張朝輝 陳應(yīng)莊 陳波 馬銘

摘?要?采用直噴離子化質(zhì)譜法，通過對(duì)粉防己中的粉防己堿和防己諾林堿、廣防己中的馬兜鈴酸A和木蘭花堿的敞開式質(zhì)譜行為進(jìn)行研究，獲得了粉防己（Stephania tetrandra）及其有毒偽品廣防己（Aristolochia fangchi）的敞開式質(zhì)譜輪廓，建立了直噴離子化質(zhì)譜法簡(jiǎn)單快速鑒別粉防己和廣防己的方法。結(jié)果表明，在正離子模式下，從敞開式質(zhì)譜輪廓上，可以利用粉防己的標(biāo)志性成分粉防己堿和防己諾林堿對(duì)粉防已和廣防己進(jìn)行快速鑒別。此方法具有簡(jiǎn)單、快速、無需樣品前處理等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)防己藥材的質(zhì)量控制具有重要參考價(jià)值。研究了馬兜鈴酸A在敞開式質(zhì)譜條件下的電噴霧電離行為，對(duì)敞開式質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)分析馬兜鈴酸A有借鑒意義。

關(guān)鍵詞?直噴離子化質(zhì)譜法; 粉防己; 廣防己; 防己諾林堿; 粉防己堿; 木蘭花堿; 馬兜鈴酸A

1?引 言

防己是常用的利水消腫、祛風(fēng)止痛藥，有粉防己（Stephania tetrandra）、廣防己（Aristolochia fangchi）、木防己等多種來源，因外觀相似，混用現(xiàn)象嚴(yán)重。其中，粉防己為防己科植物粉防己的干燥根，具利水消腫、祛風(fēng)止痛之功效，含粉防己堿和防己諾林堿等化學(xué)成分[1，2]。廣防己為馬兜鈴科植物廣防己的干燥根，具祛風(fēng)止痛、清熱利水之功效，含馬兜鈴酸A和木蘭花堿等化學(xué)成分[3，4]。粉防己堿、防己諾林堿、馬兜鈴酸A和木蘭花堿的結(jié)構(gòu)式見圖1。

因馬兜鈴酸A會(huì)引起人體腎臟損害，因此，廣防己被歸為“有毒”類中藥[5～7]。自2005年起，《中國(guó)藥典》就只收載了粉防己。但一直以來，廣防己在市場(chǎng)上作為粉防己的替代品屢禁不止，因此，建立快速、簡(jiǎn)單用于粉防己和廣防己的鑒別方法至關(guān)重要。

粉防己和廣防己的傳統(tǒng)鑒別方法主要有性狀鑒別、顯微鑒定或薄層色譜鑒別[8，9]，這些方法操作簡(jiǎn)單，但存在鑒別結(jié)果準(zhǔn)確度不高的缺點(diǎn)。高效液相色譜法（HPLC）[10]、超高效液相色譜法（UHPLC）[11]、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS）[12]、超高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法（UHPLC-ESI-MS/ MS）[3]、高光譜成像[4]等方法對(duì)粉防己和廣防己能夠進(jìn)行準(zhǔn)確鑒別，但這些方法需復(fù)雜的樣品前處理過程，步驟繁瑣，耗時(shí)耗力，會(huì)損失樣品，也會(huì)污染環(huán)境。

2004年，Cooks課題組[13]提出了電噴霧解吸電離敞開式質(zhì)譜技術(shù)，該技術(shù)作為一種在敞開的大氣壓環(huán)境中即可進(jìn)行的質(zhì)譜分析技術(shù)，具有無需或者只需簡(jiǎn)單的樣品前處理、操作簡(jiǎn)單快速、可實(shí)現(xiàn)樣品原位分析等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、環(huán)境、生物及公共安全等多個(gè)領(lǐng)域的研究[14～20]。直噴離子化質(zhì)譜技術(shù)是一種敞開式質(zhì)譜技術(shù)，具有操作簡(jiǎn)單、溶劑消耗少、可用于樣品直接分析等獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，在包括中藥研究在內(nèi)的很多領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用[21～24]，其對(duì)于中藥的快速鑒定、中藥資源的節(jié)約和綠色環(huán)保具有重要意義。基于直噴離子化質(zhì)譜技術(shù)對(duì)粉防己和廣防己兩種中藥材進(jìn)行快速分析及鑒定的研究目前未見報(bào)道。

