李艷艷，唐炎，黃陳，徐向萍，嚴(yán)兆龍，楊海峰

（1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院，江蘇泰州25300；2.江蘇省淮安市金湖縣呂良中心畜牧獸醫(yī)站，江蘇金湖211600）

雞的多種易感傳染病一直威脅著養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展，尤其是新城疫、傳染性法氏囊炎、禽流感等，死亡率高且無(wú)特效藥，只能依靠接種疫苗來(lái)預(yù)防疾病的發(fā)生。而免疫接種常常因?yàn)橐呙缳|(zhì)量問(wèn)題、個(gè)體免疫力低等多種原因?qū)е率?。近年?lái)，中藥多糖作為免疫增強(qiáng)劑已成為中外研究者的研究熱點(diǎn)。中藥多糖是指從動(dòng)物、植物和微生物中分離出的活性多糖成分的總稱。研究表明，中藥多糖具有抗菌、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化、降血糖等作用，其中絕大多數(shù)中藥多糖都具有免疫增強(qiáng)的藥理作用，另外，中藥多糖具有綠色環(huán)保、安全無(wú)毒的特點(diǎn)，因此將中藥多糖用于雞的免疫增強(qiáng)劑，對(duì)于提高疫苗效價(jià)、調(diào)節(jié)動(dòng)物免疫應(yīng)答、增強(qiáng)細(xì)胞免疫與體液免疫等方面具有十分重大的意義。本文主要針對(duì)近年來(lái)常見(jiàn)中藥多糖對(duì)雞免疫功能的增強(qiáng)作用的研究作一綜述。

1 中藥多糖對(duì)免疫器官發(fā)育的影響

免疫器官是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)各種免疫細(xì)胞生成、分化成熟、增殖以及產(chǎn)生免疫反應(yīng)的主要場(chǎng)所，因此機(jī)體的免疫功能決定于免疫器官的發(fā)育狀況,而衡量免疫器官狀況的初步指標(biāo)是免疫器官指數(shù)。雞的中樞免疫器官有胸腺和法氏囊，外周免疫器官有脾臟。研究表明，中藥多糖能夠促進(jìn)正?；蛎庖吡Φ拖聞?dòng)物免疫器官的發(fā)育，從而提高機(jī)體的免疫力。邱妍等[1]研究表明，板藍(lán)根多糖能促進(jìn)雞胸腺、脾、法氏囊的發(fā)育,使免疫器官相對(duì)質(zhì)量明顯增加，而板藍(lán)根多糖低劑量組的免疫器官指數(shù)也普遍高于高劑量組，而且低劑量組的脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)還呈現(xiàn)升高趨勢(shì)，說(shuō)明低劑量的板藍(lán)根多糖有延緩免疫器官萎縮的作用。張燕等[2]從組織學(xué)角度研究了白毛藤多糖對(duì)雞免疫器官的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，白毛藤多糖對(duì)免疫器官發(fā)育有明顯的促進(jìn)作用，但不隨多糖劑量的增加而增加。Fu Chunyan等[3]進(jìn)行的試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)中藥白薇能明顯增加肉雞的法氏囊指數(shù)。陳義娟等[4]研究了金銀花和木香組成的復(fù)合中草藥添加劑對(duì)黃羽肉雞免疫器官指數(shù)的影響，結(jié)果表明，4個(gè)處理組的黃羽肉雞脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)均明顯高于對(duì)照組。雷莉輝等[5]研究表明，在肉仔雞的日糧中添加不同劑量的香菇多糖，肉仔雞的免疫器官指數(shù)均顯著高于對(duì)照組。方磊涵等[6]研究結(jié)果表明，中藥復(fù)方多糖3個(gè)劑量組的胸腺指數(shù)與對(duì)照組差異顯著或極顯著，試驗(yàn)Ⅲ、Ⅳ組的腔上囊指數(shù)明顯高于對(duì)照組。汪雯翰等[7]分別用添加0.01%和0.04%金針菇實(shí)子多糖的飼料飼喂5日齡白羽肉雞30 d，添加量為0.01%處理中成雞的脾臟、胸腺和法氏囊指數(shù)比正常對(duì)照組分別提高了30.6%、24.5%和15.0%。

