孟祥河 劉曉穎 鄒 盈 邵圣鑫

(浙江工業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院1 ，杭州 310014)(溫州科技職業(yè)學(xué)院2 ，溫州 325006)

梔子是茜草科植物梔子(GardeniajasminoidesEllis)的干燥成熟果實(shí)，主要分布在我國長江以南的一些省份[1]。梔子作為中藥，它的根、葉、花和果實(shí)都可入藥，是我國衛(wèi)生部頒發(fā)的第一批藥食兩用的藥材[2]。梔子富含多種生物活性物質(zhì)，其中梔子黃作為一種水溶性類胡蘿卜素，是廣泛使用的天然食用色素[3]。梔子苷因?yàn)榭寡谆钚院捅８卫懙淖饔脩?yīng)用較為廣泛[4, 5]。目前梔子果實(shí)的利用主要集中在梔子黃色素、梔子苷方面，萃取后的梔子殘?jiān)１蛔鳛閺U棄物丟棄，會(huì)造成了寶貴資源的浪費(fèi)。除上述活性成分外，梔子還含約20%的梔子油。與其他植物油相比，梔子油穩(wěn)定性好，飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸組成天然接近1∶1∶1，且梔子油中富含角鯊烯、甾醇等活性物質(zhì)。

目前梔子油提取方法主要是壓榨法與溶劑提取法。壓榨法設(shè)備簡單，但產(chǎn)率低；溶劑提取法提取率高，但存在環(huán)境問題及溶劑殘留引起的安全擔(dān)憂。楊冀艷等[6]還對采用超聲波輔助石油醚提取鮮梔子濕果條件進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)以石油醚為溶劑，液料比10∶1、提取45 min、重復(fù)提取3次，梔子油得率可達(dá)16.49%。超臨界萃取近年來發(fā)展較快，具有綠色、安全等優(yōu)點(diǎn)，日益受到研究人員的關(guān)注。例如王小燕[7]等嘗試了采用超臨界CO2萃取技術(shù)從梔子果中提取梔子油，其得率(22.95%)優(yōu)于石油醚提取的有機(jī)溶劑法(16.67%)。超臨界CO2萃取完成后無試劑殘留，殘?jiān)梢赃M(jìn)一步用于分離梔子黃、梔子苷等活性成分。但由于超臨界萃取設(shè)備昂貴，處理量小，操作相對復(fù)雜，生產(chǎn)規(guī)模較難擴(kuò)大化，且成本偏高因此目前在工業(yè)生產(chǎn)中不具備優(yōu)勢。水酶法通過酶作用破壞油料作物的細(xì)胞壁，促進(jìn)植物細(xì)胞中的油脂的釋放，是一種有望應(yīng)用的提油新技術(shù)。與其他工藝相比，水酶法具有反應(yīng)條件溫和，油脂品質(zhì)高，且能有效釋放其他活性成分，工藝高效、安全，易于放大等優(yōu)點(diǎn)，對于提取梔子黃色素后剩余的殘?jiān)杏椭奶崛≥^為適合。

本研究以梔子為原料，采用超聲輔助溶劑提取制備梔子苷和梔子黃，然后對梔子渣采用水酶法提取梔子油，初步實(shí)現(xiàn)了梔子的綜合利用。同時(shí)比較了水酶法、傳統(tǒng)壓榨法、溶劑萃取法制得的梔子油的品質(zhì)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 材料與試劑

黃梔子脫殼后經(jīng)高速粉碎機(jī)粉碎過40目篩得到梔子粉末。梔子苷標(biāo)品(≥98%)、梔子黃標(biāo)品(≥95%)、角鯊烯標(biāo)品(≥98%)、甾醇標(biāo)品(≥90%)、生育酚標(biāo)品(≥96%)、纖維素酶(10 000 U/g)、果膠酶(30 000 U/g)、Alcalase 2.4L堿性蛋白酶(24 000 U/g)。甲醇、正己烷為色譜純；乙醇、異丙醇、氫氧化鈉、氫氧化鉀、鹽酸、乙醚均為分析純。