本研究采用直噴離子化質(zhì)譜技術(shù)，對(duì)粉防己中的粉防己堿和防己諾林堿、廣防己中的馬兜鈴酸A和木蘭花堿的敞開式質(zhì)譜行為進(jìn)行了研究，對(duì)粉防己和廣防己進(jìn)行了定性分析和鑒定，獲得了粉防己和廣防己的敞開式質(zhì)譜輪廓，提出了將粉防己堿和防己諾林堿作為粉防己標(biāo)志性成分進(jìn)行鑒別的方法。本方法簡(jiǎn)單、快速，對(duì)粉防己中藥材及其有毒偽品廣防己的鑒別具有重要意義。同時(shí)，對(duì)馬兜鈴酸A在敞開式質(zhì)譜條件下的電噴霧電離行為進(jìn)行了研究，為敞開式質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)分析馬兜鈴酸A提供了參考。

2?實(shí)驗(yàn)部分

2.1?儀器與試劑

Thermo Finnigan-LCQ離子阱質(zhì)譜（英國(guó)菲尼根公司），配LCQ-tune工作站; 高壓直流電源（天津東文高壓電源有限公司）; LC-20AT 高效液相色譜儀 （日本島津公司）; Milli-Q純水系統(tǒng)（美國(guó)Millipore公司）; 高速萬能粉碎機(jī)（北京市永光明醫(yī)療儀器有限公司）; KQ3200E型超聲波發(fā)生器（昆山市超聲儀器有限公司）。

馬兜鈴酸A標(biāo)準(zhǔn)品、粉防己堿標(biāo)準(zhǔn)品和防己諾林堿標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）; 木蘭花堿對(duì)照品（上海源葉生物科技有限公司）; 甲醇為色譜純，其它試劑為分析純，購于國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司; 實(shí)驗(yàn)用水為Milli-Q純水系統(tǒng)制備的超純水。防己科粉防己、馬兜鈴科廣防己等藥材由湖南生物機(jī)電職業(yè)技術(shù)學(xué)院藤本所專家提供并進(jìn)行鑒定，噴霧紙購于美國(guó)沃特曼公司。

2.2?實(shí)驗(yàn)方法

2.2.1?樣品前處理?取廣防己0.5 g，置于具塞錐形瓶中，加入70%甲醇25 mL，密塞，稱重，超聲處理30 min，放冷再稱重，用95%的乙醇溶液補(bǔ)足減失的重量，搖勻，過濾，取濾液進(jìn)行液相色譜分析。

2.2.2?色譜和質(zhì)譜實(shí)驗(yàn)條件?采用ESI離子源正離子模式，掃描范圍m/z 100～900; 噴霧電壓：+3.50 kV; 毛細(xì)管錐孔電壓：10 V; 源溫度：250℃。二級(jí)質(zhì)譜碰撞能量：粉防己堿和防己諾林堿均為50%，木蘭花堿和馬兜鈴酸A均為30%。

色譜條件：流動(dòng)相A為0.2% H3PO4，流動(dòng)相B為乙腈。梯度洗脫程序：0～6 min，20% B; 6～25 min，20%～80% B; 25～30 min，80% B。流速為1 mL/min; 進(jìn)樣量為20 L; 檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm。

直噴離子化技術(shù)分為3個(gè)過程：樣品裝載、分離、離子化，示意圖見圖2。本研究中涉及的直噴離子化技術(shù)包括固體樣品和液體樣品分析，其中，固體樣品如干燥中藥材的進(jìn)樣采用直接噴霧方式，先將其裁剪成三角形，然后在其尖端滴加少量溶劑（15 μL甲醇）潤(rùn)濕，施加高壓，再用LCQ離子阱質(zhì)譜進(jìn)行數(shù)據(jù)采集。液體樣品的進(jìn)樣采用紙噴霧方式。

