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      HPLC同時測定感冒止咳顆粒中10種成分的研究

      2020-10-27 05:44:58張厚杰
      科學(xué)與財富 2020年23期
      關(guān)鍵詞:化學(xué)成分

      張厚杰

      摘? 要:目的 通過HPLC法對感冒止咳顆粒中的新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、葛根素、連翹酯苷A、異綠原酸A、異綠原酸C、黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素等10種成分的含量進(jìn)行探究。方法 對該感冒止咳顆粒的70%的甲醇提取液采用Agilent ZORBAXSB-C18色譜柱的方法進(jìn)行分析研究。結(jié)果 該藥物的10種成分的線性關(guān)系在一定范圍之內(nèi)保持良好狀態(tài)(r≥0.9994),平均加樣回收率可以達(dá)到98.08%-101.98%之間,RSD則達(dá)到0.45%-2.28%之間。結(jié)論 HPLC法對藥物成分的研究更加簡便,結(jié)果相對準(zhǔn)確,可以用于感冒止咳顆粒的質(zhì)量控制中,具有較好的效果。

      關(guān)鍵詞:感冒止咳顆粒;化學(xué)成分;HPLC

      本次試驗所用的感冒止咳顆粒主要是由柴胡、山銀花、葛根、黃芩、青蒿、連翹、桔梗、苦杏仁、薄荷腦等9種藥物成分組成,常用于外熱引起的感冒,常見癥狀有發(fā)熱、頭痛、鼻塞以及咽喉疼痛等。其中柴胡和山銀花的主要功效是疏熱散熱,為君藥;葛根具有緩解肌肉疲勞,退熱的功效,黃芩、青蒿、連翹都具有清熱功效,都是臣藥;桔梗、苦杏仁止咳化痰清肺,薄荷腦屬于芳香辛散藥物,同為佐藥,這幾種藥物合在一起服用,可以起到清熱解毒,止咳平緩的有效作用。該類型的感冒止咳顆粒通常是由多種中藥復(fù)方制劑共同組成,僅僅對單一的一種成分進(jìn)行檢測很難把握藥物用量的控制和療效的穩(wěn)定,因此必須要度多種成分同時測定。感冒止咳顆粒中的9種成分包含了新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、葛根素、連翹酯苷A、異綠原酸A、異綠原酸C、黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素等共10種物質(zhì),本次研究試驗使用HPLC法同時對這10種成分的含量進(jìn)行測定,為感冒顆粒的質(zhì)量把控提供準(zhǔn)確的實驗依據(jù)。

      1 材料

      1.1 儀器

      Agilent1260高效液相色譜儀,配置G1311B四元泵、G1329B自動進(jìn)樣器、G1316A柱溫箱、G1315DDAD檢測器;XSE-205電子天平;KQ-300DE超聲波清洗器;Milli-Q超純水處理系統(tǒng)。

      1.2 試劑與藥物

      綠原酸、葛根素、連翹酯苷A、異綠原酸C、黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、新綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A;小兒解表顆粒;乙腈為色譜純;磷酸、甲醇為分析純;超純水。

      2 方法與結(jié)果

      2.1 色譜條件

      Agilent ZORBAXSB-C18色譜柱;流動相乙腈;體積流量1.0mL/min;柱溫30℃;檢測波長326nm、250nm、326nm、278nm;進(jìn)樣量10μL。

      2.2 溶液制備

      2.2.1 對照品溶液。精密稱取對照品新綠原酸5.57mg、綠原酸7.43mg、隱綠原酸7.03mg、葛根素8.02mg、連翹酯苷A10.17mg、異綠原酸A6.37mg、異綠原酸C7.36mg、漢黃芩苷9.14mg、黃芩素5.67mg,置于25mL量瓶中,70%甲醇溶解并定容至刻度,搖勻,作為貯備液;精密稱取黃芩苷對照品3.81mg,置于25mL量瓶中,精密吸取上述貯備液。

