糾正Th1/Th2遷移對過敏性紫癜腎炎的預后影響*

魏向陽，葛 凱，朱 銳，洪 澤

(1.南京中醫(yī)藥大學沭陽附屬醫(yī)院兒科，江蘇宿遷 223600；2.江蘇省淮安市第一人民醫(yī)院兒科，江蘇淮安 223001)

過敏性紫癜主要是由于藥物作用或病原體感染機體等原因造成體內出現(xiàn)循環(huán)免疫復合物，其通常沉積于真皮上層毛細血管，侵犯皮膚或其他器官中的細小動脈進而造成過敏性血管炎[1]。臨床上多發(fā)于兒科，常出現(xiàn)皮膚淤斑并累及腎，對患兒的生長發(fā)育較為不利[2]。目前對于過敏性紫癜的發(fā)病機制尚未明確，但眾多數(shù)據(jù)稱過敏性紫癜是一種由免疫復合物介導的系統(tǒng)性血管炎[3-4]。過敏性紫癜腎炎患兒在急性期病程中，體內存在明顯的Th1/Th2免疫應答失衡，白細胞介素(IL)-6、IL-5及IL-4是屬于Th2類細胞因子，常出現(xiàn)水平明顯增高，Th2的特異膜蛋白分子CD30表達水平也增高，Th1類細胞因子IL-2等分泌減少[5]。因此，對過敏性紫癜腎炎患兒進行早期的干預治療，有利于遏制疾病向終末期腎病及尿毒癥的進展，以減少患兒腎臟受累而改變預后，在臨床上具有十分重要的意義，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月至2019年1月南京中醫(yī)藥大學沭陽附屬醫(yī)院兒科收治的104例過敏性紫癜腎炎患兒，依據(jù)隨機數(shù)表法將所有患兒分為對照組及觀察組，每組患兒52例，2組患兒性別、年齡、體質量等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表1。

1.2納入標準 (1)所有患兒均符合《小兒腎臟病基礎與臨床》關于小兒過敏性紫癜腎炎的相關診斷標準[6]；(2)在過敏性紫癜病程180 d內出現(xiàn)蛋白尿或血尿。血尿診斷標準：肉眼血尿或1周內3次鏡下血尿，尿紅細胞≥3個/高倍視野。蛋白尿診斷標準：1周內出現(xiàn)3次尿常規(guī)定性蛋白陽性；24 h尿蛋白量在150 mg以上；1周內出現(xiàn)3次尿微量蛋白在正常范圍以上[7]。

表1 2組患兒一般資料比較

1.3排除標準 (1)入院前接受過激素藥物；(2)使用了免疫調節(jié)劑；(3)原發(fā)性免疫功能缺陷患兒；(4)系統(tǒng)性紅斑狼瘡。

1.4研究方法

1.4.1治療方法 2組患兒均進行常規(guī)治療，包括潑尼松、雙嘧達莫、鈣劑、抗感染、腎炎康復片等治療，其中潑尼松1～2 mg/(kg·d)，晨起頓服，4周后依據(jù)尿常規(guī)的變化情況減少用藥劑量至療程3個月停藥。觀察組在此基礎上加服增強免疫力營養(yǎng)補充劑及雷公藤多苷[1 mg/(kg·d)分3次口服]，3個療程(3個月)后根據(jù)臨床療效調整劑量。

1.4.2治療療效 2組患兒治療3個月后參照《臨床醫(yī)學》對治療療效進行評估[8]。無效：指患兒臨床表現(xiàn)及實驗室檢查均未改善甚至加重；好轉：患兒服藥治療后，全身癥狀減輕且實驗室指標改善，肉眼血尿消失，鏡檢出現(xiàn)好轉，尿蛋白減少至(+)或微量；治愈：服藥后實驗室檢查正常，無其他伴隨癥狀，紫癜全部消退，僅留有色素沉著，15 d內無復發(fā)。有效率=(好轉例數(shù)+治愈例數(shù))/總例數(shù)×100%。

1.4.3Th1/Th2細胞因子水平測定 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定 Th1/Th2細胞因子[干擾素(IFN)-γ、IL-4及IL-6]水平，ELISA試劑盒購自江西塞基生物技術有限公司，按照ELISA試劑盒的說明書進行具體操作。在酶標儀的第1個孔內加入不同濃度但同劑量的樣品及標準品，酶標儀各孔加蓋，在37 ℃的溫度下放置90 min后，取出酶標板，垂直倒出酶標孔內液體，吸水紙對儀器進行清理，將相應抗體加入每個酶標孔中，在37 ℃下放置60 min。使用磷酸鹽緩沖液(PBS)洗滌酶標孔，連續(xù)操作3次，并在每個孔內加入ABC工作液，在37 ℃下放置30 min后，使用PBS再次洗滌，連續(xù)操作5次，在暗室內，TMB顯色液加入至每孔中，在37 ℃避光條件下放置25 min后，加入TMV終止液，使用美國BD公司FACS CantoⅡ雙激光六色流式細胞儀測定IFN-γ水平。同種操作方法測定IL-4及IL-6的水平。

1.4.4白細胞計數(shù)、中性粒細胞、血小板計數(shù)及C反應蛋白水平測定 對所有患兒抽取外周靜脈血，使用德國羅氏公司Cobas 8000全自動蛋白分析儀測定C反應蛋白，使用Sysmex XN9000全自動血細胞分析儀測定白細胞、中性粒細胞百分比、血小板，并對比分析腎炎組患兒治療前后白細胞計數(shù)、中性粒細胞、血小板計數(shù)及C反應蛋白水平變化。

