趨勢。由此可知，不同劑量的核桃油、花生油、亞麻酸均可顯著降低高脂小鼠體內肝臟質量與肝臟系數(shù)，以亞麻酸作用更為顯著。

3 結 論

采用本實驗法制備的純度為97.2%的核桃油亞麻酸對高脂小鼠連續(xù)灌胃30 d，測定小鼠血脂和肝臟指標。結果發(fā)現(xiàn)：核桃油亞麻酸可顯著降低小鼠血液中動脈硬化指數(shù)、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量，提高血液中高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量，防治小鼠高脂血癥和動脈粥樣硬化作用顯著，且效果優(yōu)于花生油和核桃油。