快速檢測方法在食品微生物檢測中的應(yīng)用

秦順順 劉方超 張錦陽

青島譜尼測試有限公司 山東青島 266000

現(xiàn)階段很多快速檢測方法都應(yīng)用于食品微生物檢測過程中，其中就有：代謝學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)、傳感器檢測法等。這些檢測技術(shù)均可以在較短的時間內(nèi)完成食品微生物檢測工作，而且準(zhǔn)確度較高。因此在進(jìn)行食品微生物檢測時，檢測人員要結(jié)合實際情況科學(xué)的選擇檢測方法，從而提高食品安全質(zhì)量，為人們身體健康提供基礎(chǔ)保障。

1 快速檢測方法應(yīng)用于食品微生物檢測的意義

經(jīng)濟發(fā)展帶動了我國的食品需求，這種需求促進(jìn)了我國食品行業(yè)的發(fā)展速度，繁多的食品加工種類加大了食品檢測的難度。因為經(jīng)濟發(fā)展速度快使得我國現(xiàn)階段的食品檢測標(biāo)準(zhǔn)還有許多漏洞，美食多樣化的發(fā)展和全球化的擴展速度加大了食品安全檢測的壓力，在食品的生產(chǎn)過程中和加工過程中，食品加工企業(yè)為了延長食品的保質(zhì)期會加大化學(xué)添加劑的使用劑量，含有過多添加劑的食品被人們食用后有諸多危害，輕則引發(fā)食物中毒或者各種疾病，重則危及人們生命。傳統(tǒng)的顯微鏡檢測不僅會產(chǎn)生檢測漏洞使得被微生物污染的食物流向市場危害人們身體，而且顯微鏡檢測的效率較慢，不僅檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度低，而且檢測人員的工作量較大[1]。正是因為傳統(tǒng)的顯微鏡檢測技術(shù)的弊端太過明顯，所以促進(jìn)了快速檢測技術(shù)在食品微生物檢測中的應(yīng)用。使用快速監(jiān)測技術(shù)在提高被檢測食品的安全性的前提下，減少了檢測人員的工作量。

2 快速檢測方法應(yīng)用于食品微生物檢測的優(yōu)點

2.1 檢測結(jié)果更科學(xué)

應(yīng)用快速檢測方法檢測食品微生物能夠同時進(jìn)行“接種”和“取樣”這兩項工作，這樣的檢測流程不僅避免了傳統(tǒng)檢測技術(shù)需要進(jìn)行較長時間的細(xì)菌繁殖工作，而且因為檢測工作的迅速性和檢測工作的流暢性減少了傳統(tǒng)檢測方式因檢測過程的原因產(chǎn)生的數(shù)據(jù)誤差率，使得食品微生物檢測的具體結(jié)果更加科學(xué)?？茖W(xué)的檢測數(shù)據(jù)為食品安全提供了基礎(chǔ)的數(shù)據(jù)保證。

2.2 檢測速度更迅速

因為快速檢測技術(shù)有先進(jìn)的技術(shù)支持和精密的儀器支持，所以使用快速檢測方法進(jìn)行食品微生物檢測的結(jié)果比傳統(tǒng)顯微鏡檢測的結(jié)果速度更快，在結(jié)束快速檢測方法檢測食品微生物后，檢測產(chǎn)生的廢渣和廢液比傳統(tǒng)檢測技術(shù)少，不僅能夠減輕大量的食品微生物監(jiān)測后的廢渣廢液帶來的環(huán)境污染。而且較少的器皿清洗也減輕了食品微生物檢測工作人員的日常工作量，進(jìn)一步提高食品微生物的監(jiān)測工作效率。

3 快速檢測技術(shù)類型及其在食品檢測中的應(yīng)用

3.1 免疫學(xué)技術(shù)

