成永婧
通標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)(上海)有限公司 上海 200233
藥物分析是涉及許多方面的,比如化學(xué)與藥物化學(xué)技術(shù),其中進(jìn)行藥物分析最普遍的手段是光化學(xué)分析法,對(duì)藥物進(jìn)行色譜分析、電化學(xué)分析。在進(jìn)行光化學(xué)分析過(guò)程中,又包含熒光分析法,原子吸收光譜分析法發(fā)等不同方法。在實(shí)際的分析過(guò)程中,使用光化學(xué)分析具有很多優(yōu)勢(shì),能夠提高分析的靈敏度,使檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確。本文將通過(guò)調(diào)查研究,總結(jié)熒光分析法在藥物分析中的使用方法以及發(fā)展前景,促進(jìn)熒光分析法的不斷進(jìn)步和發(fā)展[1]。
膠束增敏熒光法指在溶液當(dāng)中,更好的融合表面活性物質(zhì)和熒光分子,是熒光分析法中最常見(jiàn)的方法之一,具有增加靈敏度和穩(wěn)定性的優(yōu)勢(shì)。主要操作方法為:首先要對(duì)藥物進(jìn)行表面溫度與電荷的檢測(cè),根據(jù)藥物的主觀和客觀分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析,同時(shí)結(jié)合微觀環(huán)境總結(jié)能夠促進(jìn)膠束形成造成熒光分子非輻射速率降低的特點(diǎn),在速率降低的過(guò)程中,速度量保持不變,而量子效率逐漸增加。通過(guò)分析藥物的客觀成分,在膠束外的各種行動(dòng)受到限制,比如吸附、穿入。在對(duì)藥物進(jìn)行分析的過(guò)程中,使用熒光分析法,操作簡(jiǎn)單,靈敏度較高,進(jìn)行研究過(guò)程中,對(duì)氟羅沙星藥物進(jìn)行含量檢測(cè)分析,能夠進(jìn)一步體現(xiàn)該藥物的價(jià)值和作用[2]。
該方法需要配合表面活性劑進(jìn)行分析,將兩種不相容的溶液更好地進(jìn)行混合,其中溶劑量較小的會(huì)被溶劑量較大的包圍起來(lái),稱(chēng)之為“微泡”。在微泡中能夠提供更好的生長(zhǎng)環(huán)境,促進(jìn)溶劑的凝結(jié),最終形成納米級(jí)別的凝聚體。在進(jìn)行熒光分析的過(guò)程中,通過(guò)使用反相膠束的方法,方便快捷,準(zhǔn)確度高,檢測(cè)范圍廣,具有很多優(yōu)勢(shì),能夠有效提高物質(zhì)的濃度,保障熒光的強(qiáng)度。由于操作簡(jiǎn)單,在一定程度上降低了分析成本。有學(xué)者通過(guò)試驗(yàn)得出結(jié)論,反相膠束內(nèi)所含物質(zhì)丁二酸雙酯磺酸鈉/正辛烷熒光體系對(duì) 2,3-二氨基吩嗪(DAP)熒光具有一定的增敏能力,進(jìn)一步提高了敏感程度,更好地對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè)工作,發(fā)揮了熒光分析法的價(jià)值。
熒光光譜儀分析法屬于熒光分析技術(shù)中的一部分,它能夠有效清除背景的干擾,簡(jiǎn)化處理流程,不需要將樣品分離就可以進(jìn)行測(cè)定和分析,具有較高的靈敏度和選擇性。主要包含的內(nèi)容有可變角法、恒波長(zhǎng)法、恒能量法等不同分析技術(shù)。本文通過(guò)對(duì)恒波長(zhǎng)法進(jìn)行具體研究,該方法通過(guò)使用掃描儀檢測(cè)藥物內(nèi)部的發(fā)射波長(zhǎng)與激發(fā)波長(zhǎng),從而確定波長(zhǎng)距離,更好地掌握藥物內(nèi)的成分信息。為了更好地保障藥物分析時(shí)的準(zhǔn)確性和合理性,必須制定科學(xué)的波長(zhǎng)間距,符合藥物的要求,防止在檢測(cè)過(guò)程中受到信號(hào)的影響,導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果不準(zhǔn)確[3]。
