薛鳴 耿超

【摘 要】目的：探討胸苷激酶1在結(jié)腸癌患者血清中的表達(dá)，為患者診斷、治療提供參考。方法：2016年5月-2017年4月北大醫(yī)療魯中醫(yī)院初診結(jié)腸癌病人94例，設(shè)為觀察組。取相同時(shí)期入院的健康體檢者70例，設(shè)為對(duì)照組。采用化學(xué)發(fā)光聯(lián)合斑點(diǎn)雜交的技術(shù)檢測兩組TK1水平;對(duì)于觀察組患者中的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者給予化學(xué)治療，治療后再次完成TK1水平測定;對(duì)觀察組中的手術(shù)治療患者分析血清TK1與其病理的相關(guān)性。結(jié)果：觀察組TK1、CEA、CA199水平，均高于對(duì)照組（P<0.05）;遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者血清TK1高于局部可手術(shù)患者（P<0.05）。不同腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合診斷優(yōu)于單一腫瘤標(biāo)志物診斷。PR患者治療后TK1水平，均低于SD及PD患者，PR患者治療后TK1較化療前顯著降低（P<0.05）。提示TK1早于CEA、CA199提前預(yù)測腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移。結(jié)論：TK1評(píng)估結(jié)腸癌患者化療療效顯著，建議聯(lián)合影像學(xué)檢查綜合判定;TK1可作為結(jié)腸癌患者手術(shù)效果的判定及復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的預(yù)測指標(biāo)之一。

【關(guān)鍵詞】胸苷激酶1;結(jié)腸癌;癌胚抗原

Abstract：Objective To investigate the expression of thymidine kinase 1 in serum of patients with colon cancer， and to provide a reference method for diagnosis and treatment of patients.Methods： 94 patients with colon cancer newly diagnosed in PKUCare Luzhong Hospital from May 2016 to April 2017 were set as observation group. 70 healthy patients admitted to the hospital in the same period were selected as the control group. The TK1 levels of the two groups were detected by chemiluminescence combined spot hybridization. Chemotherapy was given to patients with distant metastasis in the observation group， and TR1 level was measured again after treatment. The correlation between serum TK1 and pathology was analyzed in the observation group. Results： the levels of TK1， CEA and CA199 in the observation group were higher than those in the control group （P<0.05）. The serum TK1 of patients with distant metastasis was higher than that of patients with local surgery （P<0.05）， and the combined diagnosis of different tumor markers was better than that of single tumor marker. The TK1 level of PR patients after treatment was lower than that of SD patients and PD patients， and the TK1 level of PR patients after treatment was significantly lower than that before chemotherapy （P<0.05）， suggesting that TK1 was earlier than CEA and CA199 in predicting tumor recurrence and metastasis.Conclusion： TKL evaluation of colon cancer patients with significant curative effect of chemotherapy， it is recommended to combine imaging examination comprehensive judgment; TK1 can be used as a predictor of recurrence and metastasis in patients with colon cancer

Key words： thymidine kinase 1;colon cancer;cancer embryo antigen

隨著基因檢測及病理技術(shù)的進(jìn)展，靶向藥物在結(jié)腸癌患者中得到應(yīng)用，提高了治療的有效率。而腫瘤標(biāo)志物在診斷和判斷預(yù)后，腫瘤分類以及制定最佳治療方案方面發(fā)揮重要作用[1]。胸苷激酶1（Thymidine Kinase，TK1）是人體內(nèi)重要的生物酶，能促進(jìn)胸苷嘧啶磷酸化，參與DNA復(fù)制和細(xì)胞增殖。正常細(xì)胞分裂后體液中不存在TK1。多項(xiàng)大樣本臨床調(diào)查結(jié)果均顯示，癌癥患者血清TK1活性是明顯升高的[2]。通過觀察TK1水平變化，以早期篩查腫瘤，評(píng)價(jià)患者預(yù)后及監(jiān)控患者治療效果。

1 材料和方法

1.1 資料

2016年5月-2017年4月在北大醫(yī)療魯中醫(yī)院初診的結(jié)腸癌患者94例，年齡（60.74±10.91）歲，設(shè)為觀察組，其中21例因出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，未行手術(shù)治療。余73例患者均行結(jié)腸癌根治術(shù)。術(shù)后腫瘤TNM分期：I期5例，II期27例，III期41例。術(shù)后行規(guī)范輔助治療及定期復(fù)查，中位隨診時(shí)間1.5年，共隨訪70例患者。取同期入院健康體檢者70例，設(shè)為對(duì)照組，男42例，女28例，年齡（35-86）歲，平均（61.91±7.54）歲。

1.2 方法

對(duì)照組清晨空腹采集靜脈血6ml;觀察組術(shù)前、術(shù)后1月、術(shù)后3月均清晨空腹采集靜脈血6ml，注入一次性真空采血管中，靜置30分鐘后以3000r/min的速度離心20分鐘，血清置于-20°冰箱中保存?zhèn)溆?，檢測前2-8°解凍，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。采用點(diǎn)印跡免疫酶化學(xué)法測定。血清CEA、CA199水平測定：采用全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀，配套試劑，采用電化學(xué)發(fā)光法。嚴(yán)格按規(guī)則執(zhí)行，該工作由我院檢驗(yàn)科完成。