3?結(jié)果與討論

3.1?粉防己和廣防己藥材的直噴離子化質(zhì)譜分析

按2.2實(shí)驗(yàn)方法中實(shí)驗(yàn)條件，對(duì)粉防己和廣防己兩種藥材在正離子模式下進(jìn)行了全掃描質(zhì)譜分析。在裁剪成三角形的藥材上，滴加15 μL甲醇作為溶劑，直接進(jìn)行噴霧和質(zhì)譜分析，結(jié)果見圖3。在粉防己的質(zhì)譜圖（圖3A）中可明顯觀察到m/z 305、m/z 312、m/z 342、m/z 609和m/z 623的峰; 在廣防己的質(zhì)譜圖（圖3B）中可以明顯觀察到m/z 328和m/z 342的峰。粉防己和廣防己的質(zhì)譜輪廓存在明顯差異。

3.2?粉防己敞開式質(zhì)譜輪廓中的特征峰m/z 609和m/z 623分析

由文獻(xiàn)[3]可知，粉防己中含有大量雙芐基異喹啉類生物堿成分，主要有粉防己堿、防己諾林堿等，根據(jù)敞開式質(zhì)譜輪廓中的質(zhì)荷比信息，推測(cè)粉防己中m/z 609和623峰可能分別為防己諾林堿和粉防己堿，通過一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜進(jìn)行了進(jìn)一步驗(yàn)證，結(jié)果見圖4、圖5和圖6。

由圖4可知，防己諾林堿和粉防己堿的質(zhì)譜峰分別為m/z 609和623。比較圖5和圖6，兩圖中m/z 609 峰的碎片情況幾乎完全相同，其中m/z 578為基峰，各碎片離子的相對(duì)豐度基本一致。兩圖中m/z 623峰的碎片情況也幾乎完全相同，其中m/z 592為基峰，各碎片離子的相對(duì)豐度也基本一致，與文獻(xiàn)[12]報(bào)道相吻合。進(jìn)一步推測(cè)圖3A中m/z 305是防己諾林堿的雙質(zhì)子化分子離子峰，m/z 312是粉防己堿的雙質(zhì)子化分子離子峰[25]，由此說明，粉防己藥材中的m/z 305和609峰為防己諾林堿，m/z 312 和623峰為粉防己堿。通過對(duì)30個(gè)不同批次粉防己藥材和9個(gè)不同批次廣防己藥材進(jìn)行測(cè)定，粉防己藥材中的主要質(zhì)譜峰均為m/z 305、312、342、609和623，廣防己藥材中的主要質(zhì)譜峰均為m/z 328和342，而在廣防己中未檢測(cè)到防己諾林堿和粉防己堿的質(zhì)譜峰m/z 305、312、609和623，說明粉防己藥材含有防己諾林堿和粉防己堿，而廣防己中不含防己諾林堿和粉防己堿。

3.3?粉防己和廣防己敞開式質(zhì)譜輪廓中特征峰m/z 342分析

從粉防己和廣防己敞開式質(zhì)譜輪廓中可見，二者都含有特征峰m/z 342。文獻(xiàn)[3，4]報(bào)道廣防己中含馬兜鈴酸A和木蘭花堿。馬兜鈴酸A （C17H11NO7，分子量341.27 ）和木蘭花堿（C20H24NO+4，分子量342.41）分子量非常接近，為了鑒定m/z 342峰，采用紙噴霧質(zhì)譜對(duì)馬兜鈴酸A和木蘭花堿標(biāo)準(zhǔn)溶液在同樣質(zhì)譜條件下進(jìn)行了一級(jí)質(zhì)譜分析，結(jié)果見圖7。

木蘭花堿的一級(jí)質(zhì)譜主要譜峰為木蘭花堿的分子離子峰[M]+（m/z 342）和二聚體峰[2M-H]+（m/z 683），而馬兜鈴酸A一級(jí)質(zhì)譜主要譜峰為[M+NH4]+（m/z 358.95）、[2M+NH4]+（m/z 699.76）、[2M+Na]+（m/z 704.83）和[2M+K]+（m/z 720.74）等離子，其中[2M+Na]+離子為基峰，此結(jié)果與文獻(xiàn)[26，27]的研究結(jié)果基本一致，據(jù)此可以判斷廣防己中的特征峰m/z 342不是馬兜鈴酸A的質(zhì)譜峰，而可能是木蘭花堿的質(zhì)譜峰。

