王秋艷，張志剛，劉光輝

（1.新野縣動物疫病預(yù)防控制中心，河南新野 473500；2.河南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳，河南鄭州 450008；3.河南省動物疫病預(yù)防控制中心，河南鄭州 450008）

禽流感（avian influenza，AI）是由A 型禽流感病毒（avian influenza virus，AIV）引起的一種高度接觸性、急性傳染病。近年來，高致病性禽流感（HPAI）給養(yǎng)禽業(yè)造成的經(jīng)濟損失巨大。為有效防控HPAI，我國采取強制免疫政策。重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗（H5N1 Re-11株+Re-12 株，H7N9 H7 Re-2 株）是在我國廣泛應(yīng)用的疫苗。河南省從2019 年開始使用重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗進行免疫。為評價重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗免疫雞群的臨床使用效果，2019 年7—12 月在河南省進行了臨床效果調(diào)查和免疫抗體檢測，以期為全國高致病性禽流感疫苗的使用提供參考。

1 材料與方法

1.1 臨床效果調(diào)查

1.1.1 調(diào)查范圍 在河南全省范圍內(nèi)，選取104個涉農(nóng)縣轄區(qū)內(nèi)使用重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗（H5N1 Re-11 株+Re-12 株，H7N9 H7 Re-2 株）免疫的940 個存欄500 只以上的養(yǎng)雞場。

1.1.2 調(diào)查方法 采取現(xiàn)場調(diào)查與問卷調(diào)查相結(jié)合的方式。現(xiàn)場查閱養(yǎng)雞場相關(guān)生產(chǎn)記錄和疫苗使用記錄等資料，向養(yǎng)雞場獸醫(yī)技術(shù)人員詢問有關(guān)養(yǎng)殖場基本情況、生產(chǎn)情況、疫病防控情況、禽流感疫苗使用情況、疫苗使用效果、疫苗有效性評價，并填寫調(diào)查問卷。問卷內(nèi)容主要包括，養(yǎng)雞場基本情況、禽流感疫苗使用情況、疫苗使用效果、疫苗有效性評價等。對疫苗有效性評價分為“好”“一般”“差”3 個等級：疫苗免疫后抗體水平較高、無不良反應(yīng)為“好”；疫苗免疫后抗體水平高、出現(xiàn)不良反應(yīng)為“一般”；疫苗免疫后抗體水平低、出現(xiàn)嚴(yán)重死亡為“差”。

1.2 H5 和H7 亞型免疫抗體檢測

1.2.1 樣品來源 全血樣品來自328 個使用重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗免疫的養(yǎng)雞場，在免疫后28 d 左右采集。按照《河南省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳關(guān)于印發(fā)＜2019 年河南省動物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計劃＞的通知》要求和抽樣比例，每場采集30 份全血樣品，共分離血清9 655 份。

1.2.2 檢測及結(jié)果判定 依據(jù)《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T 18936—2003），采用HA 和HI 試驗，對H5 和H7 亞型免疫抗體進行檢測和結(jié)果判定。HI 抗體滴度達≥24為免疫抗體合格，群體陽性率≥70%為合格。

2 結(jié)果與分析

2.1 臨床效果

全省政府招標(biāo)的重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗生產(chǎn)企業(yè)共有6 家。被調(diào)查的940 個養(yǎng)雞場，共計免疫雞3 308 335 只。免疫后1 周內(nèi)出現(xiàn)不良反應(yīng)的養(yǎng)雞場共190 個，占20.21%，有3 754 雞只出現(xiàn)不良反應(yīng)，占0.11%；出現(xiàn)發(fā)病的養(yǎng)雞場共140 個，占14.89%，有2 975 雞只發(fā)病，占0.09%；出現(xiàn)死亡的養(yǎng)雞場共51 個，占5.43%，有1 360 雞只死亡，占0.04%。詳細結(jié)果見表1。

由表1 可見：6 家企業(yè)生產(chǎn)的三價滅活疫苗在免疫后1 周內(nèi)均出現(xiàn)一定比例的不良反應(yīng)（0.11%）以及極低的發(fā)病率（0.09%）和死亡率（0.04%）。不同企業(yè)疫苗有一定差異：甲、丁企業(yè)疫苗免疫后的不良反應(yīng)率較低（0.08%），而丙企業(yè)較高（0.36%）；丁企業(yè)疫苗免疫后的雞只發(fā)病率最低（0.07%），而己企業(yè)較高（0.14%）；丁企業(yè)疫苗免疫后的雞只死亡率最低（0.03%），但戊、己企業(yè)較高（0.06%）。

