王晶晶,韓玲,余群力,林娟,韓廣星,金錦偉,張新軍
(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,甘肅 蘭州 730070;2.山東綠潤食品有限公司,山東 臨沂 276000;3.青海五三六九生態(tài)牧業(yè)科技有限公司,青海 果洛 814000;4.寧夏華夏肉食品有限公司,寧夏 中衛(wèi) 755000)
我國是肉類消費(fèi)大國,僅2019年全國肉牛出欄就達(dá)4 534萬頭[1],肉牛的養(yǎng)殖與屠宰加工一直以較快的速度增長.作為牛主要副產(chǎn)物的紅白臟器占畜體活重的8.47%,利用率卻不高[2].這些內(nèi)臟可以直接烹調(diào)食用,或加工成特色食品,或作為醫(yī)藥工業(yè)中生化制藥的原料.目前有關(guān)采用現(xiàn)代食品及科學(xué)技術(shù)研發(fā)牛副產(chǎn)物食品的研究還鮮見報(bào)道[3-4].牛副產(chǎn)物蛋白質(zhì)、脂肪含量高,礦物質(zhì)含量豐富[5-6].近年來牛肉餅因蛋白含量高、烹飪方式簡單快捷深受消費(fèi)者喜愛[7].目前對牛肉餅的研究主要是品質(zhì)與加工特性等方面,牛肉餅脂肪含量高,易出水出油,質(zhì)構(gòu)松散[8],脂肪含量高加速牛肉餅蛋白氧化和理化性質(zhì)改變[9],攝入過高脂肪會增加患心血管等疾病的風(fēng)險(xiǎn)[10].利用纖維素、蛋白質(zhì)、碳水化合物、模擬脂肪、膠體類等替代脂肪添加在肉餅中的應(yīng)用研究已成為畜類肉品加工研究的熱點(diǎn)[8].因此在不影響肉制品接受性的前提下,將牛副產(chǎn)物與牛肉復(fù)合,運(yùn)用脂肪替代物減少牛雜肉餅脂肪含量,不僅能改善牛肉餅的營養(yǎng)組成,開發(fā)出新型牛肉餅,而且還能提高牛副產(chǎn)物的利用價(jià)值,減輕動物源性廢棄物對環(huán)境的污染,延長我國畜牧業(yè)產(chǎn)業(yè)鏈,帶動農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化水平和農(nóng)業(yè)綜合效益的全面提高.
作為脂肪替代物淀粉、卡拉膠、大豆分離蛋白(SPI)還具有提高黏結(jié)性、持水性、嫩度與增加出品率等作用[11].淀粉加入肉制品中可起到保水保油,增加制品黏結(jié)性,提高制品出品率,但是添加量過多又會影響產(chǎn)品色澤、口感、外觀等.卡拉膠目前已有應(yīng)用到各類肉餅加工中的報(bào)道,如Gao等[12]認(rèn)為在豬肉餅中加入一定量卡拉膠能提高嫩度,改善風(fēng)味.其他學(xué)者也發(fā)現(xiàn)卡拉膠加入牛肉餅中灰分與膽固醇變化顯著,應(yīng)用在肉餅包裝薄膜中也有顯著效果[13-14].SPI適量添加可以改善牛肉餅松散的結(jié)構(gòu),SPI中的植物蛋白能改變動物性食物蛋白的氨基酸組成,還能增加豆香風(fēng)味[15].黏合酶谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶(TG)主要應(yīng)用在碎肉粘合領(lǐng)域,能夠改善牛肉餅質(zhì)構(gòu)松散的問題,作用機(jī)制是通過催化蛋白質(zhì)分子間的交聯(lián)將非肉蛋白粘合到肉上.另外SPI與TG酶還有一定的交聯(lián)特性,能提高SPI營養(yǎng)價(jià)值,改善SPI的表面疏水性[16],TG酶結(jié)合卡拉膠能改善牛肉的質(zhì)構(gòu)特性和保水性[17].目前有關(guān)牛雜肉餅中脂肪替代物的應(yīng)用還未見報(bào)道.