進(jìn)一步對(duì)兩種防己中的特征峰m/z 342和木蘭花堿質(zhì)譜峰進(jìn)行了二級(jí)質(zhì)譜分析，結(jié)果見圖8。廣防己中的特征峰m/z 342和木蘭花堿標(biāo)準(zhǔn)溶液的碎片情況幾乎完全一致，都以m/z 297為基峰，且各碎片離子的相對(duì)豐度基本一致，說明廣防己中的m/z 342.13峰為木蘭花堿。Sim等[3]采用UHPLC-ESI-MS/MS證實(shí)了廣防己中確實(shí)含有木蘭花堿，但該方法操作繁瑣費(fèi)時(shí)，相比之下，本方法簡(jiǎn)單、快速。同時(shí)，比較圖8A和圖8C可知，粉防己中的特征峰m/z 342不是木蘭花堿。具體的歸屬有待后續(xù)進(jìn)一步研究。研究結(jié)果表明，與廣防己相比，粉防己中不含木蘭花堿或木蘭花堿含量極低。

3.4?廣防己中的馬兜鈴酸A成分分析

由于馬兜鈴酸A具有腎毒性，廣防己中馬兜鈴酸A的檢測(cè)一直是分析難點(diǎn)，質(zhì)譜法是常用方法。但是，可能是因?yàn)轳R兜鈴酸A的離子化效率低[27～29]，難以獲得足夠的質(zhì)譜檢測(cè)靈敏度，采用質(zhì)譜法檢測(cè)馬兜鈴酸A受到很大限制。馬兜鈴酸A的結(jié)構(gòu)中含有羧基，理論上容易去質(zhì)子化，生成帶負(fù)電的陰離子，從而在ESI模式下具有較高的質(zhì)譜檢測(cè)靈敏度。但實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，馬兜鈴酸A在ESI模式下產(chǎn)生的響應(yīng)很低，通常比ESI+模式低103以上[28，29]。而在ESI+模式下，馬兜鈴酸A結(jié)構(gòu)中沒有產(chǎn)生正離子的基團(tuán)，質(zhì)子親和力低，離子化效率也偏低，加上羧基容易碎裂和易產(chǎn)生加合離子等原因，導(dǎo)致了ESI-MS法分析馬兜鈴酸A難以獲得令人滿意的靈敏度。

由圖7B可知，馬兜鈴酸A標(biāo)準(zhǔn)溶液在ESI+模式下有明顯的加合離子峰，用其中的[2M+NH4]+（m/z 699.76）和[2M+Na]+（m/z 704.83）等加合離子峰應(yīng)可以對(duì)馬兜鈴酸A進(jìn)行定量分析。但在廣防己的質(zhì)譜圖（圖3B）中，在m/z 695～725之間存在很多干擾峰，將m/z 695～725之間的質(zhì)譜圖充分放大（圖3B插圖），可以發(fā)現(xiàn)馬兜鈴酸A相應(yīng)的加合離子峰[2M+NH4]+（m/z 699.77）、[2M+Na]+（m/z 705.66）和[2M+K]+（m/z 720.61），但這些加合離子峰均被淹沒在噪音信號(hào)峰之中，說明廣防己中的基質(zhì)干擾馬兜鈴酸A，容易造成復(fù)雜基質(zhì)中馬兜鈴酸A的漏檢。文獻(xiàn)[28]也報(bào)道了馬兜鈴酸A質(zhì)譜檢測(cè)靈敏度低與樣品基質(zhì)的復(fù)雜程度有關(guān)。

為了進(jìn)一步考察影響馬兜鈴酸A質(zhì)譜響應(yīng)低的原因，對(duì)含馬兜鈴酸A和木蘭花堿均為10 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液及廣防己提取液進(jìn)行液相色譜和紫外光譜分析，結(jié)果見圖9。廣防己中含有約1.1 mg/g馬兜鈴酸A和0.9 mg/g 木蘭花堿。木蘭花堿和馬兜鈴酸A的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)譜圖見圖10，明顯可見木蘭花堿的分子離子峰[M]+（m/z 342.19）和二聚體峰[2M-H]+（m/z 683.26），其中，分子離子峰[M]+（m/z342.19）質(zhì)譜響應(yīng)信號(hào)很強(qiáng)。相反，馬兜鈴酸A質(zhì)譜響應(yīng)則相對(duì)較弱，通過放大質(zhì)譜中m/z 350～750間的質(zhì)譜圖（圖10B），可見馬兜鈴酸A的加合離子峰[M+NH4]+（m/z 358.86）、[2M+Na]+（m/z 704.71）和[2M+K]+（m/z 720.91）。因此，相對(duì)于木蘭花堿的強(qiáng)質(zhì)譜響應(yīng)，馬兜鈴酸A的質(zhì)譜響應(yīng)很弱，這主要是因?yàn)槟咎m花堿為季銨堿，在水溶液中即刻解離成正離子，相對(duì)離子化效率不高的馬兜鈴酸A而言，木蘭花堿的質(zhì)譜響應(yīng)非常強(qiáng)。因此，在木蘭花堿存在的情況下，采用質(zhì)譜檢測(cè)馬兜鈴酸A易受到木蘭花堿強(qiáng)質(zhì)譜信號(hào)的影響，造成漏檢。

