賀 揚(yáng) 王 均 吳孟春 茍 印 楊旭紅

(內(nèi)江師范學(xué)院，“長江上游魚類資源保護(hù)與利用”四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 內(nèi)江 641100)

2019年7月，四川省內(nèi)江某養(yǎng)殖場(chǎng)的鯉出現(xiàn)大量死亡，患病魚體表現(xiàn)為眼球凹陷、皮膚腫脹、鰓絲潰爛。為確診引起該病的病原，給預(yù)防和治療該病提供參考，筆者對(duì)自然發(fā)病的病魚進(jìn)行了細(xì)菌分離、病毒PCR檢測(cè)、寄生蟲檢測(cè)?，F(xiàn)將有關(guān)工作總結(jié)如下。

一、發(fā)病情況

養(yǎng)殖場(chǎng)的鯉魚發(fā)病，同池飼養(yǎng)的鯽魚未出現(xiàn)發(fā)病癥狀。病魚體長15～20 厘米，發(fā)病率高達(dá)60%～70%，病死率高達(dá)100%，池塘水溫25℃。病魚體色加深、昏昏欲睡、食欲減退；頭頂顱骨軟組織下陷，眼球凹陷，體表黏液增多；剖檢可見病魚鰓絲邊緣蒼白、腫脹，肝臟明顯出血，脾、腎腫大發(fā)黑(圖1)。

圖1 發(fā)病癥狀

二、實(shí)驗(yàn)室診斷

1.寄生蟲檢測(cè) 分別采集病魚體表黏液和鰓，制作黏液刮片和鰓絲壓片，顯微鏡下(×200)發(fā)現(xiàn)鰓和黏液中均有孢子蟲，蟲體呈橢圓形，中心有一圓形光亮小點(diǎn)(圖2)。

2.細(xì)菌檢測(cè) 無菌操作條件下，取病魚的肝臟、腎臟、脾臟劃線接種到BHI平板中，28℃培養(yǎng)24～48小時(shí)，未見細(xì)菌生長。

3.病毒PCR 檢測(cè) 取病魚鰓、腎臟提取組織DNA，參照《水生動(dòng)物疾病診斷手冊(cè)》中推薦的鯉浮腫病毒(Carp edema virus，CEV)和錦鯉皰疹病毒(Koi herpes virus，KHV)的PCR 診斷方法，進(jìn)行PCR 檢測(cè)。巢式PCR 檢測(cè)CEV，可擴(kuò)增到大小約180 bp 的特異性條帶。CEV 的PCR 產(chǎn)物測(cè)序分析發(fā)現(xiàn)，其與GenBank中CEV同源性高達(dá)100%，進(jìn)化樹與CEV 聚為一支，而檢測(cè)KHV 未出現(xiàn)任何條帶。因此，表明鯉魚感染了CEV。

圖2 黏液刮片和鰓絲壓片檢測(cè)

三、討論與總結(jié)

CEV是嚴(yán)重威脅鯉健康的重要病原，同池飼養(yǎng)的鯽、鰱等不患病。CEV可引起鯉皮膚侵蝕性、出血性損傷，并伴隨皮下組織腫脹，因此得名為“鯉浮腫病”。CEV也可引起錦鯉出現(xiàn)昏昏欲睡、潛于水底等癥狀，故該病又稱作“錦鯉昏睡病”。

此病的發(fā)病水溫為15～25℃，養(yǎng)殖條件惡化、捕撈應(yīng)激等可誘發(fā)，死亡率達(dá)80%～100%。此病發(fā)病癥狀與錦鯉皰疹病毒病相似，單從臨床癥狀很難區(qū)分，診斷時(shí)需進(jìn)行鑒別。目前尚無CEV疫苗，無法根治此病。因此，疫區(qū)不建議飼養(yǎng)鯉魚，非疫區(qū)需謹(jǐn)慎引種。在發(fā)病水溫應(yīng)減少魚的應(yīng)激，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，增強(qiáng)魚的抵抗力。引入新魚時(shí)可先在15～25℃下飼喂30 天以上，放苗前用0.5%鹽水浸泡魚苗具有一定防御效果。發(fā)病后建議及時(shí)撈出并隔離發(fā)病魚，同時(shí)魚池、用具消毒，防止水質(zhì)惡化，使用免疫增強(qiáng)劑增強(qiáng)魚體抵抗力、添加抗生素防止繼發(fā)感染。