動物免疫抗體檢測進(jìn)行采血的最佳時間節(jié)點

盧智文 樵英權(quán)

（1.陜西省商洛市商州區(qū)畜牧獸醫(yī)中心，陜西商州 726000；2.陜西省商洛市商州區(qū)楊斜鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)綜合服務(wù)站 陜西商州 726000）

實際上，動物免疫抗體檢測工作，不僅僅是評價動物防疫工作，更重要的是為畜禽進(jìn)行補(bǔ)免和開展各項重大動物疫病防控措施提供科學(xué)依據(jù)，同時為業(yè)務(wù)主管部門科學(xué)地制定重大動物疫病預(yù)防控制規(guī)劃和疫病預(yù)警，及時開展動物疫病流行病學(xué)調(diào)查等等。

豬瘟、豬藍(lán)耳病、牲畜口蹄疫、高致病性禽流感、羊小反芻獸疫目前是陜西省規(guī)定免疫的五類動物疫?。ㄉ罂谔阋?、高致病性禽流感、羊小反芻獸疫屬于強(qiáng)制免疫病種）。平時在動物免疫后抗體檢測工作中，如何確保動物免疫抗體水平達(dá)標(biāo)成為所有養(yǎng)殖場及基層鎮(zhèn)（辦）村組動物防疫人員的擔(dān)憂——動物明明做過免疫注射了，免疫抗體怎么就沒有產(chǎn)生呢？先假定動物免疫注射是成功的，筆者把2015-2019年商州區(qū)動物免疫抗體集中檢測結(jié)果數(shù)據(jù)分為7組進(jìn)行統(tǒng)計：A組（豬瘟）B組（豬O型口蹄疫）C組（牛O型口蹄疫）D組（羊O型口蹄疫）E組（禽流感）F組（雞新城疫）H組（小反獸疫），每個組檢測數(shù)據(jù)整理后通過2個統(tǒng)計圖反映。

1 材料與方法

1.1 檢測試劑

豬瘟病毒抗體ELISA檢測試劑盒、O型口蹄疫抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒均系中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)。禽流感試劑盒、雞新城疫試劑盒均系青島易邦生物工程有限公司生產(chǎn)；小反獸疫阻斷ELISA 檢測試劑盒系青島立見診斷技術(shù)發(fā)展中心生產(chǎn)。

1.2 血清樣品

檢測每組血清樣品來自個方面：一是鎮(zhèn)辦送檢的防疫考核樣品，動物免疫次數(shù)與動物日齡未知；二是商州區(qū)動物程序化免疫示范養(yǎng)殖場樣品，動物免疫時間、次數(shù)、日齡檔案完整清楚，樣品是試驗人員親自采集，通過合同保證試驗動物免疫抗體，試驗費3000～5000元/場年，試驗養(yǎng)殖場按照合同規(guī)定對動物免疫。

1.3 檢測方法

每組檢測項目嚴(yán)格按照各自對應(yīng)檢測試劑盒所附說明書進(jìn)行操作。

1.4 檢測統(tǒng)計結(jié)果

經(jīng)過2015～2019年商州區(qū)動物免疫抗體集中檢測結(jié)果可以看出，雞新城疫、豬瘟、高致病性禽流感、O型口蹄疫、羊小反芻獸疫疫苗首次免疫后22～28d采樣抗體合格率均達(dá)到70%以上，最低70%，最高90%，但抗體效價均值為合格以上，稍超過抗體合格標(biāo)準(zhǔn)。二次加強(qiáng)免疫后，抗體合格率可達(dá)90%以上，較首免提高20個百分點，抗體效價可達(dá)最高值，較首免提高3個滴度以上。其中10月（93%）和4月（100%）二免后雞新城疫、豬瘟、高致病性禽流感、口蹄疫抗體水平達(dá)到最高值。

2 統(tǒng)計結(jié)果分析

通過檢測結(jié)果數(shù)據(jù)統(tǒng)計就評價動物強(qiáng)制免疫病種采血時機(jī)作出如下分析介紹，僅供畜牧同行參考。

一免，通常也稱為首免；決定首免的時間有兩種，一是養(yǎng)殖場戶依據(jù)本地該類動物流行病狀況、本場動物母源抗體水平?jīng)Q定第一次免疫接種某種動物疫苗的時間（主動安排，這是最合理的）；二是散養(yǎng)戶飼養(yǎng)的動物第一次接受村級動物防疫員到戶免疫時間（政府每年規(guī)定的集中免疫時間，這是被動的，不得已而為之）。動物免疫學(xué)上把第一針和第二針疫苗稱為致敏接種，使接種者產(chǎn)生抗體，第三針稱加強(qiáng)免疫，使產(chǎn)生的抗體效價更高，預(yù)防效果更為持久。一免就是為了打好基礎(chǔ)。

