脂聯(lián)素和骨鈣素在子宮內(nèi)膜組織中表達(dá)及其臨床意義*

顧佳士，葉慧英，戴海燕，朱建龍，郭麗梅

上海市浦東醫(yī)院/復(fù)旦大學(xué)附屬浦東醫(yī)院：1.婦產(chǎn)科；2.病理科,上海 201399

子宮內(nèi)膜癌是指原發(fā)于子宮內(nèi)膜的一組上皮性惡性腫瘤，是女性生殖道三大惡性腫瘤之一[1]。肥胖和胰島素抵抗是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展的高危因素[2]。脂聯(lián)素為脂肪因子，與肥胖、高血壓、糖尿病等多種臨床疾病相關(guān)，且被證實(shí)參與多種婦科腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[3]。另有研究證實(shí)，骨鈣素可通過(guò)促進(jìn)脂聯(lián)素的分泌從而增強(qiáng)胰島素基因蛋白表達(dá)并改善胰島素的敏感性，參與調(diào)節(jié)能量代謝[4]。本研究通過(guò)檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌組織中脂聯(lián)素和骨鈣素的表達(dá)情況，探討其與子宮內(nèi)膜癌之間的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年1月至2019年1月上海市浦東醫(yī)院收治的40例子宮內(nèi)膜癌患者作為內(nèi)膜癌組，年齡為42～75歲，平均(55.23±5.74)歲。另選取同期在本院確診為子宮內(nèi)膜不典型增生的30例患者作為增生內(nèi)膜組，年齡為40～63歲，平均(57.23±3.25)歲；以及選取同期因子宮肌瘤在本院行全子宮切除術(shù)且術(shù)后診斷為正常子宮增殖期內(nèi)膜的30例患者作為正常內(nèi)膜組，年齡為50～69歲，平均(58.43±8.21)歲。所有患者均不合并其他惡性腫瘤、糖尿病、高血壓及代謝性疾病，術(shù)前也均未接受放、化療及內(nèi)分泌方面治療。所有標(biāo)本均經(jīng)甲醛固定，石蠟包埋并經(jīng)過(guò)兩名以上病理科醫(yī)生復(fù)診確認(rèn)，本研究經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)，患者均知情同意。

1.2方法

1.2.1免疫組化染色 將標(biāo)本蠟塊切片，厚4 μm，脫蠟、水化，抗原熱修復(fù)，阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，滴加一抗和二抗，行PV-6000免疫組化染色。脂聯(lián)素和骨鈣素兔抗人多克隆抗體及SP試劑盒均購(gòu)自上海容成生物技術(shù)有限公司。

1.2.2免疫組化結(jié)果判定 脂聯(lián)素和骨鈣素的細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜被染成黃色即判定為陽(yáng)性細(xì)胞。技術(shù)方法采用半定量法。在高倍光鏡(200倍)下隨機(jī)選取5個(gè)視野，計(jì)算每個(gè)視野的陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比、染色強(qiáng)度并進(jìn)行評(píng)分，如果染色強(qiáng)度評(píng)分與陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比評(píng)分之積≥3分即為免疫反應(yīng)陽(yáng)性，<3分即為免疫反應(yīng)陰性[5]。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用線性回歸分析。P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1各組脂聯(lián)素及骨鈣素陽(yáng)性表達(dá)率比較 正常內(nèi)膜組、增生內(nèi)膜組和內(nèi)膜癌組脂聯(lián)素和骨鈣素陽(yáng)性表達(dá)率逐漸降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。內(nèi)膜癌組與增生內(nèi)膜組脂聯(lián)素和骨鈣素陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；正常內(nèi)膜組與增生內(nèi)膜組脂聯(lián)素和骨鈣素陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各組的脂聯(lián)素及骨鈣素陽(yáng)性表達(dá)率比較[n(%)]

2.2內(nèi)膜癌組脂聯(lián)素和骨鈣素的表達(dá)與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系 內(nèi)膜癌組脂聯(lián)素的表達(dá)與腫瘤病理類型、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及肌層浸潤(rùn)深度無(wú)關(guān)(r=0.014、0.002、0.172、0.032，P>0.05)。內(nèi)膜癌組骨鈣素的表達(dá)和腫瘤病理類型相關(guān)(r=0.455，P<0.05)，但與腫瘤的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及肌層浸潤(rùn)深度無(wú)關(guān)(r=0.153、0.024、0.051,P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 內(nèi)膜癌組脂聯(lián)素和骨鈣素的表達(dá)與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系(n)

2.3內(nèi)膜癌組脂聯(lián)素與骨鈣素的相關(guān)性 內(nèi)膜癌組脂聯(lián)素的表達(dá)水平與骨鈣素的表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.307,P<0.05)。

