FGFR2、HER2和PTEN在胃癌組織中的表達及臨床意義

馮潔 陳紅莉 唐建光

摘要：目的 ?探討成纖維細胞生長因子2（FGFR2）、人類表皮生長因子受體2（HER2）、張力蛋白同源磷酸酶基因（PTEN）在胃癌組織中的表達及臨床意義。方法 ?選取我院2015年1月～2018年12月行手術(shù)切除的胃癌組織標本84例，采用免疫組化方法檢測胃癌組織中FGFR2、HER2及PTEN的表達，分析三個基因與胃癌臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果 ?FGFR2、HER2在胃癌組織中的表達率為67.80%、46.40%，均高于正常胃黏膜組織，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;PTEN在胃癌組織中的表達率為38.10%，低于正常胃黏膜組織，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。不同浸潤深度、TNM分期、腫塊大小的患者胃癌組織中FGFR2蛋白的表達比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;不同浸潤深度、腫塊大小的患者胃癌組織中HER2的表達比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;不同腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者胃癌組織中PTEN的表達比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;相關(guān)性分析顯示，PTEN表達與FGFR2及HER2的表達均呈負相關(guān)（r=-0.233、-0.316），HER2與FGFR2的表達呈正相關(guān)（r=0.586）。結(jié)論 ?FGFR2、HER2及PTEN與胃癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，其中PTEN的表達與HER2、FGFR2負相關(guān)，HER2與FGFR2的表達呈正相關(guān)，聯(lián)合檢測三項基因表達對有助于胃癌的預(yù)后判斷及靶向藥物的選擇。

關(guān)鍵詞：FGFR2;HER2;PTEN;胃癌

中圖分類號：R735.2 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻標識碼：A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.23.026

文章編號：1006-1959（2020）23-0092-04

Abstract：Objective ?To investigate the expression and clinical significance of fibroblast growth factor 2（FGFR2）， human epidermal growth factor receptor 2（HER2） and tensin homophosphate gene （PTEN） in gastric cancer tissues.Methods ?From January2015 to December2018，84 cases of gastric cancer specimens which were surgically removedin our hospital were selected .The expression of FGFR2， HER2 and PTEN in gastric cancer was detected by immunohistochemistry， and its association withclinicopathological characteristics was analyzed.Results ?The expression rates of FGFR2 and HER2 in gastric cancer tissues were 67.80% and 46.40%， both higher than normal gastric mucosal tissues，the difference was statistically significant （P<0.05）; the expression rate of PTEN in gastric cancer tissues was 38.10%， which was lower than In normal gastric mucosal tissue， the difference was statistically significant （P<0.05）. Comparison of FGFR2 protein expression in gastric cancer tissues of patients with different invasion depths， TNM stages， and tumor sizes was statistically significant （P<0.05）; comparison of HER2 expression in gastric cancer tissues of patients with different invasion depths and tumor sizes， the differences were statistically significant （P<0.05）; Comparison of the expression of PTEN in gastric cancer tissues of patients with different tumor differentiation and lymph node metastasis， the difference was statistically significant （P<0.05）;Correlation analysis showed that PTEN expression was negatively correlated with FGFR2 and HER2 expression （r=-0.233， -0.316）， and HER2 and FGFR2 expression were positively correlated （r=0.586）.Conclusion ?FGFR2、HER2 and PTEN are closely related to the occurrence and development of gastric cancer， in which the expression of PTEN is negatively correlated with HER2、FGFR2 and the expression of FGFR2 is positively correlated. Combined detection of three gene expression is helpful to the prognosis judgment of gastric cancer and the choice of targeted drugs.

Key words：FGFR2;HER2;PTEN;Gastric cancer

胃癌（gastric cancer）是世界上常見的惡性腫瘤，是死亡率最高的三大腫瘤之一。研究報告顯示，胃癌的死亡比例為8.20%，僅次于肺癌及結(jié)腸癌[1]。目前研究證實，人成纖維細胞生長因子受體2（FGFR2）在多種腫瘤中高表達，人類表皮生長因子受體2（HER2）被發(fā)現(xiàn)存在于胃癌組織中，其陽性率差異較大[2，3]。張力蛋白同源磷酸酶基因（PTEN）是抑癌基因，在多種腫瘤中表達缺失或低表達，研究表明PTEN缺失是胃癌患者早期HER2治療抵抗的重要預(yù)測標志物[4]。但三者在胃癌中表達情況及相互關(guān)系尚不明確。本研究擬通過檢測胃癌及正常組織中FGFR2、HER2、PTEN的表達水平，分析三者之間的相關(guān)性，以更好的為胃癌的個體化治療提供參考，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料 ?收集桂林市人民醫(yī)院2015年1月～2018年12月行手術(shù)切除的胃癌組織標本84例，所有患者術(shù)前均未接受放療或放療，術(shù)后均經(jīng)病理學確診。收集患者臨床病理資料。84例患者中，男性58 例，女性 26例，年齡33～82歲，中位年齡63歲。腫塊直徑>4 cm 52例，腫塊直徑≤4 cm 32例。胃癌分期Ⅰ～Ⅱ期 44例，Ⅲ～Ⅳ期40例，低分化 51例，中高分化33例。

