楊桂霞
摘要:目的:探討賓川縣2014年-2018年艾滋病HIV抗體檢測WB確證條帶特征。方法:2014年-2018年賓川縣疾病預(yù)防控制中心檢測的HIV-1抗體陽性樣本共332例,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA-麗珠、梅里埃)和快速檢測法(RT)開展HIV抗體初次篩查。使用WB法確證檢測HIV-1初篩結(jié)果為陽性的標(biāo)本。分析人口學(xué)特征、HIV-1抗體陽性樣本帶型。結(jié)果:(1)共332例HIV-1抗體陽性病例,男225例,女107例;<20歲5例,20-39歲119例,40-59歲155例,≥60歲53例;文盲14例;小學(xué)153例;初中141例;中專及高中17例;大專及以上5例;不詳2例;未婚79例,已婚190例,離異及喪偶63例。2014年-2018年各年年間的性別比例、年齡特征、受教育程度、婚姻狀況等無明顯差異,P>0.05。(2)gag核心蛋白帶型p17陽性數(shù)315例(94.88%),p24陽性數(shù)331例(99.70%);pol反轉(zhuǎn)錄酶蛋白帶型p31陽性數(shù)292例(87.95%),p51陽性數(shù)330例(99.40%),p66陽性數(shù)331例(99.70%);env膜蛋白帶型gp41陽性數(shù)299例(90.06%),gp120陽性數(shù)325例(97.89%),gp160陽性數(shù)332例(100.00%)。結(jié)論:賓川縣HIV-1抗體陽性主要集中在20-59歲、小學(xué)和初中文化水平、已婚男性人群,應(yīng)當(dāng)對該類人群進(jìn)行積極干預(yù);WB帶型全條型病例多,提示許多HIV病毒感染者可在活躍期被發(fā)現(xiàn)。
關(guān)鍵詞:艾滋病HIV抗體檢測;WB確證條帶;特征
【中圖分類號】R415 ??【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A ??【文章編號】1673-9026(2020)06-229-02
我國艾滋病低流行,截至2018年,艾滋病病毒感染病例正在逐年增加[1]。其中,高危人群為男男性行為人群。本研究探討賓川縣2014年-2018年艾滋病HIV抗體檢測WB確證條帶特征。
1.資料與方法
1.1基本資料
2014年-2018年賓川縣疾病預(yù)防控制中心檢測的HIV-1抗體陽性樣本共332例,樣本源來自我中心自愿咨詢檢測及賓川縣各醫(yī)療機(jī)構(gòu)送檢的待查樣本。
1.2方法
采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA-麗珠、梅里埃)和快速檢測法(RT)開展HIV抗體初次篩查。使用WB法確證檢測HIV-1初篩結(jié)果為陽性的標(biāo)本。試劑包括:ELISA試劑,珠海麗珠、梅里埃;WB試劑,MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司。實(shí)驗(yàn)儀器包括:全自動蛋白免疫印跡儀。
配制試劑:將1體積的濃縮洗滌緩沖液(20X) 加入到19倍體積的雙蒸餾水中,充分混勻。把1體積的濃縮樣品稀釋緩沖液加入到9倍體積的蒸餾水中,充分混勻,每20毫升加入1g封閉粉,充分混勻。按1:1000比例配好封閉緩沖液稀釋酶結(jié)合物。
試驗(yàn)步驟:
用鑷子小心取出需要的試劑膜,分別放入孵育板槽內(nèi)。每槽內(nèi)加入2 ml 稀釋的洗滌緩沖液,在室溫下(25±3)℃將孵育板置搖床上振蕩孵育至少5min,以吸引器吸出緩沖液。在每槽中加入2ml 配好的封閉緩沖液,分別加入20ul患者血清和強(qiáng)陽性、弱陽性、陰性對照。蓋上蓋子,于室溫下(25±3) ℃在搖床上過夜(16~20 h) 振蕩孵育。小心掀開蓋子以避免濺出或樣品交叉,以吸引器吸出反應(yīng)液。每槽中加入 2 ml 的洗滌緩沖液,每次置搖床上振蕩5min。棄洗液,再重復(fù)兩次。每槽中加入2ml酶結(jié)合物工作液,蓋上蓋子,于室溫下(25±3)℃在搖床上振蕩孵育 30 min。仔細(xì)打開蓋子,吸出酶結(jié)合物溶液,按步驟6洗滌3次。每槽中介入2ml底物液,蓋上蓋子,于室溫下(25±3)℃在搖床上振蕩孵育15min。小心打開蓋子,吸出底物,以雙蒸餾水洗滌3次,以終止反應(yīng)。用鑷子小心取出試劑膜,放在濾紙上,吸干水分,觀察并記錄結(jié)果。