1.1.2 儀器與設(shè)備

萬能高速粉碎機(jī)，KQ-2200型超聲波清洗器，CA 59 G KOMET榨油機(jī)，HJ-6B恒溫?cái)?shù)顯恒溫磁力攪拌水浴鍋，RE-2000A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，循環(huán)水真空泵，Waters E2695高效液相色譜儀，Thermo TRACE-1300 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。

1.2 方法

1.2.1 梔子果中梔子苷、梔子黃的溶劑提取方法

梔子粉末(40目)以1∶5的料液質(zhì)量比分散于50%～90%的甲醇、乙醇或異丙醇溶液中，20 ℃恒溫超聲(功率100 W、頻率40 kHz)處理30 min，取濾液適當(dāng)稀釋定容，用于HPLC分析，根據(jù)梔子苷、梔子黃標(biāo)品的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算梔子苷、梔子黃的含量。結(jié)果以3次獨(dú)立平行實(shí)驗(yàn)結(jié)果的平均值計(jì)算，梔子苷、梔子黃得率用提取得到的成分質(zhì)量占梔子原料的百分比表示，梔子苷、梔子黃的提取率為其萃取含量/梔子中該成分理論含量×100%。

HPLC分析梔子苷、梔子黃的方法：上述提取液通過0.22 μm膜微濾，使用Waters E2695 HPLC分析。色譜柱為Agilent SB-C18(4.6×250 mm，5 μm)，流動(dòng)相為甲醇∶水=50∶50，流速1.0 mL/min，進(jìn)樣量10 μL。梔子苷和梔子黃檢測波長分別為240 nm和440 nm。由梔子苷、梔子黃標(biāo)品確定出峰時(shí)間分別為3.46 min和7.47 min。

1.2.2 壓榨法和正己烷提取提取梔子油

壓榨法：梔子籽(含水量5%)直接加入冷榨機(jī)，轉(zhuǎn)速25 r/min，在溫度低于70 ℃條件下壓榨，壓榨后經(jīng)4 500 r/min 離心10 min即得到壓榨梔子油。油脂得率為油脂質(zhì)量/梔子籽質(zhì)量×100%。

正己烷提取法：稱取梔子粉末于索式抽提器中，加入正己烷在80 ℃水浴中抽提6 h，得到的油脂和溶劑的混合物經(jīng)45 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)獲得梔子油，稱重、計(jì)算梔子油得率。

1.2.3 水酶法提取梔子油

單一酶水解：梔子殘?jiān)c蒸餾水按料液質(zhì)量比1∶7混合，在90 ℃水浴中滅酶10 min，用0.1 mol/L氫氧化鈉調(diào)pH至適宜pH(相應(yīng)酶的最適pH)，分別添加纖維素酶、果膠酶或蛋白酶，在各自最適溫度下酶解。酶解結(jié)束后90 ℃滅酶10 min，冷卻至室溫，樣液離心(8 000 r/min、30 min、4 ℃)，收集上層清油。

多酶水解：梔子渣溶液滅酶后，調(diào)節(jié)pH至第一步水解酶的適宜pH，添加適量該酶水解。酶解結(jié)束后，調(diào)節(jié)pH至第二種酶制劑的最適pH，添加適量該酶特定溫度下水解既定的時(shí)間。酶解結(jié)束后滅酶10 min，冷卻至室溫，樣液離心，收集上層清油。

1.2.4 梔子油理化指標(biāo)分析

梔子油酸價(jià)測定參照AOCS-cd-3d-63方法測定[8]；梔子油過氧化值測定：參照AOCS-cd-8-53方法測定[9]；梔子油碘值的測定：參照AOCS-cd-1d-92方法測定[10]。梔子油中角鯊烯、生育酚、甾醇測定：0.2 g油樣中加入1.0 mol/L KOH-乙醇溶液50 mL，在80 ℃水浴下回流40 min，加入50 mL溫水后再加入50 mL乙醚趁熱充分振蕩2 min，轉(zhuǎn)移至分液漏斗靜置分層，上層為乙醚提取液，將下層皂化液再用40 mL乙醚萃取2次，合并3次乙醚提取液，用去離子水洗至下層流出液加酚酞試劑不變色，用無水硫酸鈉除水后，溶劑經(jīng)減壓回收得到不皂化物。不皂化物溶解于正己烷溶劑定容至5 mL，過0.22 μm有機(jī)微膜，用于GC-MS分析。