綜上，在直噴離子化質(zhì)譜條件下，可利用防己諾林堿和粉防己堿作為標(biāo)志性成分，快速鑒別粉防己和廣防己。雖然廣防己含有馬兜鈴酸A，但由于馬兜鈴酸A離子化效率低，易受復(fù)雜基質(zhì)如木蘭花堿的干擾等，利用直噴離子化質(zhì)譜無法快速檢出廣防己中的馬兜鈴酸A，易造成馬兜鈴酸A的漏檢。今后可在去除干擾和提高馬兜鈴酸加合離子的直噴離子化質(zhì)譜靈敏度方面開展更深入的研究。

4?結(jié) 論

采用直噴離子化質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)，在無需樣品預(yù)處理的前提下，通過對(duì)粉防己和廣防己藥材進(jìn)行直接噴霧質(zhì)譜分析，獲得其正離子模式下的指紋圖譜，并對(duì)此條件下馬兜鈴酸A的電噴霧質(zhì)譜行為進(jìn)行了討論，建立了簡(jiǎn)單快速鑒別粉防己和廣防己的分析方法，成功應(yīng)用于粉防己與廣防己的有效鑒別。本方法簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確，樣品的平均分析時(shí)間在1 min以內(nèi)，可為粉防己藥材的質(zhì)量控制提供新方法，也為直噴離子化質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)分析馬兜鈴酸A提供了參考。

References

1?Yu Y，Hu B，Bao J X，Mulvany J，Bielefeld E，Harrison R T，Neton S A，Thirumala P，Chen Y Y，Lei D B，Qiu Z Y，Zheng Q Y，Ren J H，Perez-Flores M C，Yamoah E N，Salehi P. JARO-J. Assoc. Res. Oto.，2018，19（6）： 653-668

2?XING Zhi-Bo，WANG Feng-Mei，WANG Cui-Ping，MU Qiang，WANG Qi-Tang.Chin. J. Exp. Tradit. Med. Form.，2014，20（9）： 241-246

邢志博，王鳳梅，王翠平，慕 強(qiáng)，王啟堂. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2014，20（9）： 241-246

3?Sim H J，Kim J H，Lee K R，Hong J. Molecules，2013，18（5）： 5235-5250

4?Tankeu S，Vermaak I，Chen W Y，Sandasi M，Viljoen A. Phytochemistry，2016，122： 213-333

5?Debelle F D，Vanherweghem J L，Nortier J L. Kidney Int.，2008，74： 158-169

6?LIANG Qi，NI Cheng，YAN Xian-Zhong，XIE Ming，ZHANG Yan-Xia，ZHANG Qi，YANG Mei-Juan，PENG Shuang-Qing，ZHANG Yu-Zhong. Chin. J. Chin. Mater. Med.，2010，35（21）： 2882-2888

梁 琦，倪 誠，顏賢忠，謝 鳴，張艷霞，張 琪，楊美娟，彭雙清，張宇忠. 中國(guó)中藥雜志，2010，35（21）： 2882-2888

7?Wang Y，Mamat X，Li Y T，Hu X，Wang P，Dong Y M，Hu G Z. Electroanalysis，2019，31（7）： 1390-1400