在進(jìn)行熒光分析的過(guò)程中,還需要結(jié)合許多先進(jìn)的儀器進(jìn)行藥物的分析。隨著聯(lián)合應(yīng)用技術(shù)的不斷增多,逐漸出現(xiàn)了流動(dòng)性的注射熒光分析法。通過(guò)結(jié)合先進(jìn)的熒光分析技術(shù),以及液相、薄層色譜等技術(shù)手段共同對(duì)藥物的成分信息進(jìn)行研究和分析,相對(duì)于傳統(tǒng)的熒光分析方法,技術(shù)性更強(qiáng),研究結(jié)果更加可靠,能夠方便快捷的檢測(cè)出結(jié)果,從而促進(jìn)了藥物分析技術(shù)的不斷發(fā)展[4]。
進(jìn)行藥物分析過(guò)程中,常常會(huì)采用色譜連用的方法,能夠更好地對(duì)臨床藥物進(jìn)行檢驗(yàn)與鑒定。色譜聯(lián)用的主要使用方法是:直接檢測(cè)和間接檢測(cè)。在進(jìn)行藥物檢測(cè)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn),大部分樣品中所含的藥物比例少于實(shí)際藥品,因此,無(wú)法更好地滿(mǎn)足藥物檢測(cè)的需求。同時(shí)在藥物中幾乎不含有生色基因,因此降低了藥物檢測(cè)的靈敏性。為了更好地解決該問(wèn)題,可以利用衍生藥物,吸收紫外線(xiàn)的方法,最后再通過(guò)色譜分離的方法,得到所需要的物質(zhì)信息。通過(guò)間接的檢測(cè)能夠改變傳統(tǒng)直接檢測(cè)方案的缺點(diǎn),提高檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性[5]。
熒光猝滅能夠在原子核外電子產(chǎn)生非輻射現(xiàn)象時(shí),釋放能量,有效減少熒光程度,通過(guò)調(diào)查發(fā)現(xiàn),該方法在藥物檢測(cè)過(guò)程中得到了大量的應(yīng)用,具有一定的優(yōu)勢(shì)。對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程中,可以通過(guò)熒光猝滅分析法分析藥物的濃度于熒光強(qiáng)度大線(xiàn)性關(guān)系,提高藥物檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性。有學(xué)者通過(guò)調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)二氫槲皮素和二氫楊梅素與牛血清白蛋白能夠更好地融合,并產(chǎn)生強(qiáng)烈的反應(yīng),通過(guò)使用熒光猝滅分析法,提出疏水作用力的概念,進(jìn)一步促進(jìn)了兩種物質(zhì)的融合與反應(yīng)。劉佑成等學(xué)者通過(guò)實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)在氨水-氯化銨緩沖條件下,牛血紅蛋白的熒光強(qiáng)度不斷增強(qiáng),因此可以認(rèn)為丙二醛能夠更好地進(jìn)行猝滅,并達(dá)到了良好的效果。
化學(xué)計(jì)量方法需要結(jié)合多種學(xué)科進(jìn)行研究,包括數(shù)學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、計(jì)算機(jī)技術(shù),是當(dāng)今時(shí)代比較先進(jìn)的學(xué)科。作為學(xué)科的基礎(chǔ)學(xué)習(xí)內(nèi)容,要求能夠進(jìn)行相關(guān)檢測(cè)試驗(yàn),在實(shí)踐中總結(jié)理論知識(shí)和經(jīng)驗(yàn),要求同學(xué)能夠更好地對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理和分析,保障所學(xué)知識(shí)能夠更好地應(yīng)用在藥物檢測(cè)工作當(dāng)中。在進(jìn)行熒光分析的過(guò)程中,容易受到很多因素的影響,從而影響檢測(cè)結(jié)果,比較常見(jiàn)的影響因素是散射光,因此只能進(jìn)行單一樣品的分析。而通過(guò)引入化學(xué)計(jì)量學(xué)方法,能夠更好地將所需物質(zhì)通過(guò)先進(jìn)的系統(tǒng)和技術(shù)進(jìn)行分離,進(jìn)一步提高了熒光分析的效果,解決了散射光的影響問(wèn)題。在對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程中,采用了熒光分析法,并結(jié)合了化學(xué)計(jì)量學(xué)中的相關(guān)知識(shí),對(duì)人體血清和尿液中的兩種非甾體抗炎藥即萘普生和二氟尼柳進(jìn)行檢測(cè),具有較好的檢測(cè)效果。