GC-MS條件：色譜柱：TG-5 (30 m×0.25 mm×0.20 μm)；升溫程序：170 ℃，保持1 min；以8 ℃/min升溫至280 ℃，保持20 min；載氣(He)流速：1.0 mL/min，進(jìn)樣量：1 μL，分流比：20∶1。含量根據(jù)角鯊烯、生育酚、甾醇相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算，以每百克油中含量計(jì)(mg/100 g)。

1.2.5 梔子油脂肪酸組成分析

甲酯化：0.1 g樣品油與4 mL、0.5 mol/L NaOH-CH3OH溶液充分混勻，在75 ℃水浴中回流15 min，再向其中加入5 mL、55% BF3-CH3OH充分混勻，繼續(xù)回流2 min，加2 mL色譜純正己烷，1 min后加15 mL飽和NaCl，振蕩15s后，趁熱轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，加入飽和NaCl至容量瓶頸部，加5 mL色譜純正己烷，搖勻，靜置移取上清液，0.22 μm有機(jī)微膜過濾，用于GC-MS分析。脂肪酸組成定性采用與NIST數(shù)據(jù)庫比對，面積歸一法定量。

GC-MS條件：色譜柱：DB-WAX (60 m×0.25 mm×0.25 μm)；升溫程序：90 ℃，保持5 min；以10 ℃/min升溫至200 ℃，保留至10 min；以0.5 ℃/min升溫至220 ℃，保留時(shí)間5 min，以5 ℃/min升溫至240 ℃，保持10 min；載氣(He)流速：1.0 mL/min，進(jìn)樣量：1 μL，分流比：20∶1。

2 結(jié)果與討論

2.1 梔子果溶劑預(yù)萃取分離梔子苷和梔子黃的研究

在食品醫(yī)藥工業(yè)上，梔子主要用于制備梔子黃色素和梔子苷。本研究探討梔子果溶劑萃取預(yù)處理，一方面可高效回收活性成分梔子黃、梔子苷，同時(shí)可減少后續(xù)水酶法萃油時(shí)兩性的梔子苷引起的乳化，提高梔子油得率。

2.1.1 萃取溶劑及其體積分?jǐn)?shù)對梔子苷和梔子黃得率的影響

研究食品制藥工業(yè)常用的甲醇、乙醇、異丙醇溶劑萃取效果。不同的濃度的3種醇溶液料液比1∶5，25 ℃超聲萃取30 min梔子苷、梔子黃得率如圖1所示。對于梔子苷的提取，在50%～90%體積分?jǐn)?shù)范圍內(nèi)隨著甲醇、乙醇、異丙醇體積分?jǐn)?shù)的增加，梔子苷得率逐漸增加。達(dá)到最大值后，溶劑體積分?jǐn)?shù)進(jìn)一步增加，梔子苷得率有所下降。最佳甲醇體積分?jǐn)?shù)為70%，梔子苷得率為5.43%；而乙醇、異丙醇最適萃取體積分?jǐn)?shù)為60%，相應(yīng)的梔子苷得率分別為5.48%、4.98%。而對于梔子黃的提取，甲醇、乙醇、異丙醇的最佳萃取體積分?jǐn)?shù)均為60%，其中60%乙醇的梔子黃得率最高，為6.07%，甲醇、異丙醇的梔子黃得率接近，約為5.2%。梔子黃為水溶性色素，易溶于水，而梔子苷同樣易溶于水但也在甲醇、乙醇、異丙醇等醇溶液中也具有一定溶解性；溶劑體系中醇體積分?jǐn)?shù)較低時(shí)，親醇性物質(zhì)與梔子苷、梔子黃競爭水分能力較強(qiáng)，而隨著醇體積分?jǐn)?shù)的上升，水在溶劑體系中占比降低，梔子苷與梔子黃在水中的體積分?jǐn)?shù)逐漸過高而導(dǎo)致物料與溶液體積分?jǐn)?shù)差減小，得率因此降低?？紤]到不同濃度的甲醇對梔子黃提取效果差異不明顯，因此萃取條件優(yōu)化實(shí)驗(yàn)中，分別采用70%的甲醇、60%的乙醇、60%的異丙醇。