基礎(chǔ)免疫是指預(yù)防接種過程中的第一次免疫接種或第一程免疫接種。活疫（菌）苗初次免疫，只需接種一次，免疫效果好而持久（有一定危險比如散毒）如（我們?nèi)粘Ｊ褂玫呢i瘟、雞新城疫、小反芻獸疫、狂犬病疫苗）；死疫（菌）苗及類毒素初次免疫，抗體出現(xiàn)慢，效果低，持續(xù)時間短；多次免疫后效果好，持續(xù)時間長，安全、有效（我們?nèi)粘Ｊ褂玫那萘鞲小⒖谔阋邷缁钣腿閯┮呙缇蛯儆诤笠活悾?/p>

至少應(yīng)在一定時間內(nèi)連續(xù)免疫2次～3次，稱為第一程基礎(chǔ)免疫。為保持機(jī)體免疫力，常需在一定時間后進(jìn)行加強(qiáng)免疫（復(fù)種）。這也是我們?nèi)粘z測中，蛋雞、牛等飼養(yǎng)周期長的動物抗體檢測合格率高而且平均的原因。

2.1 豬瘟免疫后抗體檢測采血選擇哪個階段的豬

陽性率：豬瘟抗體（阻斷率（Blocking）≥40%，判為陽性結(jié)果；30%＜Blocking＜40%，判為可疑結(jié)果；Blocking≤30%，判為陰性結(jié)果）。

免疫合格率：阻斷率（Blocking）≥50%的，即為免疫合格（斷奶仔豬豬瘟第一次免疫受母源抗體干擾，≥30%可視為合格）。免疫合格的比例即為免疫合格率。大家應(yīng)該知道，獸醫(yī)實驗室檢測人員不會考慮你提供的檢測血清來自于那頭豬，所以斷奶仔豬的血清你就不用選擇送檢了！而且8周齡前仔豬免疫機(jī)制并不完善，母源抗體水平不一致、斷奶、轉(zhuǎn)圈等影響因素太多，的確不適合做抗體檢測送檢對象。自己多次實踐證明，首免后豬瘟抗體往往呈下降趨勢，間隔一月后二免，二免后30d左右為最佳采集時間段。此時最小豬只應(yīng)該≥90日齡。

2.2 豬口蹄疫免疫后抗體檢測采血選擇哪個階段的豬

根據(jù)豬口蹄疫O型滅活疫苗的說明書，①不建議給8周齡內(nèi)的仔豬和妊娠母豬前后期接種口蹄疫疫苗；②接種后2～3周才產(chǎn)生免疫抗體；③免疫期6個月；因此血清采集的最佳時間應(yīng)該在3月齡之后，免疫三周后的豬身上采集，并不超過免疫時間6個月內(nèi)。

根據(jù)實驗室檢測結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，豬只如果從需要讓同時檢測上述二種動物疫苗抗體情況，如果想保證抗體合格率，需要采集至100～150日齡之間的豬最好，太小豬只有可能沒有加強(qiáng)免疫無法保證抗體合格率，豬只太大，除非再次加強(qiáng)免疫，否則部分免疫病種超過有效保護(hù)期。

2.3 牛、羊口蹄疫免疫后抗體檢測采血時間段

正常情況下，政府提供疫苗每年根據(jù)實際情況會選擇不同類型和毒株，口蹄疫疫苗主要包括O型、A型、亞洲I型三種類別（未論毒株）。通常又會選擇不同組合成二價、三價疫苗。如：口蹄疫O型、A型二價滅活疫苗（OHM/02株+AKT-Ⅲ）就是今年提供的二價疫苗，實際可以提供給牛、羊使用，牛2ML/頭，羊1ML/頭；因上級要求僅用于牛，另選單價苗（口蹄疫O型滅和疫苗（OS株））給羊使用。自己僅從抗體角度分析，不涉及疫苗選用之緣由。所以從抗體檢測目的（免疫效果評價）出發(fā)，首先必須按照規(guī)定選擇使用疫苗。