表1 疫苗臨床應(yīng)用效果

在被調(diào)查的940 個養(yǎng)雞場中，除95 個未反饋評價結(jié)果外，其余845 個對所使用的重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗進行了總體評價。其中：評價“好”的649 個，占76.81%；評價“一般”的196 個，占23.19%；評價“差”的無。

2.2 免疫抗體檢測

共檢測328 個養(yǎng)雞場，其中對9 655 份雞血清樣品進行了H5 亞型Re-11 株抗體檢測，檢出免疫合格場320 個，場群合格率為97.56%，檢出免疫抗體陽性樣品9 095 份，個體免疫抗體陽性率為94.20%；對9 616 份雞血清樣品進行了H5 亞型Re-12 株抗體檢測，檢出免疫合格場316 個，場群合格率為96.34%，檢出免疫抗體陽性樣品8 914 份，個體免疫抗體陽性率為92.70%；對9 655 份雞血清樣品進行了H7 亞型Re-2 株抗體檢測，檢出免疫合格場322 個，場群合格率為98.17%，檢出免疫抗體陽性樣品9 140 份，個體免疫抗體陽性率為94.67%。6 家生產(chǎn)企業(yè)疫苗的場群合格率和個體免疫抗體陽性率均超過了90%。詳細結(jié)果見表2～3。

3 討論

3.1 臨床效果

6 家企業(yè)生產(chǎn)的疫苗在免疫后1 周內(nèi)均會出現(xiàn)較低水平的不良反應(yīng)以及發(fā)病和死亡情況。分析原因：一是雞只本身的問題。雞只可能受母源抗體、藥物、潛伏感染等因素影響，經(jīng)免疫接種后，仍不具備足夠抵抗感染的能力，因而出現(xiàn)不良反應(yīng)，甚至發(fā)病和死亡；不同品種雞群對疫苗的免疫應(yīng)答也不同。二是疫苗本身的問題。因為不同廠家的疫苗存在抗原含量、生產(chǎn)工藝、免疫佐劑以及保存運輸?shù)确矫娴牟煌詴?dǎo)致一些差異。三是環(huán)境和養(yǎng)雞場管理的問題。疫苗使用操作不當(dāng)、接種不規(guī)范、生物安全措施不到位、飼養(yǎng)環(huán)境差、空氣污濁、氣溫過高或過低等均是導(dǎo)致免疫后出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)、應(yīng)激發(fā)病和應(yīng)激死亡的誘因。因此，在做好抗體監(jiān)測、保障群體抗體水平良好的同時，還應(yīng)當(dāng)注重養(yǎng)殖的其他重要環(huán)節(jié)，建立有效的綜合防控體系，同時結(jié)合品種、環(huán)境衛(wèi)生狀況、季節(jié)和氣溫、免疫接種次數(shù)等進行綜合分析。

表2 不同企業(yè)疫苗的場群免疫檢測結(jié)果

表3 不同企業(yè)疫苗的個體免疫檢測結(jié)果

3.2 免疫效果

從檢測結(jié)果看，群體免疫抗體陽性率均在88%以上，顯著高于規(guī)定的最低標(biāo)準(zhǔn)70%，說明6 家企業(yè)生產(chǎn)疫苗的免疫保護效果較好。但仍有個別養(yǎng)雞場的群體陽性率不合格，需要加強免疫，查找原因，及時補免。這也說明定期開展禽流感流行病學(xué)調(diào)查和疫苗免疫效果評估具有重要的臨床指導(dǎo)意義。

4 結(jié)論

940 個養(yǎng)雞場的重組禽流感病毒（H5+H7）三價滅活疫苗臨床效果評價結(jié)果表明，6 家企業(yè)生產(chǎn)疫苗的雞群臨床應(yīng)用效果較好，平均場群免疫合格率和個體免疫抗體陽性率均超過了90%，達到了較高水平。不良反應(yīng)率以及發(fā)病率和死亡率極低。但在免疫過程中，應(yīng)盡量消除影響疫苗臨床效果的不利因素，定期開展免疫效果監(jiān)測，及時調(diào)整免疫程序。