圖1 萃取溶劑及體積分?jǐn)?shù)對梔子苷和梔子黃得率的影響

2.1.2 料液比對梔子苷和梔子黃得率的影響

不同料液比的3種醇溶液對梔子黃與梔子苷的得率如圖2所示。結(jié)果顯示，梔子黃、梔子苷得率均隨著料液比的增加而增加并逐漸穩(wěn)定。隨著萃取溶劑用量增大，梔子渣料與溶劑中的梔子苷與梔子黃的濃度差越大，擴(kuò)散速度越快，產(chǎn)物得率越高。而溶劑用量過大時(shí)，相同的萃取時(shí)間內(nèi)得率變化不明顯。用60%乙醇萃取，當(dāng)料液比達(dá)到1∶7時(shí)梔子苷、梔子黃的得率逐漸穩(wěn)定，約為6.62%、7.34%；而70%甲醇在料液比為1∶7時(shí)，相關(guān)得率逐漸穩(wěn)定在5.22%、6.11%；1∶6的料液比下60%異丙醇對應(yīng)的梔子苷與梔子黃的得率分別為6.11%、6.71%。雖然繼續(xù)擴(kuò)大料液比以及延長萃取時(shí)間梔子苷與梔子黃的得率略微增加，但過多的溶劑消耗及濃縮成本增加。因此確定60%的異丙醇的最佳料液比為1∶7的，60%的乙醇、70%的甲醇的適宜料液比為1∶6、1∶7。

圖2 不同料液比對梔子苷和梔子黃得率的影響

2.1.3 三種溶劑不同萃取時(shí)間下梔子苷和梔子黃的得率

超聲輔助條件下，70%甲醇、60%乙醇、60%異丙醇溶液萃取梔子苷、梔子黃的時(shí)間進(jìn)程曲線如圖3所示。隨著萃取時(shí)間延長，梔子黃、梔子苷的得率均逐漸增加并最終達(dá)到平衡。對于梔子苷，異丙醇在20 min即達(dá)到萃取平衡，得率為6.30%；乙醇、甲醇則分別需25、30 min 達(dá)到萃取平衡，梔子苷得率分別為6.84%，5.76%。對于梔子黃，甲醇、乙醇、異丙醇萃取平衡均落在25～30 min之間，其中乙醇、異丙醇萃取率較佳，分別為8.23%、8.18%，甲醇25 min達(dá)到萃取平衡，梔子黃得率為6.55%。

目前關(guān)于梔子苷、梔子黃提取優(yōu)化主要采用有機(jī)溶劑浸提方法。胡震等[11]用80%乙醇回流提取，料液比為1∶5，提取1次，提取時(shí)間1 h，梔子苷得率為2.53%。黃建軍等[12]比較了水提法和有機(jī)溶劑浸提法對梔子黃色素提取效果的影響，采用甲醇水溶液作浸提劑，在常溫下浸提24 h，梔子黃色素得率可以達(dá)到11%～12%。游劍等[13]采用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了溶劑提取梔子苷工藝條件。60%乙醇以1∶4的料液比，在75 ℃下提取3 h，得率達(dá)12.59%。游劍等[14]也比較了直接浸泡法、滲漉法、回流提取法、超聲法和微波法不同工藝對梔子苷提取效果的影響。結(jié)果表明，回流提取法的效果最好，料液比為1∶3，60%乙醇在65 ℃下提取2 h，梔子苷得率為11.69%。超聲輔助溶劑提取法相較于傳統(tǒng)溶劑法來說，具有提取率高、高效省時(shí)、常溫提取等優(yōu)點(diǎn)。張德權(quán)[15]等比較了超聲振蕩法、索式提取法和水浴回流法對梔子甙提取效果的影響，結(jié)果表明用甲醇-水溶液(1∶1)超聲提取1 h，梔子甙得率最高為3.315%。不同文獻(xiàn)梔子苷和梔子黃得率略有差異，是源于使用不同的梔子原料和檢測方法。本研究通過超聲輔助60%乙醇溶液預(yù)萃取處理25 min，初步可以實(shí)現(xiàn)梔子苷、梔子黃79%～89%的提取率；超聲輔助60%異丙醇溶液預(yù)萃取20 min基本能實(shí)現(xiàn)梔子苷與梔子黃78%～82%的提取率。