近些年,越來(lái)越多的學(xué)者關(guān)注對(duì)藥物的分析,其中大部分關(guān)注的是對(duì)發(fā)光體系的研究,此類(lèi)研究與藥物的熒光強(qiáng)弱程度和有無(wú)熒光沒(méi)有關(guān)聯(lián),在實(shí)際的藥物檢測(cè)分析過(guò)程中,通過(guò)相應(yīng)的化學(xué)反應(yīng)將非熒光物質(zhì)轉(zhuǎn)化為熒光物質(zhì),然后再對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行分析。比如在進(jìn)行分析過(guò)程中,會(huì)使用到熒光增強(qiáng)劑,因此,加大了對(duì)熒光增強(qiáng)劑的研究和使用。同時(shí),在對(duì)藥物進(jìn)行熒光分析的過(guò)程中,比較關(guān)注藥物檢測(cè)的靈敏度與準(zhǔn)確度,因此對(duì)同步熒光、三維熒光、雙體系雙波長(zhǎng)熒光的特點(diǎn)進(jìn)行了總結(jié)分析,研究在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中各自的特點(diǎn)以及檢測(cè)的水平,進(jìn)一步提高熒光分析法的特異性與選擇性,促進(jìn)檢測(cè)藥物技術(shù)的不斷發(fā)展。通過(guò)調(diào)查三維熒光分析法可以發(fā)現(xiàn),在傳統(tǒng)的熒光分析法中所獲取的信息為二維光譜,熒光強(qiáng)度會(huì)隨著光譜的變化而改變,具有一定的靈敏性,然而在檢測(cè)分析過(guò)程中發(fā)現(xiàn),必須對(duì)熒光光譜中的激發(fā)波長(zhǎng)與發(fā)射波長(zhǎng)共同進(jìn)行研究,同時(shí)考慮二者的影響,并對(duì)函數(shù)變化進(jìn)行分析。而在三維熒光,分析法當(dāng)中,熒光強(qiáng)度、激發(fā)波長(zhǎng)、發(fā)射波長(zhǎng),同時(shí)在圖譜分析中展現(xiàn),能夠更加清晰地發(fā)現(xiàn)三者的變量關(guān)系,具有很大的優(yōu)勢(shì)。因此,三維熒光分析法又稱(chēng)為三維熒光光譜或熒光總發(fā)光光譜。
在進(jìn)行藥物分析的過(guò)程中,采用熒光分析法具有很多的優(yōu)勢(shì),操作簡(jiǎn)單,易于上手,同時(shí)具有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度,在藥物分析中,具有較強(qiáng)的經(jīng)濟(jì)優(yōu)勢(shì),因此近些年越來(lái)越多的學(xué)者加大了對(duì)熒光分析法的研究,熒光分析法也在應(yīng)用中不斷創(chuàng)新和發(fā)展,更好地滿(mǎn)足當(dāng)今藥物分析的需求。調(diào)查研究發(fā)現(xiàn),在熒光分析法不斷優(yōu)化創(chuàng)新的過(guò)程中,應(yīng)該更加關(guān)注膠束體的研究,進(jìn)一步增強(qiáng)藥物內(nèi)部的熒光強(qiáng)度,更好地對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè),同時(shí)根據(jù)熒光探針原理以及其他先進(jìn)的檢測(cè)手段,進(jìn)一步促進(jìn)對(duì)藥物的研究和分析,提高了熒光分析法技術(shù)手段。
綜上所述,隨著社會(huì)與科技的不斷進(jìn)步和發(fā)展,在對(duì)藥物進(jìn)行檢測(cè)過(guò)程中逐漸引入了熒光分析法,能夠更好地符合當(dāng)今藥物分析的需求。熒光分析法也在應(yīng)用中不斷創(chuàng)新和發(fā)展,提高了對(duì)藥物檢測(cè)的靈敏度和準(zhǔn)確性,進(jìn)一步保障了對(duì)藥物的檢測(cè)工作,同時(shí),在檢測(cè)分析過(guò)程中融合計(jì)算機(jī)技術(shù),進(jìn)一步保障熒光分析工作的自動(dòng)化與智能化發(fā)展,推動(dòng)整個(gè)生物化學(xué)領(lǐng)域的不斷發(fā)展,具有較好的發(fā)展前景。