楊姍姍，劉 威，陳 勃

(吉林大學第一醫(yī)院二部 1.檢驗科;2.輸血科，吉林 長春130031)

紅酵母菌(Rhodotorula spp)，屬于隱球菌科，孢子為球形、卵圓形或長形，有明顯的紅色或橘黃色色素，廣泛存在于自然界中，既往被認為無致病性。近年來，由紅酵母菌引起的腹膜透析性相關(guān)性腹膜炎、中樞神經(jīng)系統(tǒng)的真菌血癥逐年增多，視為條件致病菌[1-4]，現(xiàn)將由于誤輸入“井水”導致膠紅酵母菌感染，引起真菌血癥1例病例，報道如下。

1 病例資料

患者，女性，77歲，高血壓病史20年，入院前7 h因誤輸入井水后出現(xiàn)周身疼痛，以劍突下為主，伴寒戰(zhàn)、發(fā)熱，體溫38.3℃，呼吸困難，咳嗽、咳痰，無腹痛、腹瀉癥狀。

實驗室檢查：真菌D-葡聚糖檢測66.36 pg/ml，降鈣素原9.87 μg/L；鉀(K) 3.33 mmol/L，AST 186 U/L，GGT 196 U/L，ALT 126 U/L；D-二聚體(D-D)>20 μg/ml；纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDP)>150 μg/ml；CRP:15.45 mg/L；WBC:15.31×109/L，NE%:93.3%。由于高熱伴隨炎癥反應(yīng)給予頭孢他啶2 g,2次/d?；颊咴俅伟l(fā)熱寒戰(zhàn)，采集靜脈血分別注入需氧、厭氧及真菌/結(jié)核培養(yǎng)瓶，各2瓶，患者拒絕抗真菌治療，定期監(jiān)測真菌D-葡聚糖。

經(jīng)BACTEC(TM)FX-400全自動血培養(yǎng)鑒定系統(tǒng)(美國BD公司)進行培養(yǎng)，真菌瓶BACTEC Myco/F-Lytic 2天15 h 17 min報警陽性,需氧樹脂瓶13 h 15 min報警陽性(美國BD公司)，直接涂片革蘭染色(珠海貝索)鏡檢見酵母樣孢子，將報警陽性瓶接種于沙保弱葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)，2套分別放置28℃和36℃孵育箱，培養(yǎng)24-48 h。

MALDI-TOF MS(美國BD公司布魯克質(zhì)譜鑒定儀)全血快速鑒定。將報警陽性瓶中的全血抽出放入帶分離膠的BD采血管,采集6 ml/管，1 200 g離心10 min,將分離管底部灰白色沉淀用無菌加樣槍移至1.5 ml無菌 eppdorf管中,管中加入75%乙醇900 μl,振蕩器充分混勻后13 000 g離心3 min，取50 μl乙腈和50 μl 70%的甲酸加入eppdorf管中，震蕩混勻后13 000 g離心2 min。用無菌加樣槍取已制備好的上清液1 μl至不銹鋼靶板孔，自然干燥后加1 μl基質(zhì)液(儀器配套)待干燥后上機。

MALDI-TOF MS質(zhì)譜鑒定結(jié)果為膠紅酵母菌(Rhodotorula mucilaginosa)Score Value2.316。菌落特征：在SDA培養(yǎng)基上生長較快，酵母樣菌落，光滑濕潤，隨著培養(yǎng)時間的延長可出現(xiàn)腦回樣褶皺，因產(chǎn)生胡蘿卜素，菌落顏色為桃紅色、珊瑚色或淺橙色，直接壓片鏡檢，細胞多細長，出芽，似有假菌絲，具有莢膜的圓形的出芽酵母，莢膜較小。區(qū)分鑒別試驗：膠紅酵母酵素酶陽性，硝酸鹽還原試驗陰性，不能發(fā)酵其他糖類，無同化肌醇的能力，粘紅酵母硝酸鹽還原試驗陽性。與隱球菌屬的區(qū)別：隱球菌鏡檢莢膜寬大，SDA上菌落為奶白色，膠紅酵母鏡檢莢膜小且SDA上菌落為桃紅色。

根據(jù)美國CLSI-M27-S4進行體外藥敏，結(jié)果判讀質(zhì)控菌株為ATCC6258，藥敏試劑為Thermo sensititerTM YeastOne YO10,膠紅酵母菌藥敏MIC值結(jié)果：米卡芬凈(MF)>8 μg/ml，卡泊芬凈(CAS)>8 μg/ml，阿尼芬凈(AND)>8 μg/ml,氟康唑(FCA)>256 μg/ml，兩性霉素B(AMB)0.25 μg/ml,5-氟胞嘧啶(5-FC) ≤0.06 μg/ml,伊曲康唑(ITR)0.25 μg/ml，伏立康唑(VRC)0.25 μg/ml，泊沙康唑(PZ)1 μg/ml。

2 討論

常見的紅酵母菌有60種，導致人類致病的是膠紅酵母菌、小紅酵母菌、粘紅酵母菌，紅酵母菌是潮濕皮膚的定植菌，可以從浴簾、浴缸、牙刷中分離出來，近年來由于廣譜抗生素，粒細胞的減少及HIV感染，惡性腫瘤，中心靜脈導管(CVC)置管，以及器官移植后免疫抑制劑的使用，使紅酵母菌引起的真菌血癥持續(xù)增加[5]，據(jù)報道紅酵母菌感染最多為血流感染，其次眼角膜炎、腹膜透析相關(guān)性腹膜炎、心內(nèi)膜炎及神經(jīng)中樞系統(tǒng)感染，除膠紅酵母菌外還有少量粘紅酵母菌感染[6]，在免疫正常人群中紅酵母菌較其他念珠菌毒力相對較低，真正由于紅酵母菌引起菌血癥死亡人數(shù)較少[7]，本實驗體外真菌藥敏不難看出膠紅酵母菌對氟康唑、棘白菌素類抗真菌藥耐藥，兩性霉素B伊曲康唑、伏立康唑較敏感，與報道一致[8]，推薦首選兩性霉素B，該患者用藥7天，未出現(xiàn)發(fā)熱，體溫降至正常，由于費用較高，患者出院。傳統(tǒng)培養(yǎng)鏡檢耗時長，能夠利用質(zhì)譜鑒定儀直接對真菌瓶中全血快速準確的鑒定尤為重要。