（1）酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)。將已知抗原或抗體吸附在聚苯乙烯微量反應(yīng)板或其他固相載體的表面，使酶標(biāo)記過的抗原抗體在聚苯乙烯微量反應(yīng)板或其他固相載體的表面進(jìn)行充分反應(yīng)，之后將液體中的游離成分進(jìn)行洗滌清除，這就是快速檢驗法中常用的ELISA（酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)）技術(shù)的基本實驗方法。在此項實驗中常用的試驗方法有雙抗體夾心法和間接法，雙抗體夾心法常用于檢測大分子抗原，間接法闖勇于檢測特異抗體。因為ELISA技術(shù)在現(xiàn)代微生物檢測中的廣泛應(yīng)用，其靈敏性強、檢測速度快的優(yōu)點在應(yīng)用中得以充分發(fā)揮[2]。

（2）免疫層析技術(shù)。把檢測樣品放置到條狀纖維膜上使其涌動，通過層析和免疫反應(yīng)的雙重作用使得檢測樣品在含有配體的纖維膜上顯現(xiàn)，然后通過著色標(biāo)記其中蘊含的微生物進(jìn)行分析，這就是Immuno chromatography（免疫層析技術(shù)）技術(shù)的監(jiān)測方式，作為免疫學(xué)技術(shù)的基礎(chǔ)技術(shù)，Immuno chromatography技術(shù)在食品微生物檢測過程中應(yīng)用廣泛。檢測員通過免疫層析技術(shù)可以測定被檢測食物樣本中的Listeria monocytogenes（李斯特菌），方法是在檢測過程中使用掃描儀器對試紙條中的T線、C線等光密度值進(jìn)行掃描，10min就可完成測定工作，測定限為：0.35×106-0.35×109CFU/ml。免疫層析技術(shù)的檢驗效率較高，所需時間少，在食品檢驗工作中應(yīng)用較為廣泛。

3.2 分子生物學(xué)檢測法

隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，分子生物學(xué)技術(shù)也逐漸被應(yīng)用于食品微生物檢測中。分子生物學(xué)的基因芯片技術(shù)在食品微生物檢測過程中的應(yīng)用效果比較明顯，其主要對特異性微生物的檢測效果較好。在應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù)檢測食品微生物之前，檢測人員首先要進(jìn)行芯片點樣中的寡核苷酸的提取，提取成功后進(jìn)行DNA的擴列，其次對實際檢測中的微生物進(jìn)行熒光標(biāo)記，最后以試驗標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)進(jìn)行數(shù)據(jù)融合。做完準(zhǔn)備工作后在進(jìn)行檢測就會得出食品樣本中的微生物檢測結(jié)果，通過分析對比后就可知道食品合格與否，從根源上杜絕不合格食品流入市場威脅人們身體健康[3]。

3.3 傳感器檢測方法

（1）基因傳感器法。將一個已知核苷酸序列的DNA分子單鏈固定在傳感器上，并使之與另一條相關(guān)DNA單鏈雜交，形成一條新的雙鏈DNA，從而實現(xiàn)物理信號的準(zhǔn)備表達(dá)?；騻鞲衅骶邆潇`敏性較強及操作簡單方便等優(yōu)勢，值得在食品微生物檢測方面廣泛應(yīng)用。當(dāng)前，我國存在多樣化的基因傳感器，但最為常見和普及的是石英晶體振蕩器和電極電化學(xué)式基因傳感器。

（2）生物傳感器。通過將被測物質(zhì)放置于生物傳感器的敏感材料上，能夠有效實現(xiàn)食品微生物的檢測，并產(chǎn)生一系列的化學(xué)反應(yīng)現(xiàn)象，如離子強度改變、顏色改變以及強烈信號發(fā)出等。生物傳感器的優(yōu)勢在于具有較高的靈敏度，在檢測食品中的大腸桿菌和金黃色葡萄球菌等微生物含量方面具有重要作用。但若想獲得更好的檢測效果，則應(yīng)選擇酶免疫電流型生物傳感器，可保證食品檢測的科學(xué)性，從而確保食品安全。

4 結(jié)語

綜上所述，食品關(guān)乎人民生命健康的安全，逐漸成為社會關(guān)注的焦點。傳統(tǒng)的食物微生物檢測方法存在周期長和資金投入大等劣勢，不利于食品的快速檢測。而色譜法、傳感器法、免疫學(xué)法等方法的應(yīng)用能夠有效縮短檢測時間，提高檢測精度，對保障食品安全以及促進(jìn)社會和諧穩(wěn)定發(fā)展具有積極意義。