1.2試劑 ?鼠抗人FGFR2單克隆抗體購于碧云天試劑公司，兔抗人HER2多克隆抗體及兔抗人二抗均購于福建邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。鼠抗人PTEN單克隆抗體購于北京中杉金橋生物技術(shù)有效公司。

1.3方法 ?胃癌組織及正常胃組織標本均經(jīng) 10%中性福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋切片，4 μm連續(xù)切片，行HE染色后鏡下觀察。采用免疫組化方法檢測FGFR2、HER2、PTEN的表達水平，所有石蠟切片采取烤片、脫蠟、水化、阻斷滅活內(nèi)源性過氧化物酶及抗原修復(fù)后，用5%BSA室溫孵育20 min，加入一抗4 ℃冰箱孵育過夜，PBS沖洗后滴入二抗，37 ℃孵育30 min，PBS沖洗后顯色、復(fù)染、脫水、透明，封片后觀察。

1.4免疫組化結(jié)果判讀 ?HER2陽性為胞膜上內(nèi)出現(xiàn)黃色至棕褐色染色，F(xiàn)GFR2、PTEN陽性為細胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色染色。每張切片選擇10個高倍鏡（×400）視野，根據(jù)染色強度及陽性細胞率采用半定量積分法進行綜合評分。無陽性細胞為-;陽性細胞≤25% 為+，26%～50%為++，>50%為+++，分別記0、1、2、3 分。染色強度：淺黃色為+，棕黃色為++，棕褐色為+++，無著色為-， 分別記為1、2、3、0 分。兩者分數(shù)相加，0 分陰性（-），1～2分計為弱陽性（±），3～4 分為陽性（++），5～6分為強陽性（+++）。結(jié)果采用雙盲法，切片結(jié)果由2名經(jīng)驗豐富的病理科醫(yī)生進行診斷。

1.5統(tǒng)計學方法 ?采用SPSS 16.0 軟件進行數(shù)據(jù)分析。計數(shù)資料使用[n（%）]表示，采用？字2檢驗;FGFR2 與HER2、PTEN 之間的相關(guān)性分析采用Spearman等級相關(guān)分析。以 P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2結(jié)果

2.1 FGFR2、HER2和PTEN在胃癌組織中的表達 ?FGFR2在胃癌組織中表達率為67.80%，HER2在胃癌組織中表達率為46.40%，PTEN在胃癌組織中的表達率為38.10%，PTEN在胃癌組織中的表達低于正常組織，見圖1。

2.2 FGFR2、HER2和PTEN的表達與胃癌臨床病理特征的關(guān)系 ?FGFR2的表達與年齡、性別、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)（P>0.05），與浸潤深度、TNM分期、腫塊大小有關(guān)（P<0.05）;HER2的表達與年齡、性別、分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)（P>0.05），與腫塊大小、浸潤深度有關(guān)（P<0.05）;PTEN的表達與年齡、性別、浸潤深度、TMN分期、腫塊大小無關(guān)（P>0.05），與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P<0.05），見表1。

2.3 FGFR2、HER2和PTEN表達的相關(guān)性 ?Spearman相關(guān)分析顯示，PTEN表達與HER2表達呈負相關(guān)（r=-0.316，P<0.05），與FGFR2表達呈負相關(guān)（r=-0.233，P<0.05）;HER2與FGFR2的表達呈正相關(guān)（r=0.586，P<0.05）。

