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      中西藥聯(lián)合逆轉(zhuǎn)多重耐藥銅綠假單胞菌抗菌活性分析

      2020-10-19 15:21張輝
      健康大視野 2020年14期

      張輝

      【摘 要】 目的:研究分析中西藥聯(lián)合逆轉(zhuǎn)多重耐藥銅綠假單胞菌抗菌活性的效果。方法:收集赤芍、五倍子、野菊花、魚腥草、小檗堿對 MDR-PA的 抑菌作用,并測試赤芍、五倍子、野菊花、魚腥草、小檗堿和頭孢他啶、亞胺培南、環(huán)丙沙星進行聯(lián)合藥敏試驗。結(jié)果:根據(jù)實驗結(jié)果分析,五倍子和小檗堿可以顯著逆轉(zhuǎn) MDR-PA 的耐藥性,且P<0.05,具有統(tǒng)計學(xué)意義;同時亞胺培南和小檗堿聯(lián)合取得效果最強,孢他啶與五倍子聯(lián)合結(jié)果具有一定的效果。環(huán)丙沙星和中藥聯(lián)合無明顯作用,實驗過程中未發(fā)現(xiàn)拮抗作用。結(jié)論:中西藥聯(lián)合逆轉(zhuǎn)多重耐藥銅綠假單胞菌抗菌活性可以取得一定的效果,具有一定的推廣和應(yīng)用價值。

      【關(guān)鍵詞】 中西藥聯(lián)合;多重耐藥銅綠假單胞菌;耐藥性逆轉(zhuǎn)

      為了研究分析中西藥聯(lián)合逆轉(zhuǎn)多重耐藥銅綠假單胞菌抗菌活性的效果,本次研究選取了赤芍、五倍子、野菊花、魚腥草、小檗堿等五種中藥聯(lián)合西藥進行實驗。詳情可見正文。

      1 材料與方法

      1.1 實驗菌株

      本次研究的菌株來源為2017年4月至2018年4月臨床分離鑒定的菌株,排除剔除重復(fù)分離菌株后共有多重耐藥銅綠假單胞菌(MDR-PA)50株,MDR定義為耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)。對常見的抗菌藥物不敏感。

      1.2 中藥水煎劑

      本次研究使用的中藥水煎劑主材料為赤芍、五倍子、野菊花、魚腥草,均于養(yǎng)和堂藥房進行采購),小檗堿來源為中國藥品生物檢定所。

      1.3 方法

      本次研究中草藥抗菌實驗使用中草藥抗菌實驗試管法,應(yīng)用K-B法完成逆轉(zhuǎn)細菌耐藥性實驗,采用棋盤格法進行聯(lián)合藥敏試驗。

      1.3.1 藥液倍比稀釋和加菌

      藥液的倍比稀釋使用2倍稀釋法,使1至10管含有倍比稀釋的藥液(1:2,1:4,1:8等系列藥液)。MDR-PA菌株使用生理鹽水調(diào)節(jié)其至0.5麥氏濃度(1.5×108CFU/ml),在藥液稀釋30倍后,向兩倍稀釋完成的藥液1~11支試管置入100μl菌懸液,最終接種量為5×105CFU/ml,設(shè)置第十一管為陽性對照管,第十二管不加菌,設(shè)置為陰性對照管。

      1.3.2 逆轉(zhuǎn)細菌耐藥性試驗

      將赤芍、五倍子、野菊花、魚腥草、小檗堿原液配制為低于最低抑菌濃度的藥液,將MDR-PA置于各藥液中,在35℃的環(huán)境下培育一天左右后利用生理鹽水離心洗滌配制為0.5麥氏濃度菌液,MH平板上使用K-B法完成藥敏試驗,同時以原菌株藥敏試驗為陰性對照,比較逆轉(zhuǎn)完成后抑菌圈直徑大小。

      1.3.3 中西藥聯(lián)合藥敏試驗

      聯(lián)合藥敏試驗采用棋盤格微量稀釋法完成,研究過程中共采用九個稀釋度,其中最高濃度為其MIC的4倍,依次倍比稀釋為1、1/2、1/4、1/8、1/16、1/32、1/64、1/128、1/256倍濃度,藥物分別在96孔培養(yǎng)板上按縱列、橫列進行聯(lián)合。實驗中接種菌量控制在5×105CFU/ml,于35℃的環(huán)境下孵育一天后觀察結(jié)果。