注:結(jié)果判斷:《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》(2019版本)
1.3觀察指標(biāo)
分析人口學(xué)特征、HIV-1抗體陽性樣本帶型。
1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,對正態(tài)分布的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn),對非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗(yàn),采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示數(shù)據(jù)的分布趨勢,P<0.05表示數(shù)據(jù)的比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.結(jié)果
2.1分析人口學(xué)特征
共332例HIV-1抗體陽性病例,男225例,女107例;<20歲5例,20-39歲119例,40-59歲155例,≥60歲53例;文盲14例;小學(xué)153例;初中141例;中專及高中17例;大專及以上5例;不詳2例;未婚79例,已婚190例,離異及喪偶63例。2014年-2018年各年年間的性別比例、年齡特征、受教育程度、婚姻狀況等無明顯差異,P>0.05。(如表1)
2.2分析HIV-1抗體陽性樣本帶型
gag核心蛋白帶型p17陽性數(shù)315例(94.88%),p24陽性數(shù)331例(99.70%);pol反轉(zhuǎn)錄酶蛋白帶型p31陽性數(shù)292例(87.95%),p51陽性數(shù)330例(99.40%),p66陽性數(shù)331例(99.70%);env膜蛋白帶型gp41陽性數(shù)299例(90.06%),gp120陽性數(shù)325例(97.89%),gp160陽性數(shù)332例(100.00%)。(如表2)
3.討論與結(jié)論
蛋白印跡試驗(yàn)(WB)帶型特征的影響因素復(fù)雜,包括:個體自身的HIV結(jié)構(gòu)蛋白濃度、抗原性強(qiáng)度、產(chǎn)生抗體的時間、個體對抗原成分的反應(yīng)敏感度、對抗原的免疫應(yīng)答等等[2-3]。本研究顯示,共332例HIV-1抗體陽性病例,男225例,女107例;<20歲5例,20-39歲119例,40-59歲155例,≥60歲53例;文盲14例;小學(xué)153例;初中141例;中專及高中17例;大專及以上5例;不詳2例;未婚79例,已婚190例,離異及喪偶63例。2014年-2018年各年年間的性別比例、年齡特征、受教育程度、婚姻狀況等無明顯差異,P>0.05。gag核心蛋白帶型p17陽性數(shù)315例(94.88%),p24陽性數(shù)331例(99.70%);pol反轉(zhuǎn)錄酶蛋白帶型p31陽性數(shù)292例(87.95%),p51陽性數(shù)330例(99.40%),p66陽性數(shù)331例(99.70%);env膜蛋白帶型gp41陽性數(shù)299例(90.06%),gp120陽性數(shù)325例(97.89%),gp160陽性數(shù)332例(100.00%)。
綜上所述,賓川縣HIV-1抗體陽性主要集中在20-59歲、小學(xué)和初中文化水平、已婚男性人群,應(yīng)當(dāng)對該類人群進(jìn)行積極干預(yù);WB帶型全條型病例多,提示許多HIV病毒感染者可在活躍期被發(fā)現(xiàn)。
參考文獻(xiàn)
[1]黃小娟,曹明玉,辛艷泓, 等.155例HIV抗體陽性者ELISA與WB結(jié)果分析[J].中國艾滋病性病,2017,23(5):458-460.
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[3]張秀娟,張蕾,李霞.HIV-1抗體不確定者跟蹤監(jiān)測結(jié)果分析[J].中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2015,25(14):2396-2398.