3討論

FGFR2與HER2均屬于酪氨酸激酶受體家族，F(xiàn)GFR2的表達異常與基因多態(tài)性與多種腫瘤相關(guān)，如乳腺癌[5]、膽管癌[6]、肺癌[7]等，并且與腫瘤細胞增生、侵襲有關(guān)[8]。HER2最先被發(fā)現(xiàn)在乳腺癌中過表達，并與患者預(yù)后有關(guān)，HER2可以通過磷脂酰肌醇3激酶通路調(diào)控細胞增殖，抗凋亡，影響新生血管的形成，參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展[9， 10]。目前有研究表明在手術(shù)切除的胃癌中有63.10%的病例至少可以表達4種酪氨酸激酶受體的其中一種[11]。本研究結(jié)果表明，F(xiàn)GFR2在胃癌的表達率為67.80%，HER2的表達率為46.40%， FGFR2的表達與浸潤深度、TNM分期、腫塊大小有關(guān)，HER2的表達與腫塊大小、浸潤深度有關(guān)，提示GFR2、HER2過表達與與胃癌的侵襲有關(guān)，參與胃癌的發(fā)生發(fā)展，是潛在的治療靶點。有研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)GFR2與HER2在乳腺癌中共同定位，同時激活，F(xiàn)GFR2與選擇性配套FGF7的激活能控制HER2信號傳導(dǎo)[12]，F(xiàn)GFR2可以通過c-Src反式激活HER2，導(dǎo)致對HER2靶向治療的抵抗[13]。在胃癌患者中，本研究發(fā)現(xiàn)HER2與FGFR2的表達在胃癌中呈正相關(guān)，推測這兩種基因通過協(xié)同作用引起胃癌。

PTEN是一個有著雙特性性磷酸酶活性的一種重要的抑癌基因，有研究表明抑癌基因在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起的作用可能比癌基因的活化更重要[14]。本研究發(fā)現(xiàn)，PTEN在胃癌組織中的表達為38.10%，低于正常胃組織中的表達，提示PTEN的缺失或失活在胃癌發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用，PTEN的表達與腫瘤分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示PTEN與胃癌的診斷及預(yù)后相關(guān)，與楊銘[15]及覃俊峰[16]等的研究結(jié)果一致。

已經(jīng)有少量研究發(fā)現(xiàn)PTEN與HER2表達對胃癌發(fā)生發(fā)展的影響。Zaitsu Y等[17]在121例胃癌患者中發(fā)現(xiàn)有20.00%的病例存在PTEN基因缺失，其中HER2高表達伴PTEN雜合性缺失的胃癌患者預(yù)后明顯較差。Badary SA等[18]的研究表明，在缺乏PTEN表達的胃癌組織中，HER2的表達陽性率較高。本研究結(jié)果與之一致，PTEN的表達與HER2的表達呈負相關(guān)。有研究報道FGFR2在子宮內(nèi)膜癌中的表達與PTEN表達呈負相關(guān)，在PTEN缺失和AKT磷酸化背景下，F(xiàn)GFR2的激活圖標可以誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜癌細胞周期阻滯和細胞死亡，這一作用機制主要是細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2激活降低所致。在前列腺癌中，PTEN的表達缺失可誘導(dǎo)FGFR2的表達增加，在TE融合基因表達時，F(xiàn)GFR家族信號在PTEN抑癌基因丟失誘導(dǎo)轉(zhuǎn)換中起了非常重要的作用[19]。而PTEN和FGFR2兩者在胃癌中的表達相關(guān)性目前尚不明確。本次研究發(fā)現(xiàn)，在胃癌中PTEN的表達與FGFR2的表達呈負相關(guān)，提示PTEN在胃癌發(fā)生發(fā)展中可能通過負性調(diào)節(jié)FGFR2和HER2的表達發(fā)揮致癌作用，其具體機制有待進一步研究。

目前，F(xiàn)GFR2及HER2的抑制劑已經(jīng)開始應(yīng)用于膽管癌[20]、胃癌[21]的治療，Zhang X等[4]研究表明，胃癌患者PTEN 表達缺失提示曲妥珠單抗或拉帕替尼治療可能會產(chǎn)生早期抗藥性。Deguchi Y等[22]對胃食管腺癌患者使用曲妥珠單抗發(fā)現(xiàn)，PTEN基因敲除可以通過激活A(yù)kt信號通路抑制曲妥珠單抗介導(dǎo)的腫瘤細胞抑制、凋亡和G1周期阻滯，因而導(dǎo)致胃食管交界腺癌患者對曲妥珠單抗治療反應(yīng)低下[22]。本次研究進一步證實了胃癌患者PTEN表達減少，PTEN表達與FGFR2、HER2表達呈負相關(guān)，這可能是部分患者使用酪氨酸激酶抑制劑靶向治療效果不佳的原因之一，但本研究樣本量較少，需擴大樣本及進一步研究來闡明這一關(guān)系。

綜上所述，聯(lián)合檢測胃癌患者FGFR2、HER2的表達及 PTEN的表達水平，對胃癌患者預(yù)后判斷及靶向藥物選擇有一定意義。

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收稿日期：2020-08-03;修回日期：2020-08-13

編輯/錢洪飛