本研究以牛肉、牛心、牛肝、牛胃為原料,通過單因素試驗(yàn)及響應(yīng)面回歸設(shè)計(jì),在低脂復(fù)合牛雜肉餅研發(fā)過程中以淀粉、卡拉膠、SPI和TG酶復(fù)配對低脂復(fù)合牛雜肉餅配方進(jìn)行優(yōu)化,以彈性和感官評分為評價(jià)指標(biāo),篩選出最佳配比,研究低脂復(fù)合牛雜肉餅產(chǎn)品品質(zhì),旨為低脂復(fù)合牛雜肉餅的實(shí)際生產(chǎn)提供理論依據(jù)與技術(shù)指導(dǎo).
牛肉、牛心、牛肝、牛胃均采自青海百德食品有限公司檢疫合格的2歲肉牛,宰后排酸3~4 d的后腿肉,剔除筋膜、脂肪,-18 ℃冷凍備用;牛心、牛肝、牛胃宰后2~3 h內(nèi)去除表面脂肪、筋膜、結(jié)締組織及雜物后用潔凈保鮮袋密封,-18 ℃冰箱冷凍備用.
食鹽、味精、白砂糖、姜粉購自甘肅省蘭州市安寧區(qū)桃海市場;卡拉膠、SPI、TG酶、木瓜蛋白酶,臨沂山松生物制品有限公司;異抗壞血酸鈉,江西省德興市百德異VC鈉有限公司;淀粉,新鄉(xiāng)良潤全谷物食品有限公司;金龍魚大豆油,嘉里糧油(天津)有限公司;以上材料均為食品級.
硫酸銅、硫酸鉀、氫氧化鈉、無水硫酸鈉,天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司;石油醚、硫酸、硼酸、95%乙醇,成都市科隆化學(xué)品有限公司.
TS-22臺式絞肉機(jī),諸城和義機(jī)械有限公司;TA.XT Plus質(zhì)構(gòu)儀,英國Stable Micro Systems公司;HX202T型電子天平,浙江慈溪市天東衡器廠;DZQ-420C型真空包裝機(jī),泉州市安爾盛機(jī)械有限公司;Konica CR-10色差儀,柯尼卡美能達(dá)光電股份有限公司;SP-756P型紫外可見分光光度計(jì),上海光譜儀器有限公司.
原料→預(yù)處理→低溫腌制→拌料→成型→冷凍→真空包裝→煎烤.
1.4.1 原料選擇 選取檢疫合格的優(yōu)質(zhì)原料牛肉、牛心、牛肝、牛胃.
1.4.2 預(yù)處理 牛肉解凍后,剔除脂肪、筋膜部分.心、肝解凍后剔去脂肪和軟組織,切成0.3 cm薄片浸泡入水,換水4 ℃浸泡4 h直至水清,瀝干水分;牛胃解凍后除去脂肪等雜質(zhì)清洗干凈.
牛肉餅:牛肉原料按照質(zhì)量比6∶4比例處理成約0.5 cm肉粒和牛肉糜,混合均勻.
復(fù)合牛雜肉餅:牛肉處理方式與牛肉餅相同,牛心、牛肝、牛胃絞碎成肉糜.將原料按照牛肉∶牛心∶牛肝∶牛胃=3.5∶4∶1.5∶1的質(zhì)量比混合均勻備用.
1.4.3 低溫腌制 配制腌制液(以占原料牛肉重量比例為基準(zhǔn)),稱取所需添加劑及所用的去離子水,配制好腌制液,加入按比例混合好的原料后,4 ℃下腌制4 h,每隔1 h翻轉(zhuǎn)一次,保證腌制均勻.
1.4.4 拌料 按照不同的口味稱取相應(yīng)的輔料與品質(zhì)改良劑,在腌制好的原料中加入輔料和品質(zhì)改良劑后,攪拌機(jī)中攪拌5 min,使其均勻混合,增強(qiáng)粘性.