圖3 超聲波輔助萃取時(shí)間對梔子苷和梔子黃得率的影響

圖4 不同溶劑預(yù)處理后梔子渣纖維素酶水解的梔子清油得率

2.1.4 不同溶劑預(yù)處理后殘?jiān)阜ㄖ朴偷那逵偷寐?/p>

采用優(yōu)化后的超聲輔助70%甲醇、60%乙醇、60%異丙醇預(yù)處理后所得的梔子渣(無溶劑預(yù)處理?xiàng)d子粉為照組)分別采用纖維素酶50 ℃水解2 h，梔子油清油得率如圖4所示。對照組由于乳化顯現(xiàn)嚴(yán)重，清油產(chǎn)率僅為9.42%。實(shí)驗(yàn)組甲醇、乙醇、異丙醇預(yù)處理后，酶解液分層明顯，梔子油清油得率有所改善，分別提高至10.17%、10.14%、12.06%，表明溶劑預(yù)萃取不僅高效回收了生物活性的梔子苷、梔子黃成分，對改善后續(xù)梔子渣水酶法制油也具有積極作用。典型的溶劑預(yù)處理對水酶法過程中乳化程度的直觀影響見圖5。梔子果中含有較多的兩性梔子苷、果膠、多糖等物質(zhì)，酶水解時(shí)這些物質(zhì)釋放到溶液中會(huì)促進(jìn)梔子油、水乳化，降低清油產(chǎn)率。醇溶液預(yù)萃取一定程度脫除了這些物質(zhì)，因此起到了改善水酶法制油效果。綜合考慮梔子黃、梔子苷的提取率以及后續(xù)水酶法清油得率，實(shí)驗(yàn)確定梔子預(yù)處理?xiàng)l件為60%異丙醇溶液、料液比為1∶6，超聲輔助萃取20 min。

圖5 溶劑預(yù)處理對水酶法水解過程中乳化的影響

2.2 梔子渣中梔子油的水酶法提取研究

2.2.1 不同酶種類及其分步酶解對梔子清油得率的影響

在大豆、菜籽、花生等常見的油料作物中油脂滴主要包裹在蛋白、淀粉、多糖中，或形成結(jié)合態(tài)[16]。而梔子果中蛋白含量很低，纖維素、木質(zhì)素、果膠、半纖維素豐富，油滴被包圍在其中，部分脂質(zhì)與蛋白質(zhì)結(jié)合形成脂蛋白復(fù)合物。因此梔子油的釋放的關(guān)鍵在于纖維素酶或果膠酶對細(xì)胞壁的酶解破壞以及蛋白酶對脂蛋白的水解程度。本實(shí)驗(yàn)所用梔子果理論粗脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)為18.10%。不同種類酶一步水解及其組合酶的分步水解效果如表1所示。數(shù)據(jù)顯示，對照組不添加水解酶(水代萃取法)清油得率低至5.2%，這可能是梔子粉碎使部分細(xì)胞破損，曝露的油脂被水替代而釋放出來。而大部分油脂仍保留在完整的組織細(xì)胞內(nèi)，水分很難穿透細(xì)胞壁取代細(xì)胞內(nèi)油脂。纖維素酶、果膠酶、蛋白酶水解均提高了梔子清油產(chǎn)率，且梔子油得率在12.42%～15.96%之間。目前鮮有水酶法制備梔子油的數(shù)據(jù)可比較，但單一酶解清油得率已明顯高于壓榨法及超臨界CO2萃取法。Cai等[2]在室溫下通過冷榨法提取梔子油，將冷榨的油以5 000 r/min 離心10分鐘除去雜質(zhì)，清油得率為5.66%。李寶莉等[17]優(yōu)化超臨界CO2萃取梔子油工藝發(fā)現(xiàn)，萃取壓力25 MPa、解析釜I壓力12 MPa、萃取溫度45 ℃、解析釜I溫度45 ℃梔子油得率為12.0%。類似的，包亞妮等[3]發(fā)現(xiàn)超臨界CO2萃取壓力35 MPa、萃取溫度55 ℃、CO2流速13 kg/h時(shí)，梔子油得率為10.89%。