2 中藥多糖對(duì)細(xì)胞免疫功能的影響

T淋巴細(xì)胞通常介導(dǎo)機(jī)體細(xì)胞免疫的產(chǎn)生，是最重要的免疫細(xì)胞，雞的淋巴細(xì)胞成熟于脾臟中，在機(jī)體的免疫過(guò)程中起著重要作用。尹瑞卿等[8]將5種濃度的枸杞多糖加入肉仔雞外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中培養(yǎng)48h，結(jié)果顯示，添加不同水平枸杞多糖均可顯著促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞增殖,促進(jìn)T、B淋巴細(xì)胞增殖的最適添加水平分別為1600μg/mL和100μg/mL。Fan Y等[9]用中藥復(fù)合多糖與新城疫疫苗和禽流感疫苗對(duì)雞進(jìn)行臨床試驗(yàn)，觀察到雞的新城疫和禽流感抗體滴度提高，并且淋巴細(xì)胞增殖增加，因此，適量的復(fù)合中藥多糖可能是一種安全有效的免疫刺激劑。王宏軍等[10]研究表明，皮下注射10～20 mg/kg貴州南五味子多糖可顯著促進(jìn)雞外周血T淋巴細(xì)胞增殖。劉晴雪[11]等的研究表明，水溶性苜蓿多糖實(shí)驗(yàn)組能夠顯著提高肉仔雞免疫器官指數(shù)，促進(jìn)外周血T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞增殖，水溶性苜蓿多糖添加量為200mg/kg和500mg/kg可達(dá)到較好的生長(zhǎng)及免疫效果。Wang DY等[12]研究結(jié)果顯示黃芪多糖和板藍(lán)根多糖低劑量和山藥多糖高劑量均能顯著提高雞外周血新城疫抗體滴度和CD4+與CD8+的比值。邱妍[13]等研究表明，黃芩多糖能顯著增強(qiáng)雛雞特異性免疫應(yīng)答反應(yīng)，能延長(zhǎng)較高的抗體維持時(shí)間，提高新城疫疫苗的免疫效力，同時(shí)黃芪多糖也能促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖，增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體細(xì)胞免疫。

3 中藥多糖對(duì)體液免疫功能的影響

機(jī)體的體液免疫是通過(guò)B淋巴細(xì)胞增殖分化為漿細(xì)胞，進(jìn)而產(chǎn)生抗體來(lái)完成免疫應(yīng)答的過(guò)程。機(jī)體血清中抗體含量是評(píng)估其體液免疫狀況的關(guān)鍵指標(biāo)，大多數(shù)的多糖不但可以增加B淋巴細(xì)胞的數(shù)量，還能促進(jìn)細(xì)胞抗體生成的總量。張忠杰等[14]把黃芪多糖作為疫苗佐劑從而提高了雞新城疫抗體效價(jià)。Guo F等[15]皮下注射不同劑量的泰山刺槐多糖，結(jié)果顯示任何劑量的泰山刺槐多糖均可顯著促進(jìn)淋巴細(xì)胞的發(fā)育和增強(qiáng)雞新城疫抗體滴度。Xiang-Li等[16]研究了鷹山云武綠茶多糖的添加對(duì)雞免疫應(yīng)答的影響，結(jié)果顯示，飼料中添加鷹山云武綠茶多糖可增加胸腺和法氏囊的重量和血清中IgA和IgG的濃度。李星艷等[17]的研究表明，與對(duì)照組相比，復(fù)方多糖組產(chǎn)生抗體早、抗體上升速度快、抗體的高峰期持續(xù)時(shí)期長(zhǎng)，說(shuō)明中藥復(fù)方多糖能顯著增強(qiáng)雛雞的體液免疫應(yīng)答。遲桂榮等[18]報(bào)道，雞群在口服杏鮑菇多糖后，新城疫疫苗抗體效價(jià)顯著高于對(duì)照組，說(shuō)明杏鮑菇多糖具有提高雞群體液免疫的功能。石念進(jìn)等[19]研究發(fā)現(xiàn)，不同濃度中藥復(fù)方多糖均能提高平均日增重、ND抗體效價(jià)、免疫球蛋白含量，降低平均采食量、料重比，提示該復(fù)方多糖的免疫增強(qiáng)作用與濃度相關(guān)。Qiuyan Sun等[20]的研究結(jié)果表明，刺槐多糖不僅能增強(qiáng)雞傳染性支氣管炎活疫苗的免疫效果，而且能提高免疫抑制雞的免疫能力。因此，刺槐多糖有進(jìn)一步發(fā)展成為免疫增強(qiáng)劑的前景。P Zhang等[21]研究發(fā)現(xiàn)艾葉多糖可以專門促進(jìn)免疫球蛋白的生產(chǎn)(IgM和免疫球蛋白)，細(xì)胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)。