1.4.5 成型冷凍 將拌好的牛肉糜壓制成牛肉餅后轉(zhuǎn)移至腌制間,在4 ℃下反應(yīng)4 h后迅速放入-30 ℃冷凍間,冷凍成型.
1.4.6 真空包裝 真空包裝后封口,封口要求平整無漏氣、美觀無褶皺.
1.4.7 煎烤 取冷凍低脂復(fù)合牛雜肉餅室溫下解凍4 h,200℃煎烤5 min.
參考國標(biāo)GB/T 16291.1-2012感官分析選拔、培訓(xùn)與管理評價(jià)員一般導(dǎo)則第1部分:優(yōu)選評價(jià)員[18]標(biāo)準(zhǔn),選拔10名專業(yè)感官評價(jià)員對低脂復(fù)合牛雜肉餅進(jìn)行感官評價(jià),參考鄺吉衛(wèi)等[19]與王浩田等[20]的方法并略作修改.感官評分表見表1.計(jì)算公式如下:
感官評分=0.2×色澤+0.2×外觀形態(tài)+0.2×組織狀態(tài)+0.2×風(fēng)味+0.2×口感
表1 感官評分表
以卡拉膠添加量、TG酶添加量、淀粉添加量和SPI添加量為自變量,以彈性和感官評分為因變量進(jìn)行單因素試驗(yàn).根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,以卡拉膠添加量(A)、TG酶添加量(B)、淀粉添加量(C)和SPI添加量(D)為自變量,感官評分(Y)為響應(yīng)值,用Design-Expert 8.0進(jìn)行響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì).試驗(yàn)各因素與水平見表2.
表2 Box-Behnken因素水平表
參考Barbut等[21]的方法并加以改進(jìn).使用取樣器在冷卻至室溫的低脂復(fù)合牛雜肉餅中心制備樣品(d=16 mm,h=10 mm),測定低脂復(fù)合牛雜肉餅的彈性.質(zhì)構(gòu)儀參數(shù)如下:探頭型號P/35,測定模式選擇下壓距離,測前速度2 mm/s,測試速度1 mm/s,測后速度1 mm/s,下壓距離為樣品原始高度的75%.數(shù)據(jù)采集速率為220 pps,每組樣品重復(fù)測試3次,取平均值.
以牛肉餅作為對照組,低脂復(fù)合牛雜肉餅作為試驗(yàn)組,測定相應(yīng)品質(zhì)指標(biāo).水分、蛋白質(zhì)、脂肪、灰分含量的測定分別參考GB5009.3-2016、GB5009.5-2016、GB5009.6-2016、GB5009.4-2016,每個樣品重復(fù)測定3次,取平均值.
利用色度計(jì)對低脂復(fù)合牛雜肉餅切面進(jìn)行色澤指數(shù)的測定.
出品率的測定公式:
(1)
式中:m1,煎烤后的低脂復(fù)合牛雜肉餅質(zhì)量,g;m2,原料牛肉和牛副產(chǎn)物的質(zhì)量,g.
由圖1-A可知,在淀粉添加量1%~3%時(shí),顯著影響低脂復(fù)合牛雜肉餅的彈性(P<0.05),隨淀粉添加量的增加,低脂復(fù)合牛雜肉餅彈性更好,曲線相對斜率更大;當(dāng)?shù)矸厶砑恿看笥?%時(shí),隨淀粉添加量增加彈性略有下降,但仍然比添加量小于2%的高.淀粉的添加量對于感官評分值的影響總體也是先上升后下降的趨勢.在淀粉添加量為3%時(shí)感官評分值最好,當(dāng)?shù)矸厶砑又荡笥?%時(shí)感官評分開始下降.
由圖1-B可知,在試驗(yàn)范圍內(nèi)隨著卡拉膠添加量的增加,低脂復(fù)合牛雜肉餅彈性相應(yīng)增加,在卡拉膠添加量大于0.6%時(shí)對彈性的影響不顯著(P>0.05).感官評分在卡拉膠添加量0.4%~0.6%時(shí),隨著卡拉膠添加量的增加,感官評分值升高.