2 結 果

2.12組患兒血漿IFN-γ、IL-4、 IFN-γ/IL-4及IL-6水平比較 2組患兒治療前IFN-γ、IL-4、 IFN-γ/IL-4及IL-6水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；觀察組及對照組治療后IFN-γ及IFN-γ/IL-4水平高于治療前，IL-4及IL-6水平低于治療前(P<0.05)；觀察組患兒治療后IFN-γ及IFN-γ/IL-4水平高于對照組，IL-4及IL-6水平低于對照組(P<0.05)。見表2。

2.22組患兒白細胞計數(shù)、中性粒細胞、血小板計數(shù)及C反應蛋白水平比較 2組患兒治療前白細胞、中性粒細胞、血小板及C反應蛋白水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；2組患兒治療后白細胞計數(shù)、中性粒細胞、血小板計數(shù)及C反應蛋白水平均低于治療前，觀察組患兒治療后后白細胞、中性粒細胞、血小板及C反應蛋白水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表3。

表2 2組患兒血漿IFN-γ、IL-4、 IFN-γ/IL-4及IL-6水平比較

表3 2組患兒白細胞計數(shù)、中性粒細胞、血小板計數(shù)及C反應蛋白水平比較

2.32組患兒臨床療效比較 觀察組及對照組治療總有效率比較，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=4.981，P=0.026)。見表4。

表4 2組患兒臨床療效比較

3 討 論

過敏性紫癜是一種多發(fā)于兒童的疾病，主要分為單純型、腹型、腎型及關節(jié)型。單純型主要是與皮膚有關，病變程度相對較低；腹型多表現(xiàn)為腹痛，疼痛部位多發(fā)于臍周及腹部等，常伴有惡心嘔吐等胃腸道不良反應[9-10]；腎型的臨床表現(xiàn)多為蛋白尿及腎損傷等；關節(jié)型累及膝、踝、指、肘等關節(jié)，關節(jié)出現(xiàn)疼痛或腫脹等臨床表現(xiàn)[11]。有研究表明，Th1/Th2平衡打破、體液免疫功能紊亂、凝血異常及纖溶紊亂與過敏性紫癜存在一定關系[15]。過敏性紫癜繼發(fā)的腎臟損傷稱為過敏性紫癜腎炎，隨著臨床檢查技術的發(fā)展，腎臟穿刺活檢使得過敏性紫癜腎炎的檢出率也越來越高[12]。大量的臨床實踐表明，腎臟受累的程度是影響患兒臨床癥狀及預后的主要因素。

有研究學者將輔助T細胞分類為Th1細胞及Th2細胞，其中Th1細胞主要分泌IFN-γ，IFN-γ能有效對抗機體細胞內病原體；Th2細胞主要分泌IL-5，IL-5能有效地促進免疫蛋白的合成，從而與機體細胞外病原體形成對抗[13-14]。本研究發(fā)現(xiàn)，當Th1細胞功能出現(xiàn)異常時，Th1細胞對Th2細胞的拮抗作用減弱，Th2細胞功能出現(xiàn)亢進，這種相輔相成且有相互拮抗的作用，導致過敏性反應的可能性較高。因此，糾正Th1細胞及Th2細胞的失衡是治療過敏性紫癜腎炎的關鍵。本研究顯示，治療后觀察組患兒IFN-γ及IFN-γ/IL-4水平高于對照組，IL-4及IL-6水平低于對照組，提示對過敏性紫癜腎炎患兒進行糾正Th1/Th2遷移治療，可糾正患兒體內Th1/Th2失衡，IL-4、IL-6及IFN-γ水平得到相應的調節(jié)，IL-4水平因機體對其的抵抗作用出現(xiàn)減弱，觀察組患兒在常規(guī)治療的基礎上進行了增強免疫力營養(yǎng)補充劑及雷公藤多苷治療，營養(yǎng)補充劑能有效地增強機體的免疫能力，一定程度上也增加了機體的免疫應答能力，并使機體對免疫復合物的清除能力得到提高，且巨噬細胞對細菌的吞噬能力也隨之增強，進而減少患兒腎臟損傷并保護了腎臟功能。激素類藥物有抗炎及抑制免疫的作用，有研究數(shù)據(jù)表明，雷公藤多苷能加強抗炎作用，有效減少激素的用量，縮短用藥時間，減少不良反應情況等[15]。本研究表明，雷公藤多苷對Th1/Th2細胞因子的抑制作用更強。本研究顯示，觀察組治療后患兒外周血中性粒細胞絕對值、白細胞計數(shù)、C反應蛋白及血小板計數(shù)均高于對照組(P<0.05)，表明過敏性紫癜腎炎患兒的發(fā)病與感染具有密切關系。機體受到感染時，病原微生物抗原與體內IgA結合，形成IgA免疫復合物，造成患兒出現(xiàn)多發(fā)性小血管炎癥病變，IgA免疫復合物主要沉積于全身小血管內皮細胞中[16]。IgA常在腎臟免疫復合中產生沉淀，而患兒出現(xiàn)腎臟受損的主要時間多數(shù)在過敏性紫癜發(fā)病后的4～6周內，此時間段是機體內免疫復合物沉積高發(fā)時間段，故應對患兒進行及時合理的治療，以減少腎損傷的發(fā)生。

綜上所述，對過敏性紫癜腎炎患兒及早糾正Th1/Th2失衡，主要是通過Th1及Th2遷移治療而達到治療效果。