目前絕大多數(shù)研究仍集中于溶劑萃取。如袁源見等[18]采用響應(yīng)面中心設(shè)計(jì)法優(yōu)化了超聲波輔助石油醚提取梔子油工藝參數(shù)，液料比11.62∶1、單次提取28.7 min、重復(fù)提取3.36次，梔子油得率為13.50%。劉瑞英[19]以石油醚為溶劑在料液比1∶7，80～86 ℃回流萃取，梔子出油率提高至12.36%。張風(fēng)波等[20]優(yōu)化石油醚萃取梔子油工藝發(fā)現(xiàn)，料液比1∶5，81 ℃萃取4 h梔子油得率為19.21%。而辛莎[21]用90～120 ℃的石油醚提取梔子油，梔子粉粒度60目、料液比1∶6、100 ℃、1.5 h梔子油得率為19.46%，但需要二次提取?？傮w來講，不同提取方法梔子油產(chǎn)率不同，此外也可能與采用的梔子種類不同有關(guān)，但得率多在10%～20%之間，但溶劑萃取帶來的工藝安全及產(chǎn)品安全隱患仍是不期望的。

本研究中，雙酶組合分步水解進(jìn)一步改善了梔子清油得率。如纖維素酶、蛋白酶組合水解后清油得率提高至15.96%，果膠酶、蛋白酶組合清油得率略低約為14.52%，暗示單一酶不足以完全破壞梔子果組織細(xì)胞、完全釋放梔子中的油脂。當(dāng)不同類型的酶耦聯(lián)在一起時(shí)，協(xié)同降解梔子組織效果顯現(xiàn)，因此脂質(zhì)產(chǎn)率顯著增高。纖維素酶、果膠酶組合清油得率(13.03%)雖然相對于單酶水解也有所改善，但不如前兩組效果明顯。這可能是這兩種酶作用的底物均為碳水化合物有關(guān)。雙酶水解得到梔子油的得率幾乎可與溶劑萃取法相媲美，同時(shí)梔子組織降解徹底，更利于梔子中活性脂類伴隨物的釋放，顯示出水酶法制油高效、營養(yǎng)、安全的優(yōu)勢。

表1 單酶水解與多酶水解對梔子油清油得率的比較

2.2.2 水解液中梔子苷、梔子黃含量

實(shí)驗(yàn)所用梔子原料中梔子苷、梔子黃中含量分別為7.68%和10.45%的，異丙醇溶液預(yù)萃取基本能實(shí)現(xiàn)78%～82%的梔子苷與梔子黃的提取率，余下的則可能仍被包裹在梔子渣中。酶水解時(shí)梔子渣組織分解，未被萃取的梔子黃、梔子苷進(jìn)一步釋放至水溶液中，可用于后續(xù)回收。不同的水解酶酶解，梔子苷、梔子黃釋放程度可能不同，具體數(shù)據(jù)參見表2。結(jié)果顯示，果膠酶水解釋放的梔子苷、梔子黃數(shù)量要多于纖維素酶和蛋白酶，含量分別為0.61%和1.52%。有報(bào)道顯示，纖維素酶可能催化梔子苷水解，而蛋白酶可能催化京平尼、氨基化合物反應(yīng)生成梔子藍(lán)色素[22]，因此導(dǎo)致水解液中梔子苷含量偏低，也會(huì)引起梔子黃綠化導(dǎo)致梔子黃降低[23]。這一點(diǎn)在雙酶分步水解時(shí)有所顯現(xiàn)。酶、底物作用時(shí)間延長，因此水解液中梔子苷、梔子黃含量進(jìn)一步降低。水解前溶劑預(yù)萃取加上水酶法釋放，梔子苷、梔子黃的釋放率最高可達(dá)87%及86%，完全滿足梔子綜合利用的要求。