由圖1-C可知,SPI添加量對感官評分及彈性的影響均為先上升后下降的趨勢.SPI添加量在1.5%時(shí)感官評分值與彈性隨SPI添加量變化的曲線到達(dá)峰值.感官評分除了在0.5%與2.5%的SPI添加量下數(shù)值接近,其余梯度感官評分相互差異顯著(P<0.05).
由圖1-D可知,TG酶的添加量在0.2%~0.6%范圍內(nèi)對彈性影響顯著(P<0.05),添加量超過0.6%時(shí)對彈性的影響先略有上升又略有下降,但影響不顯著(P>0.05).TG酶對感官評分的影響與對彈性的影響趨勢相似,在添加量到0.6%時(shí),感官評分值出現(xiàn)最大值.
小寫字母不同表示差異顯著(P<0.05).Different lowercase letters indicate significant differences(P<0.05).圖1 淀粉(A)、卡拉膠(B)、SPI(C)和TG酶(D)對低脂復(fù)合牛雜肉餅彈性和感官評分的影響Figure 1 Effects of starch (A),carrageenan (B),SPI (C) and TGase (D) on the elasticity and sensory score of low fat compound beef patties
2.2.1 Box-Behnken試驗(yàn)結(jié)果及模型的建立 通過響應(yīng)面法優(yōu)化脂肪替代物與黏合劑配方,結(jié)合單因素試驗(yàn)結(jié)果,選取淀粉添加量(A)、卡拉膠添加量(B)、SPI添加量(C)和TG酶添加量(D)進(jìn)行4因素3水平的Box-Behnken響應(yīng)面分析試驗(yàn),以感官評分(Y)為響應(yīng)值,試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表3.運(yùn)用Design-Expert 8.0對表中的數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合,得到感官評分(Y)與4個因子A、B、C、D的關(guān)系為:
感官評分值(Y)=19.53+0.13A+0.38B-0.084C+0.23D-0.010AB-0.032AC-0.027AD+5.000E-003BC+1.000E-002BD-0.015CD-0.35A2-0.83B2-0.99C2-0.62D2
表3 Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及其響應(yīng)值
表4 低脂復(fù)合牛雜肉餅感官評分回歸模型方差分析
2.2.3 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果及驗(yàn)證 根據(jù)響應(yīng)面試驗(yàn)可以得出各因素在低脂復(fù)合牛雜肉餅中的最佳使用量為:淀粉添加量3.18%,卡拉膠添加量0.65%,SPI添加量1.48%,TG酶添加量0.64%,在此條件下感官評分預(yù)測值為19.605 5.為證實(shí)該配方添加后對低脂復(fù)合牛雜肉餅品質(zhì)改良的效果,對得到的最佳復(fù)配配方進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn),做10次平行試驗(yàn)求平均值,最終得到的感官評分為19.56,與預(yù)測值19.605 5非常接近.證明本試驗(yàn)?zāi)P湍軌蜉^好地反映脂肪替代物與黏合劑對低脂復(fù)合牛雜肉餅感官評分的影響.
低脂復(fù)合牛雜肉餅(B)與牛肉餅(A)營養(yǎng)指標(biāo)結(jié)果見表5,低脂復(fù)合牛雜肉餅水分含量高,蛋白含量高,粗脂肪含量低,灰分含量高,比對照組更健康營養(yǎng).
表5 低脂復(fù)合牛雜肉餅營養(yǎng)品質(zhì)測定結(jié)果
由表6可得,低脂復(fù)合牛雜肉餅彈性、回復(fù)性及出品率優(yōu)于對照組,黏著性、咀嚼性較對照組低.
表6 低脂復(fù)合牛雜肉餅質(zhì)構(gòu)及出品率測定結(jié)果
由表7可知,實(shí)驗(yàn)組紅度值與黃度值小于對照組,亮度值大于對照組,低脂復(fù)合牛雜肉餅色澤略遜于對照組.