8?LUO Qiong. Hunan J. Tradit. Chin. Med.，2003，19（3）： 52-53

羅 瓊. 湖南中醫(yī)雜志，2003，19（3）： 52-53

9?TU Mei-Fang，LI Shui-Fu. Chin. Tradit. Herbal Drugs，2005，36（2）： 286-288

屠梅芳，李水福. 中草藥，2005，36（2）： 286-288

10?Chou C J，Lin L C，Peng C，Shen Y C，Chen C F. J. Chin. Med.，2002，13（1）： 39-48

11?Kim J H，Sim H J，Lee K R，Hong J. Bull. Korean Chem. Soc.，2013，34（3）： 975-978

12?Koh H L，Wang H，Zhou S，Chan E，Woo S O. J. Pharm. Biomed. Anal.，2006，40（3）： 653-661

13?Takats Z，Wiseman J M，Gologan B，Cooks R G. Science，2004，306（15）： 47l-473

14?Lu H Y，Zhang H，Chingin K，Xiong J L，F(xiàn)ang X W，Chen H W. TrAC-Trends Anal. Chem.，2018，107： 99-115

15?Tang F，Guo C G，Ma X X，Zhang J，Su Y，Tian R，Shi R，Xia Y，Wang X H，Ouyang Z. Anal. Chem.，2018，90（9）： 5612-5619

16?Feng B S，Zhang J L，Chang C L，Li L P，Li M，Xiong X C，Guo C G，Tang F，Bai Y，Liu H W. Anal. Chem.，2014，86（9）： 4164-4169

17?ZHANG Xing-Lei，ZHANG Hua，WANG Xin-Chen，HUANG Ke-Ke，WANG Dan，CHEN Huan-Wen. Chinese J. Anal. Chem.，2018，46（11）： 1703-1713

張興磊，張 華，王新晨，黃科科，王 丹，陳煥文. 分析化學(xué)，2018，46（11）： 1703-1713

18?ZHU Teng-Gao，HAN Jing，SHU Jun-Wen，KE Mu-Fang，WANG Dan，LIU Wen-Jie，LIN Nian-Xiang，CHEN Huan-Wen. Chinese J. Anal. Chem.，2018，46（3）： 400-405

朱騰高，韓 京，舒俊文，柯牡芳，王 丹，劉文杰，林年香，陳煥文. 分析化學(xué)，2018，46（3）： 400-405

19?ZENG Kai，CHEN Huan-Wen，LUO Ming-Biao，ZHANG Hui，YU Wen-Ting. Chinese J. Anal. Chem.，2019，47（3）： 429-438

曾 凱，陳煥文，羅明標(biāo)，張 慧，余文婷. 分析化學(xué)，2019，47（3）： 429-438

20?Thomas P F，Edward S. Analyst，2018，143（9）： 1948-1969

21?Liu X M，Gu Z X，GUO Y，Liu J J，Ma M，Chen B，Wang L P. J. Pharm. Biomed. Anal.，2017，137： 204-212

22?ZHANG Zhao-Hui，GU Zhi-Xin，LIU Jing-Jing，CHEN Ying-Zhuang，CHEN Bo，MA Ming. Chinese J. Anal. Chem.，2017，45（8）： 1143-1148

張朝輝，谷陟欣，劉婧靖，陳應(yīng)莊，陳 波，馬 銘. 分析化學(xué)，2017，45（8）： 1143-1148

23?Liu J J，Gu Z X，Yao S Z，Zhang Z H，Chen B. J. Pharm. Biomed. Anal.，2016，124： 93-103

24?Liu J J，Wang H，Cooks R G，Ouyang Z. Anal. Chem.，2011，83（20）： 7608-7613

25?Chen J F，Zhao Q，Si D D，Nie A Z，Wang Y Y，Deng Z F，Wen Y B，Chen F M，Zhang L，Dong B W，Yang J H. J. Pharm. Biomed. Anal.，2020，185： 1-16

26?Yuan J B，Liu Q，Wei G B，Tang F，Ding L，Yao S Z. Rapid Commun. Mass Spectrom.，2007，21（14）： 2332-2342

27?Chan S A，Chen M J，Liu T Y，F(xiàn)uh M R，Deng J F，Wu M L，Hsieh S J. Talanta，2003，60： 679-685

28?Kite G C，Yule M A，Leon C，Simmonds M S J. Rapid Commun. Mass Spectrom.，2002，16（6）： 585-590

29?Chan C K，Pavlovic N M，Chan W. Food Chem.，2019，289： 673-679