3 討 論

脂聯(lián)素是由內(nèi)臟脂肪分泌的一種脂肪細(xì)胞因子。人脂聯(lián)素的基因全長(zhǎng)16 kbp,包含了3個(gè)外顯子和2個(gè)內(nèi)含子，定位于3q27染色體[6]。有研究表明，脂聯(lián)素除了由脂肪細(xì)胞分泌，多種細(xì)胞如肝細(xì)胞、骨骼細(xì)胞、胎盤(pán)組織等也分泌少量的脂聯(lián)素，低水平的脂聯(lián)素與肥胖、2型糖尿病、胰島素抵抗和子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生密切相關(guān)[7]。MA等[8]研究表明，在調(diào)整年齡、體質(zhì)量指數(shù)、血糖水平等相關(guān)影響因素后，低水平的血清脂聯(lián)素是子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。有研究發(fā)現(xiàn)，脂聯(lián)素主要與脂聯(lián)素受體結(jié)合，從而激活了磷酸腺苷活化蛋白激酶，抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖，導(dǎo)致癌變[9-10]。本研究?jī)?nèi)膜癌組脂聯(lián)素陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于正常內(nèi)膜組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明脂聯(lián)素參與了子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生和發(fā)展，與文獻(xiàn)[7-8]研究結(jié)果一致。脂聯(lián)素與子宮內(nèi)膜癌的分化、分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及肌層浸潤(rùn)深度的關(guān)系目前尚無(wú)統(tǒng)一結(jié)論。有研究表明，脂聯(lián)素與腫瘤的分化程度有關(guān)，分化程度越低，脂聯(lián)素水平越低[11]，而王文文等[12]研究表明，子宮內(nèi)膜癌組織中脂聯(lián)素的表達(dá)與臨床分期和肌層浸潤(rùn)深度等均無(wú)關(guān)。本研究未發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌組織中脂聯(lián)素的表達(dá)和病理類型、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和肌層浸潤(rùn)深度相關(guān)。

骨鈣素是成熟成骨細(xì)胞合成和分泌的一種特異的非膠原骨基質(zhì)蛋白。有研究表明，當(dāng)骨鈣素缺乏時(shí)可導(dǎo)致胰島素分泌減少、胰島素敏感性降低、葡萄糖耐量異常及脂聯(lián)素的表達(dá)降低，進(jìn)而導(dǎo)致能量代謝的異常[13]。已有多項(xiàng)研究證實(shí)，骨鈣素和腫瘤的發(fā)生、發(fā)展具有一定的相關(guān)性。LIU等[14]研究顯示血清骨鈣素水平與肝癌病情嚴(yán)重程度呈負(fù)相關(guān)。有研究顯示，腫瘤組織中骨鈣素的免疫組化測(cè)定有助于提高惡性腫瘤的診斷敏感性[15-16]。本研究?jī)?nèi)膜癌組骨鈣素陽(yáng)性表達(dá)率低于增生內(nèi)膜組和正常內(nèi)膜組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，說(shuō)明骨鈣素和子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生有關(guān)。本研究顯示，骨鈣素的表達(dá)與臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和肌層浸潤(rùn)深度無(wú)關(guān)，但與子宮內(nèi)膜內(nèi)膜樣腺癌有關(guān)，這進(jìn)一步說(shuō)明骨鈣素和糖代謝異常、胰島素抵抗導(dǎo)致的Ⅰ型雌激素依賴型子宮內(nèi)膜癌密切相關(guān)。王計(jì)艷等[17]研究顯示在2型糖尿病患者血清中骨鈣素和脂聯(lián)素的表達(dá)呈正相關(guān)。另外有研究發(fā)現(xiàn)，骨鈣素可以通過(guò)下調(diào)CD68和單核細(xì)胞趨化蛋白1表達(dá)，抑制肥胖小鼠脂肪組織巨噬細(xì)胞聚集及單核細(xì)胞趨化蛋白1分泌,以及通過(guò)降低小鼠體質(zhì)量和體內(nèi)脂肪水平使胰島素敏感性增強(qiáng)[18]。本研究結(jié)果顯示，內(nèi)膜癌組脂聯(lián)素的表達(dá)水平與骨鈣素的表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.307，P<0.05)，推測(cè)骨鈣素可通過(guò)脂聯(lián)素介導(dǎo)能量代謝的途徑作用于內(nèi)膜組織，骨鈣素也可以通過(guò)直接作用于子宮內(nèi)膜組織從而導(dǎo)致病變的發(fā)生。

總之，脂聯(lián)素、骨鈣素的表達(dá)在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中起到重要作用，二者聯(lián)合檢測(cè)可為子宮內(nèi)膜癌的早期診斷、治療和預(yù)后提供新的思路。