表7 低脂復(fù)合牛雜肉餅色度值測定結(jié)果
通過單因素試驗(yàn)及響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化結(jié)果表明,低脂復(fù)合牛雜肉餅中淀粉添加量過多會導(dǎo)致口感綿軟,咀嚼性變差,3.18%添加量最好.但是也有學(xué)者研究得出添加復(fù)配淀粉15%時(shí)肉餅彈性最好,這可能是由于試驗(yàn)所選用淀粉種類不同,因?yàn)橹辨湹矸酆繒绊懙矸鄯肿咏宦?lián)形成的凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)[22],從而影響食品彈性.
加熱溶解后的卡拉膠形成有雙螺旋結(jié)構(gòu)的凝膠,這種分子結(jié)構(gòu)能有效增加肉餅持水性[23].在試驗(yàn)范圍內(nèi)隨著卡拉膠的添加量增加,低脂復(fù)合牛雜肉餅的彈性越好,但感官評分先升高后降低,這可能是由于卡拉膠添加量過高會導(dǎo)致低脂復(fù)合牛雜肉餅咀嚼口感變差[24-25],同時(shí)伴有不良風(fēng)味的產(chǎn)生[26].
SPI的添加賦予低脂復(fù)合牛雜肉餅獨(dú)特的豆香味,同時(shí)隨著添加量的增加影響產(chǎn)品口感:一方面SPI的可溶性水解物會破壞牛雜肉餅質(zhì)構(gòu),使低脂復(fù)合牛雜肉餅繩狀交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)不連續(xù),口感松散細(xì)碎;另一方面SPI的不溶性聚集體能提高肉糜彈性,誘導(dǎo)形成連續(xù)質(zhì)密的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)[27].
TG酶添加量對復(fù)合牛雜肉餅的質(zhì)構(gòu)影響較大,隨著TG酶添加量的增加,酶與蛋白質(zhì)交聯(lián)反應(yīng)促進(jìn)了產(chǎn)品質(zhì)構(gòu)緊實(shí)度.當(dāng)TG酶添加量超過適宜用量時(shí),由于酶缺少反應(yīng)底物或酶的作用已達(dá)到最佳,因此對于低脂復(fù)合牛雜肉餅的質(zhì)構(gòu)品質(zhì)及感官評價(jià)影響較小,本試驗(yàn)TG酶添加量對產(chǎn)品品質(zhì)的影響與段茂華等[28]研究結(jié)果一致.
本試驗(yàn)多元回歸模型變異系數(shù)(CV)=0.37%,變異系數(shù)表示試驗(yàn)的精確度,數(shù)值越大試驗(yàn)的可靠性越差[29].本試驗(yàn)?zāi)P湍軌驕?zhǔn)確分析和預(yù)測脂肪替代物配方對低脂復(fù)合牛雜肉餅的感官評分值的影響,預(yù)測值與試驗(yàn)值具有很高的相關(guān)度[30-31].最終制得產(chǎn)品水分含量高,蛋白含量高,粗脂肪含量低,比對照組營養(yǎng)更豐富.這可能是脂肪替代物中SPI能提高牛肉餅蛋白含量,卡拉膠的雙螺旋結(jié)構(gòu)、TG酶與SPI共同作用能增加保水性[16,26],同時(shí)這些脂肪替代物還能改善肉餅的彈性與回復(fù)性,并對最終制品的色度也會產(chǎn)生影響.脂肪替代物一定程度上改善了復(fù)合牛雜肉餅的品質(zhì),降低了成本.
低脂復(fù)合牛雜肉餅更符合現(xiàn)代人對健康飲食的需求,根據(jù)單因素試驗(yàn)與Box-Behnken響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)得出:淀粉添加量3.18%,卡拉膠添加量0.65%,SPI添加量1.48%,TG酶添加量0.64%時(shí)感官評分預(yù)最好.在此條件下制得的低脂復(fù)合牛雜肉餅產(chǎn)品品質(zhì)最好,蛋白含量較高,脂肪含量低,彈性、回復(fù)性好,出品率高.與傳統(tǒng)牛肉餅相比,低脂復(fù)合牛雜肉餅營養(yǎng)價(jià)值更高,是一種有利于人體健康的牛副產(chǎn)物新產(chǎn)品.