4 中藥多糖對(duì)黏膜免疫功能的影響

黏膜免疫是指廣泛分布于呼吸道、胃腸道、泌尿道等黏膜下及一些外分泌腺處的淋巴組織，至執(zhí)行局部特異性免疫功能的主要場(chǎng)所。黏膜免疫系統(tǒng)主要是通過(guò)分泌型IgA（sIgA）和IgM發(fā)揮作用。sIgA主要由腸黏膜漿細(xì)胞分化產(chǎn)生，其分泌受神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。sIgA是分泌型免疫球蛋白，是參與黏膜免疫中的主要抗體和粘膜上的第一道防線，能抑制腸道內(nèi)的細(xì)菌黏附腸道黏膜表面，中和腸道內(nèi)的毒素、酶和病毒，對(duì)多種病原體都有抵抗作用[22]。邱妍等[23]研究表明，黃芪、板藍(lán)根、牛膝和山藥等4種中藥多糖均能顯著提高空腸黏液中sIgA的含量，提示4種多糖均可以有效地增強(qiáng)黏膜免疫功能，從而提高機(jī)體抵抗力。趙慶友等[24]的研究結(jié)果顯示，槐花多糖可提高新城疫抗體效價(jià)，促進(jìn)十二指腸內(nèi)sIgA的分泌。秦延軍[25]的研究結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比,胚蛋注射黃芪多糖在7d和21d顯著增加了sIgA抗體的分泌。Shan Chunlan[26]等用1日齡的新城疫病公雞進(jìn)行試驗(yàn)，口服黃芪多糖后采用間接ELISA法檢測(cè)空腸內(nèi)特異性分泌IgA水平。結(jié)果顯示，在大多數(shù)時(shí)間點(diǎn)，試驗(yàn)組的IgA細(xì)胞數(shù)量和sIgA水平均顯著高于對(duì)照組，但三個(gè)劑量黃芪多糖組間差異不大。提示口服黃芪多糖可增加雞黏膜免疫功能，可作為免疫增強(qiáng)劑。