口蹄疫免疫，首免后2周產(chǎn)生抗體，3周后70%合格，4周后可達(dá)100%合格；但是其中使用多價疫苗的，不同型會產(chǎn)生差異，并且會受到免疫次數(shù)影響。比如春防曾經(jīng)免疫過某單價苗（如O型），秋防是使用了二價苗（如O、A型），就會出現(xiàn)兩次免疫中相同的（O型）迅速產(chǎn)生抗體并且很高，而其中的A型就相當(dāng)于首免，產(chǎn)生效果遠(yuǎn)不及同時免疫的O型。

動物免疫學(xué)上把第一針和第二針疫苗稱為致敏接種，使接種者產(chǎn)生抗體，第三針稱加強(qiáng)免疫，使產(chǎn)生的抗體效價更高，預(yù)防效果更為持久。根據(jù)調(diào)查了解分析，牛因為飼養(yǎng)周期長，如連續(xù)兩年（或更多年份）接種過疫苗注射，那抗體產(chǎn)生的效果就會十分理想。這也是羊群體大、周期短導(dǎo)致免疫后抗體檢測效果相對較差的原因之一。

通過檢測結(jié)果數(shù)據(jù)匯總分析，牛、羊免疫后抗體檢測目的的采血時間段應(yīng)該是，加強(qiáng)免疫1月后至6月內(nèi)。

2.4 羊小反芻獸疫免疫后抗體檢測采血時間段

山羊接種小反芻獸疫疫苗系活疫苗，產(chǎn)生抗體速度快，1周即有抗體產(chǎn)生，3周后檢測抗體可獲得較高抗體滴度。根據(jù)疫苗使用說明書，保護(hù)期暫定3年。這樣一來，多數(shù)養(yǎng)殖場在羔羊（斷奶后）階段接種一次即可基本保護(hù)其一生。但從抗體檢測達(dá)標(biāo)目的來說，考慮為獲得較高抗體滴度，應(yīng)該參考其他動物活疫苗免疫抗體漲消之規(guī)律，建議采集當(dāng)季免疫后1月～6月內(nèi)的羊只血液送檢方可確保有效。

我們根據(jù)實驗室檢測結(jié)果數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析分析，如果僅從牛、羊中選擇一種作為評價抗體檢測之用，?？谔阋呖贵w合格率概率大于羊；但是如果需要同步檢測小反，加上時常在開展的布病排查檢測工作，山羊血液采集工作比牛的更多、更方便；這樣的檢測結(jié)果也更科學(xué)！通過檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計結(jié)果反映采血時間段在免疫1個月之后、6個月之前最好。

2.5 雞新城疫免疫后抗體檢測采集哪個時間階段

通常情況下，我們只提供新城疫La Sota株疫苗，一般在雛雞7日齡首免，間隔2～3周加強(qiáng)免疫一次。免疫后一周可產(chǎn)生抗體。日常管理中，多數(shù)養(yǎng)殖場采取二免后，每45～60d接種弱毒苗一次的辦法，可有效保護(hù)雞只。如此推算，雞新城疫免疫后2周～8周之間采血檢測可以獲得比較理想的抗體檢測成績。

2.6 禽流感免疫后抗體檢測采集哪個時間階段

目前我們提供的有新城疫+禽流感二聯(lián)凍干苗（H5），禽流感H5+H7油苗兩種疫苗，一般檢測抗體需要查H5/H7兩種毒株的，所以需要接種油苗。通過查詢得知，一般在雞只兩周齡接種禽流感油苗，禽流感（H5+H7）二價滅活疫苗在免后14d可產(chǎn)生較高的抗體、35d達(dá)到抗體峰值，到63d仍維持較高的抗體水平，完全可以為家禽提供良好的免疫保護(hù)。蛋雞一般會在開產(chǎn)前再加強(qiáng)免疫一次。據(jù)此分析，禽流感抗體檢測應(yīng)該在雞只免疫后35～120d間開展采樣檢測。

我們根據(jù)實驗室檢測結(jié)果數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，雞只如果需要檢測新城疫和禽流感兩種疫苗免疫情況，一般應(yīng)該采集免疫兩種疫苗接種后35～60日之間的雞只（如果超過60d，新城疫需要加強(qiáng)免疫，當(dāng)然使用過新城疫油苗的除外）。