2.3 不同提取方法獲得的梔子油品質(zhì)比較

壓榨法，溶劑萃取法以及水酶法提取的桅子油的主要成分構(gòu)成以及品質(zhì)參數(shù)見表2所示。數(shù)據(jù)顯示，梔子油中最主要脂肪酸分別為亞油酸(37.02%～40.39%)、油酸(34.00%～35.08%)、棕櫚酸(18.33%～19.16%)，此外含有少量的硬脂酸(3.66%～4.28%)、亞麻酸(0.77%～1.08%)，二十碳烯酸(1.65%～2.38%)，其中飽和脂肪酸/單不飽和脂肪酸/多不飽和脂肪酸比例接近0.6∶1∶1。三種制備方法得到的梔子油脂肪酸組成差異不明顯。溶劑萃取法和水酶法制得油脂酸價(jià)略高于壓榨法，但碘價(jià)略低。對于過氧化物值，溶劑萃取法梔子油最高，這與油脂經(jīng)溶劑熱處理有關(guān)。但化學(xué)指標(biāo)均符合食用油品質(zhì)國家標(biāo)準(zhǔn)。微量營養(yǎng)方面，水酶法提取的梔子油中油脂伴隨物明顯偏高。如角鯊烯含量為600 mg/100 g，高出壓榨法及溶劑萃取組約33%～37%，為超臨界CO2萃取組的12倍。生育酚含量(39.74 mg/100 g)略微低于壓榨法及超臨界萃取法獲得的梔子油(45.33，47.94 mg/100 g)，但顯著高于溶劑萃取組(34.93 mg/100 g)。梔子油中的甾醇主要為β-谷甾醇、菜油甾醇和豆甾醇，其中β-谷甾醇、菜油甾醇含量分別約為豆甾醇含量的3倍。其中超臨界CO2萃取法梔子油甾醇含量最低(627 mg/100 g)，其次為溶劑萃取法和壓榨法(1 070、1497.4 mg/100 g)，水酶法最高(1 651.4 mg/100 g)，約為超臨界CO2萃取法的2.6倍。較高的脂質(zhì)伴隨物，暗示了水酶法梔子油相對于壓榨法及溶劑萃取法更好地保存了梔子的活性成分，具有更高的營養(yǎng)價(jià)值。

表2 3種方法提取的梔子油的理化性質(zhì)和脂肪酸組成的比較

3 結(jié)論

超聲輔助溶劑預(yù)萃取梔子苷、梔子黃，剩余果渣采用水酶法萃取油脂可以實(shí)現(xiàn)梔子高效綜合利用，改工藝綠色、安全、可行。最優(yōu)條件下可實(shí)現(xiàn)86%～87%的梔子苷、梔子黃回收率，15.96%的梔子油得率。油脂產(chǎn)率優(yōu)于傳統(tǒng)壓榨法甚至可與有機(jī)溶劑萃取法相媲美。不同提取方法所得梔子油的理化及組成分析表明，水酶法提取的梔子油的酸價(jià)、碘價(jià)、脂肪酸組成與壓榨法及溶劑萃取法產(chǎn)品差別不大，過氧化物值略低。此外水酶法梔子油脂質(zhì)伴隨物含量明顯高于其它方法，尤其富含抗氧化的角鯊烯及高降血脂活性甾醇類及適量VE，顯示出水酶法梔子油更高的營養(yǎng)價(jià)值。