5 中藥多糖對(duì)細(xì)胞因子分泌的影響

細(xì)胞因子是由免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞經(jīng)刺激而合成、分泌的一種高活性、具有多功能的蛋白質(zhì)分子，是細(xì)胞間的信號(hào)分子，在免疫系統(tǒng)中主要作用是介導(dǎo)和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答。細(xì)胞因子可分為白細(xì)胞介素（IL）、干擾素（IFN）、腫瘤壞死因子（TNF）、集落刺激因子（CSF）、趨化因子及生長(zhǎng)因子等，對(duì)免疫應(yīng)答的啟動(dòng)至關(guān)重要。據(jù)研究表明，多糖能促進(jìn)干擾素、腫瘤壞死因子、白細(xì)胞介素等50多種細(xì)胞因子的產(chǎn)生。Long LN等[27]將枸杞多糖作為飼料添加劑加入日糧中研究其對(duì)肉雞免疫功能的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)含枸杞多糖的飼料飼喂的肉雞血清IgA和IgG的濃度高于對(duì)照飼料喂養(yǎng)的肉雞，與對(duì)照組相比，2000 mg/kg枸杞多糖組血清腫瘤壞死因子和IL-4濃度顯著升高，并且血清中IL-6和干擾素濃度呈線性和二次型升高。徐占云等[28]的研究表明，枸杞多糖能也可以促進(jìn)雞IL-2的產(chǎn)生，并促進(jìn)淋巴細(xì)胞表面IL-2受體的表達(dá)。李萬(wàn)坤[29]等選用天然免疫活性多糖香菇多糖、木耳多糖和黃芪多糖研究其時(shí)對(duì)柔嫩艾美爾球蟲感染雞的細(xì)胞因子IFN-r和IL-2水平的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，多糖能顯著提高IL-2、IL-6和IL-8水平，提示多糖提取物抗球蟲作用可能與刺激免疫細(xì)胞分泌IFN-r和IL-2等細(xì)胞因子、提高T-細(xì)胞免疫應(yīng)答有關(guān)。李姣清等[30]制備中草藥制劑探究其對(duì)雞免疫器官發(fā)育及脾臟中免疫因子表達(dá)的動(dòng)態(tài)影響，結(jié)果顯示中草藥制劑組黃羽肉雞脾臟中的IL-4 mRNA表達(dá)量在35日齡顯著高于對(duì)照組和抗生素組，IL-2和IFN-γmRNA表達(dá)量在試驗(yàn)期呈增加趨勢(shì)，其表達(dá)量在49日齡時(shí)中草藥組顯著高于對(duì)照組和抗生素組，說(shuō)明復(fù)方中草藥有提高免疫細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量的作用。王守山等[31]研究發(fā)現(xiàn)蘆薈多糖對(duì)正常雛雞血清IFN-γ和血清IL-2具有一定的誘生能力。P.Zhang[32]等研究了青蒿水溶性多糖的體外免疫調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明，與對(duì)照組相比,在細(xì)胞因子的產(chǎn)生方面，青蒿水溶性多糖組IL-1、IL-6和腫瘤壞死因子的產(chǎn)生呈劑量依賴性增強(qiáng)，細(xì)胞mRNA表達(dá)增強(qiáng)。

6 中藥多糖對(duì)免疫抑制的調(diào)節(jié)

免疫抑制是指對(duì)免疫應(yīng)答的抑制作用，機(jī)體免疫功能受到抑制后免疫力低下，極其容易受到細(xì)菌、病毒、真菌等的感染。長(zhǎng)期使用免疫抑制劑（如糖皮質(zhì)激素、硫唑嘌呤、環(huán)磷酰胺等）是免疫抑制的主要原因。據(jù)柳志余[33]試驗(yàn)研究表明，在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.5%、1%、2%黃芪多糖能不同程度緩解環(huán)磷酰胺對(duì)珍珠雞細(xì)胞免疫和體液免疫功能的抑制作用，添加量以1%為最佳。El-Abasy M等[34]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，甘蔗提取物對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制雞的法氏囊依賴免疫系統(tǒng)具有功能形態(tài)學(xué)重構(gòu)作用。李淑芳等[35]報(bào)道，雛雞口服一定劑量的米糠多糖對(duì)環(huán)磷酰胺引起的細(xì)胞免疫和體液免疫抑制具有一定的拮抗作用。王守山等[31]通過(guò)構(gòu)建免疫抑制模型進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果顯示蘆薈多糖對(duì)于環(huán)磷酰胺引起的雛雞免疫抑制試驗(yàn)顯示，可以明顯增加免疫抑制雛雞的增重，能促進(jìn)血清IL-2和IFN-γ的誘生，提高機(jī)體的抵抗力，特別是在高劑量對(duì)IL-2的誘生作用上差異顯著。Yunpeng Fan等[36]研究表明，淫羊藿多糖對(duì)環(huán)磷酰胺抑制組的血清抗體滴度、細(xì)胞因子表達(dá)和淋巴細(xì)胞增殖功能都有明顯的促進(jìn)作用。Li S[37]等通過(guò)試驗(yàn)探討經(jīng)伽馬射線處理的黃芪多糖（IAPS）對(duì)環(huán)磷酰胺（CPM）誘導(dǎo)的免疫抑制肉雞小腸和腸黏膜免疫發(fā)育的保護(hù)作用。結(jié)果表明，黃芪多糖和IAPS均能顯著提高CPM注射肉雞十二指腸促胰島素生成細(xì)胞數(shù)量和空腸白細(xì)胞IL-2、IL-10的mRNA表達(dá)及干擾素含量，并且在相同的補(bǔ)充水平下，IAPS的免疫調(diào)節(jié)作用強(qiáng)于APS。 □