何金標

（武強縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北武強053300）

2020 年3 月，我縣一雞場34 日齡部分病雞不表現(xiàn)癥狀突然死亡，部分病雞表現(xiàn)出精神沉郁、呆立、采食量下降、飲水量增加、呼吸困難、下痢等癥狀。 通過病理解剖，結(jié)合實驗室檢測， 鑒定該養(yǎng)殖場病原菌為大腸桿菌， 根據(jù)藥敏試驗結(jié)果對該養(yǎng)殖場進行科學用藥指導， 治愈率達到96%，有較好的治療效果。

雞大腸桿菌病是由雞致病性大腸桿菌（APEC）入侵機體所引發(fā)的傳染性疾病， 其病原大腸桿菌屬于條件致病菌。 由于其病原大腸桿菌的特殊性 （有多種致病性以及數(shù)量龐大的血清型） 造成該病擁有多種病型， 其中主要包括心包炎、 肝周炎、腹膜炎、氣囊炎、敗血癥等。 其主要感染幼齡畜禽， 在全國各地均有該病的發(fā)生報道， 發(fā)病率和致死率都很高。 本病常會繼發(fā)或并發(fā)某些其他的傳染病(如新城疫、 禽流感等），使本病在臨床上的表現(xiàn)更加復雜多樣， 從而造成本病的治療變得十分困難。 近年來，隨著我國養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，養(yǎng)殖規(guī)模越來越大，雞大腸桿菌病在我國的流行狀況呈現(xiàn)日益嚴重的趨勢。 養(yǎng)殖場中一旦發(fā)病常會引起大規(guī)模傳染及死亡， 給雞場造成嚴重的經(jīng)濟損失。 由于近年來抗生素的濫用， 大腸桿菌的耐藥性十分嚴重， 因此藥敏試驗是最科學的使用抗生素的方式。

1 材料與方法

1.1 材料

雞傳染性支氣管炎病毒RTPCR 試劑盒、 禽流感病毒RT-PCR試劑盒、 新城疫病毒RT-PCR 試劑盒購自北京天恩澤基因科技有限公司， 普通瓊脂培養(yǎng)基、 麥康凱培養(yǎng)基、 藥敏片購自北京索萊寶科技有限公司。

1.2 剖檢

對病雞進行解剖檢查，并觀察病理變化。

1.3 實驗室診斷

1.3.1 病毒學診斷

選取雞的脾臟、 肝臟、 氣管樣本，提取核酸后，按照試劑盒的具體操作步驟進行PCR 檢測。

1.3.2 細菌學診斷

無菌環(huán)境下， 用接種環(huán)蘸取病料在普通瓊脂培養(yǎng)基上進行劃線培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)14 小時， 挑取單菌落在麥康凱培養(yǎng)基上進行純化培養(yǎng)。

挑取純化后的細菌進行革蘭氏染色，通過顯微鏡進行形態(tài)觀察。

將純化后的細菌涂布在普通培養(yǎng)基上， 采用K-B 紙片擴散法進行藥物敏感性試驗， 判定標準參照CLSI2018 標準。

1.4 臨床應用

參照藥物敏感性實驗結(jié)果用藥，并計算其治愈率。

2 實驗結(jié)果

2.1 臨床癥狀

部分病雞突然死亡不表現(xiàn)出癥狀；部分病雞表現(xiàn)出呆立；飲食方面表現(xiàn)出不食或采食量下降；經(jīng)?？诳?，飲水量大量增加；精神沉郁；羽毛蓬松雜亂；呼吸輕重不一，表現(xiàn)出呼吸困難，鼻部和口部有黏液分泌；眼炎，眼結(jié)膜充血、出血；腹瀉輕重不一，排黃白色稀糞。

2.2 剖檢變化

心包膜增厚變渾濁不透明，有心包積液，嚴重的甚至會出現(xiàn)纖維素樣滲出物并與心肌黏連在一起（如圖1b）；肝臟瘀血呈暗紅色并可見不同程度的腫大， 且表面包有一層白色渾濁的纖維素性膜 （如圖1d）；氣囊渾濁變厚，表面有纖維素樣滲出物；小腸彌漫性出血，；腹水并可見有纖維素樣滲出物； 腎臟變化明顯， 較平時明顯腫大且有花斑（如圖1a）。 脾臟也有腫大且被膜下出血（如圖1c）。

2.3 實驗室診斷結(jié)果

2.3.1 病毒學檢測結(jié)果

經(jīng)PCR 檢測，病料中未檢出新城疫病毒、禽流感病毒、雞傳染性支氣管炎病毒。

2.3.2 細菌學檢測結(jié)果

在麥康凱培養(yǎng)基中形成的是表面光滑、邊緣整齊、濕潤的紅色圓形菌落，革蘭氏染色鏡檢，菌體呈紅色短桿狀，兩端鈍圓，與大腸桿菌的形態(tài)特征一致。

2.3.3 藥敏試驗結(jié)果

選取青霉素G、氨芐西林、頭孢唑林、慶大霉素、強力霉素、鏈霉素、四環(huán)素、林可霉素、卡那霉素、恩諾沙星進行藥物敏感性試驗，其中對恩諾沙星最為敏感。 試驗結(jié)果見表1。

表1 藥敏試驗結(jié)果

2.4 臨床應用結(jié)果

恩諾沙星添加飼喂，經(jīng)用藥后， 精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)， 采食量增加，腹瀉情況明顯減少，死亡數(shù)開始下降， 用藥第6 天雞群不再死亡， 最后雞群從發(fā)病到治愈共死亡259 只， 該雞場共6400 只雞，治愈率為96%。

3 討論

恩諾沙星殺菌能力強， 且該藥抗菌機制與其他抗菌藥有顯著不同，不易產(chǎn)生交叉耐藥性。 2016 年，Su 等從我國南方地區(qū)分離3456 株大腸桿菌， 其耐藥率達到了89.1%，可見大腸桿菌耐藥的嚴重性。 通過藥敏試驗來對抗生素進行合理選擇， 可以很大程度上降低大腸桿菌的耐藥性。

大腸桿菌是條件致病菌， 當受感染的病雞機體免疫力下降或受到各種應激因素影響如惡劣的飼養(yǎng)環(huán)境，或過冷過熱，雞群長期營養(yǎng)不良時都會造成本病的發(fā)生。 所以，預防本病首先應該加強飼養(yǎng)與管理。 第一， 時刻注意雞舍的通風是否良好以及保溫效果的好壞， 從而避免因通風不良或溫度的突變而引發(fā)疾病； 第二， 維持雞舍的衛(wèi)生環(huán)境良好，并注意飼養(yǎng)密度。 密度過高不僅會導致雞舍空氣質(zhì)量的下降， 更重要的是當疾病發(fā)生時飼養(yǎng)密度過大會使疾病快速大范圍的傳播。 第三，采用科學的飼料配比， 使雞營養(yǎng)狀況良好， 避免雞群因一種或多種營養(yǎng)物質(zhì)缺乏造成營養(yǎng)不良而引發(fā)該??； 第四， 定時對雞舍進行統(tǒng)一消毒，清除病原。 第五，做好雞的免疫疫苗接種， 應用雞大腸桿菌病蜂膠滅活疫苗， 頸部皮下注射，1 日齡以上的健康雞每只注射0.5 毫升，免疫期4 個月，提前預防該病的發(fā)生。

4 結(jié)論

結(jié)合臨床癥狀、 病理剖檢和實驗室檢測結(jié)果， 確定該雞場的病原為大腸桿菌，通過藥敏試驗結(jié)果，對該雞場使用恩諾沙星進行治療，治愈率為96%。