      2.2.2 供試品溶液。取顆粒適量,研細(xì),取粉末約1.0g,精密稱定,置于錐形瓶中,精密加入50mL70%甲醇,稱定質(zhì)量,超聲處理30min,放冷,70%甲醇補足減失的質(zhì)量,搖勻,濾過,濾液過0.45μm微孔濾膜,即得。

      2.2.3 陰性樣品溶液。按處方工藝,分別制備缺山銀花和青蒿、缺葛根、缺連翹、缺黃芩的陰性樣品,按“2.2.2”項下方法制備,即得。

      2.3 專屬性試驗

      精密吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液各10μL,在“2.1”項色譜條件下進(jìn)樣測定,結(jié)果見圖1。由此可知,該方法專屬性良好。

      2.4 線性關(guān)系考察

      精密吸取對照品溶液1、2、4、6、8、10mL,置于10mL量瓶中,70%甲醇定容,各精密吸取10μL,在“2.1”項色譜條件下進(jìn)樣測定,結(jié)果見表1。

      2.5 穩(wěn)定性試驗

      取同一份供試品溶液,色譜條件下各進(jìn)樣10μL測定,檢測結(jié)果表明溶液在36h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

      2.6 加樣回收率試驗

      取各成分含有量已知的同一批顆粒,研細(xì),取粉末約0.5g,精密稱定,共6份,精密加入對照品溶液,計算回收率,結(jié)果表明樣品的加樣回收率較高。

      3 討論

      3.1 指標(biāo)成分選擇

      本次實驗對該感冒止咳顆粒中的柴胡中的柴胡皂苷a進(jìn)行了測定,經(jīng)過檢測之后發(fā)現(xiàn)這種成分的含量較低,甚至有些藥物藥品中并沒有檢測出這種成分,因此沒有考慮這種藥品成分。在前期的實驗中也發(fā)現(xiàn),連翹中的連翹苷的含量也比較低,而且均勻性相對較差,于是選擇了另一種成分指標(biāo)連翹酯苷A。最終確定了新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、葛根素、連翹酯苷A、異綠原酸A、異綠原酸C、黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素等10種成分作為本次實驗的藥品指標(biāo),基本上包含了該藥物顆粒中的所有成分,可以全面反映藥物的質(zhì)量,具有一定的科學(xué)性。

      3.2 檢測波長選擇

      本次實驗使用的是DAD檢測器,可以在200-400nm的范圍之內(nèi)對藥物成分進(jìn)行全方位的掃描,然后采集到準(zhǔn)確的光譜。通過掃描檢測之后發(fā)現(xiàn),新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、異綠原酸A、異綠原酸C、連翹酯苷A等成分在326nm的波長位置吸收最好,葛根素則是在250nm波長處吸收最大,黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素是在278nm波長位置吸收最大,因此選擇了每一種藥物的最大吸收波長作為本次實驗的波長檢測。

      3.3 色譜條件優(yōu)化

      本次實驗對比分析了三種色譜柱,分別是Agilent ZORBAXSB-C18色譜柱、Waters Symmetry-C18色譜柱以及Thermo Hypersil Gold-C18色譜柱,最終發(fā)現(xiàn)Agilent ZORBAXSB-C18色譜柱對該藥物成分的分離效果要比其它兩種色譜柱的分離效果好很多,色譜峰的對稱性也比較好。然后又對流動相乙腈-水、乙腈-0.1%乙酸、乙腈-0.1%磷酸、甲醇-0.2%磷酸進(jìn)行了實驗考察,發(fā)現(xiàn)乙腈-0.1%乙酸洗脫效果最好,色譜峰的對稱性也比較好,將其定位本次實驗的流動相。

      參考文獻(xiàn)

      [1]何艷,胡小祥,王慶.HPLC法同時測定感冒止咳顆粒中10種成分[J].中成藥,2020,042(004):849-852.

      [2]王子凌云,梁琨,李國文.HPLC法測定芩杏清熱止咳顆粒中8種成分[J].中成藥,2019,041(005):995-999.

      [3]何悅,王四旺,肖會敏.HPLC法同時測定復(fù)方金銀花顆粒中10種成分的含量[J].藥學(xué)實踐雜志,2019,037(002):177-182.

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