1.3 資料歸納整理

臨床資料主要包括患者性別、年齡（≥60歲及<60歲）、術(shù)后病理、是否遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、腫瘤形態(tài)、腫瘤大?。ā?cm及<4cm）、腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、HER-2及Ki67表達(dá)情況。觀察組與對(duì)照組腫瘤標(biāo)志物水平。觀察TK1、CEA、CA199不同指標(biāo)在結(jié)腸癌患者診斷中的特異性、敏感性。血清TK1濃度與術(shù)后病理特征及患者一般情況的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

運(yùn)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié)果

2.1 臨床特征：94例結(jié)腸癌患者中男性56例，女性38例，平均年齡（60.74±10.91）歲，其中低分化腺癌51例，中高分化腺癌43例，I期5例，II期27例，III期41例，IV期21例。觀察組TK1、CEA、CA199水平，均高于對(duì)照組（P<0.05），觀察組中遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)患者的TK1、CEA、CA199水平均高于局部可手術(shù)患者（P<0.05）。

2.2 結(jié)腸癌根治術(shù)患者血清TK1水平與病理特征關(guān)系：結(jié)腸癌患者血清TK1水平與腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、TNM分期、Ki67的表達(dá)、Her-2的表達(dá)有明顯相關(guān)性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;而在性別、年齡、腫瘤形態(tài)、腫瘤分化程度方面差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。CEA與性別、年齡、腫瘤形態(tài)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Ki67的表達(dá)、Her-2的表達(dá)均無關(guān)（P>0.05），而與腫瘤分化程度及TNM分期有關(guān)（P<0.05）。

3 討論

臨床研究證實(shí)TK1能夠作為惡性腫瘤的預(yù)測指標(biāo)，結(jié)腸癌患者血清中均存在不同程度的TK1水平的升高。TK1水平與癌癥預(yù)后密切相關(guān)。本研究通過檢測結(jié)腸癌組、健康人血清TK1水平，結(jié)果證實(shí)結(jié)腸癌組患者TK1水平明顯高于健康對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究中，21例遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移患者其TK1、CEA、CA199水平，均明顯高于可手術(shù)患者（P<0.05）。TK1為細(xì)胞增殖標(biāo)志物，考慮與腫瘤臨床分期越晚，腫瘤細(xì)胞負(fù)荷越重有關(guān)。因此，臨床上結(jié)腸癌患者加強(qiáng)TK1水平測定能對(duì)患者的早期診斷提供幫助，對(duì)患者的病情變化給予正確評(píng)估，指導(dǎo)臨床合理的診斷和治療。

多項(xiàng)臨床研究證實(shí)血清TK1較其他腫瘤標(biāo)志物在篩查惡性腫瘤方面更敏感，聯(lián)合檢測腫瘤標(biāo)志物可提高診斷的敏感性及特異性。但目前單獨(dú)檢測TK1水平難以達(dá)到滿意效果，需要聯(lián)合其他檢查方法[3]。本研究也得出相同結(jié)論，與CEA、CA199相比較，TK1在結(jié)腸癌診斷中的敏感性最高，為86%，其次為CEA 68%，CA199為67%;CEA特異性最高為97%，其次為TK1 93%;三項(xiàng)聯(lián)合診斷實(shí)驗(yàn)的敏感性和特異性最高，均為93%;不同腫瘤物聯(lián)合診斷優(yōu)于單一腫瘤標(biāo)志物診斷。因此，血清TK1檢測聯(lián)合其他腫瘤標(biāo)志物可以提高結(jié)腸癌的診斷。

結(jié)腸癌根治術(shù)為早期結(jié)腸癌首選的治療方法，然而術(shù)后的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)嚴(yán)重影響著這類患者的預(yù)后。重要的原因之一是缺乏可靠的標(biāo)志物預(yù)測遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或局部復(fù)發(fā)的發(fā)生。雖然超聲、CT等影像學(xué)檢查能夠評(píng)估腫瘤大小及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，但是仍然無法發(fā)現(xiàn)血液中的微病灶，不能真實(shí)的反映出腫瘤的負(fù)荷情況。眾多學(xué)者致力于研究能夠?qū)ふ夷軌蝾A(yù)測復(fù)發(fā)的臨床指標(biāo)，如CEA、CA199、CA242等，但是臨床使用中仍不十分準(zhǔn)確。術(shù)前高血清TK1水平者復(fù)發(fā)或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)更高。TK1能夠反映腫瘤細(xì)胞增殖情況，與全身腫瘤負(fù)荷具有相關(guān)性。我們在對(duì)比研究中發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸癌根治術(shù)后患者TK1水平明顯下降。對(duì)相關(guān)病理特征進(jìn)行單因素分析，發(fā)現(xiàn)TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、術(shù)前高TK1水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其他指標(biāo)無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。多因素分析，結(jié)果顯示術(shù)前TK1水平為獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

4 結(jié)論

TK1評(píng)估結(jié)腸癌患者化療療效顯著，聯(lián)合影像學(xué)檢查綜合判定病情發(fā)展更為準(zhǔn)確。TK1可作為結(jié)腸癌患者手術(shù)效果的判定及復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的預(yù)測指標(biāo)之一。由于本研究時(shí)間較短，樣本量仍然較少，仍需多中心、大樣本進(jìn)一步研究證實(shí)。

參考文獻(xiàn)

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