      2 結(jié)果

      2.1 五種中草藥對多重耐藥菌逆轉(zhuǎn)細菌耐藥性結(jié)果

      本次實驗結(jié)果顯示,當(dāng)抗菌紙片為阿米卡星時,赤芍最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(14.39±1.57)mm,五倍子最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(16.39±1.05)mm,野菊花最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(15.30±1.05)mm,魚腥草最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(15.09±1.01)mm,小檗堿最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(15.12±0.99)mm,陰性對照組為(15.05±0.92)mm。當(dāng)抗菌紙片為慶大霉素時,赤芍最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(8.09±1.00)mm,五倍子最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(9.14±1.08)mm,野菊花最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(8.17±0.85)mm,魚腥草最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(8.12±0.69)mm,小檗堿最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(10.11±0.99)mm,陰性對照組為(7.85±0.56)mm。當(dāng)抗菌紙片為哌拉西林時,赤芍最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(9.30±2.42)mm,五倍子最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(10.85±1.85)mm,野菊花最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(9.30±1.64)mm,魚腥草最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(8.12±0.64)mm,小檗堿最低濃度的中藥逆轉(zhuǎn)后的直徑為(10.13±0.89)mm,陰性對照組為(9.30±2.01)mm。根據(jù)實驗結(jié)果分析,五倍子與小檗堿對 MDR-PA 逆轉(zhuǎn)前后數(shù)據(jù)差異較大,具有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05可以發(fā)揮一定程度逆轉(zhuǎn)作用。

      赤芍、五倍子、野菊花、魚腥草、小檗堿和頭孢他啶、亞胺培南、環(huán)丙沙星進行聯(lián)合藥敏試驗。實驗結(jié)果顯示,亞胺培南和小檗堿聯(lián)合取得效果最強,18 株協(xié)同,12 株相加;頭孢他啶與五倍子聯(lián)合結(jié)果為9 株協(xié)同,15株相加;環(huán)丙沙星和赤芍、五倍子、野菊花、魚腥草、小檗堿聯(lián)合無明顯作用,芍、五倍子、野菊花、魚腥草、小檗堿和頭孢他啶、亞胺培南、環(huán)丙沙星聯(lián)合未發(fā)現(xiàn)拮抗作用。

      3 討論

      近些年由于廣譜抗生素碳青霉烯類藥物的濫用,多重耐藥菌不斷增加甚至出現(xiàn)泛耐藥菌株,相關(guān)藥物隨著時間的推移治療效果逐漸降低,新藥的研發(fā)速度甚至無法追上細菌耐藥的速度,為相關(guān)的治療工作帶來了極大的困難。

      本次實驗發(fā)現(xiàn)亞胺培南和小檗堿聯(lián)合取得效果最強,18 株協(xié)同,12 株相加;頭孢他啶與五倍子聯(lián)合結(jié)果為9 株協(xié)同, 15 株相加;環(huán)丙沙星和赤芍、五倍子、野菊花、魚腥草、小檗堿聯(lián)合無明顯作用,芍、五倍子、野菊花、魚腥草、小檗堿和頭孢他啶、亞胺培南、環(huán)丙沙星聯(lián)合未發(fā)現(xiàn)拮抗作用。

      綜上所述,中西藥聯(lián)合逆轉(zhuǎn)多重耐藥銅綠假單胞菌抗菌活性可以取得一定的效果,中西藥聯(lián)合可以有效提高抗菌治療相關(guān)工作效果。

      參考文獻

      [1] 許山.中西藥結(jié)合治療耐藥性結(jié)核的探討[J].中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)),2010,12(22):147-148.

      [2] 郝海燕,侯培珍.中西藥聯(lián)合對胃癌SGC-7901/ADR細胞MRP介導(dǎo)的耐藥性研究[J].包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2011,27(1):5-7.

      [3] 尚丹.中西醫(yī)結(jié)合治療慢性乙肝臨床研究進展[J].養(yǎng)生保健指南,2018,(19):42.

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